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Geminin通过调控Fgf8和Notch信号协调Somite形成的分子机制研究

摘要第8-10页
Abstract第10-11页
第1章 前言第12-26页
    1.1 体节研究背景和进展第12-15页
        1.1.1 体节发生的过程第12-13页
        1.1.2 体节发生的特点第13-15页
    1.2 体节发生的主要模型及主要分子机制第15-21页
        1.2.1 体节发生的主要模型第15-17页
            1.2.1.1 clock and wavefront(时钟和波峰)模型第15-16页
            1.2.1.2 The Reaction-Diffusion(反应和扩散)模型第16页
            1.2.1.3 The Cell Cycle(细胞周期)模型第16-17页
            1.2.1.4 The Spatio-Temporal(空间和时间)模型第17页
        1.2.2 体节发生的主要分子机制与信号通路第17-21页
    1.3 细胞周期因子Geminin在细胞周期和发育中的作用第21-24页
        1.3.1 细胞周期因子Geminin在细胞周期的作用第21-22页
        1.3.2 细胞周期因子Geminin在胚胎发育中的作用第22-24页
    1.4 模式动物斑马鱼在胚胎体节发育研究中的作用第24-26页
第2章 材料和方法第26-44页
    2.1 实验动物斑马鱼及其饲养第26页
    2.2 试剂、耗材和仪器第26页
    2.3 培养基和有关主要试剂的配置第26-31页
        2.3.1 LB培养基的配制第26-27页
        2.3.2 实验所需各种缓冲试剂的配制第27-28页
        2.3.3 western blot相关溶液的配制第28-29页
        2.3.4 原位杂交相关溶液配制第29-30页
        2.3.5 cell death杂交溶液的配制第30页
        2.3.6 Antibody staining(抗体显色)相关溶液的配制第30-31页
        2.3.7 其他相关溶液配制第31页
    2.4 质粒和菌株第31页
    2.5 实验方法第31-43页
        2.5.1 斑马鱼total RNA的提取第31-32页
        2.5.2 反转录制备cDNA第32页
        2.5.3 电转感受态的制备第32页
        2.5.4 重组质粒的构建第32-34页
        2.5.5 反义探针的制备第34-35页
        2.5.6 正义mRNA的合成与纯化第35-36页
        2.5.7 胚胎mRNA、MO注射和细胞移植第36-37页
        2.5.8 全胚胎原位杂交(Whole mount in situ hybridization)第37-39页
        2.5.9 整胚抗体显色反应(whole mount antibody staing)第39页
        2.5.10 细胞凋亡原位杂交第39-40页
        2.5.11 Western Blot第40页
        2.5.12 药物处理第40页
        2.5.13 胚胎热激实验第40-41页
        2.5.14 染色质免疫沉淀(ChIP)实验第41-42页
        2.5.15 荧光定量PCR第42页
        2.5.16 荧光素酶报告实验第42-43页
        2.5.17 显微镜拍照第43页
    2.6 实验数据统计及分析第43-44页
第3章 细胞周期因子Geminin在斑马鱼体节形成和发育建成中的作用机制研究第44-54页
    3.1 引言第44-45页
    3.2 实验结果第45-51页
        3.2.1 Geminin参与了体节发生过程的调控第45-48页
        3.2.2 Geminin特异性的参与了体节发生过程的调控第48-51页
    3.3 讨论第51-52页
    3.4 总结第52-54页
第4章 Geminin通过调控Fgf8和视黄酸(RA)的拮抗作用影响体节发生过程的作用机制研究第54-64页
    4.1 引言第54-56页
    4.2 实验结果第56-61页
        4.2.1 Geminin特异性的参与调控体节大小,依靠RA-FGF8在体节发生中的浓度拮抗变化第56-61页
    4.3 讨论第61页
    4.4 结论第61-64页
第5章 Geminin通过依赖于mib1的Notch信号通路途径和非依赖于mib1的Notch信号通路途径对体节发生调控的作用机制研究第64-78页
    5.1 引言第64-65页
    5.2 实验结果第65-75页
        5.2.1 内源性Geminin下调后Notch信号通路在介导体节发育中的作用第65-69页
        5.2.2 Geminin调控体节发育时期胚胎mib1基因的表达第69-72页
        5.2.3 转录因子Brg1协助geminin与mib1基因内含子3相互结合从而调控转录因子mib1的转录第72-75页
    5.3 讨论第75-76页
    5.4 结论第76-78页
第6章 总结第78-82页
参考文献第82-92页
致谢第92-94页
博士在读期间发表论文及科研工作第94页
    一、科研论文第94页
    二、科研工作第94页

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