摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
第1章 前言 | 第12-26页 |
1.1 体节研究背景和进展 | 第12-15页 |
1.1.1 体节发生的过程 | 第12-13页 |
1.1.2 体节发生的特点 | 第13-15页 |
1.2 体节发生的主要模型及主要分子机制 | 第15-21页 |
1.2.1 体节发生的主要模型 | 第15-17页 |
1.2.1.1 clock and wavefront(时钟和波峰)模型 | 第15-16页 |
1.2.1.2 The Reaction-Diffusion(反应和扩散)模型 | 第16页 |
1.2.1.3 The Cell Cycle(细胞周期)模型 | 第16-17页 |
1.2.1.4 The Spatio-Temporal(空间和时间)模型 | 第17页 |
1.2.2 体节发生的主要分子机制与信号通路 | 第17-21页 |
1.3 细胞周期因子Geminin在细胞周期和发育中的作用 | 第21-24页 |
1.3.1 细胞周期因子Geminin在细胞周期的作用 | 第21-22页 |
1.3.2 细胞周期因子Geminin在胚胎发育中的作用 | 第22-24页 |
1.4 模式动物斑马鱼在胚胎体节发育研究中的作用 | 第24-26页 |
第2章 材料和方法 | 第26-44页 |
2.1 实验动物斑马鱼及其饲养 | 第26页 |
2.2 试剂、耗材和仪器 | 第26页 |
2.3 培养基和有关主要试剂的配置 | 第26-31页 |
2.3.1 LB培养基的配制 | 第26-27页 |
2.3.2 实验所需各种缓冲试剂的配制 | 第27-28页 |
2.3.3 western blot相关溶液的配制 | 第28-29页 |
2.3.4 原位杂交相关溶液配制 | 第29-30页 |
2.3.5 cell death杂交溶液的配制 | 第30页 |
2.3.6 Antibody staining(抗体显色)相关溶液的配制 | 第30-31页 |
2.3.7 其他相关溶液配制 | 第31页 |
2.4 质粒和菌株 | 第31页 |
2.5 实验方法 | 第31-43页 |
2.5.1 斑马鱼total RNA的提取 | 第31-32页 |
2.5.2 反转录制备cDNA | 第32页 |
2.5.3 电转感受态的制备 | 第32页 |
2.5.4 重组质粒的构建 | 第32-34页 |
2.5.5 反义探针的制备 | 第34-35页 |
2.5.6 正义mRNA的合成与纯化 | 第35-36页 |
2.5.7 胚胎mRNA、MO注射和细胞移植 | 第36-37页 |
2.5.8 全胚胎原位杂交(Whole mount in situ hybridization) | 第37-39页 |
2.5.9 整胚抗体显色反应(whole mount antibody staing) | 第39页 |
2.5.10 细胞凋亡原位杂交 | 第39-40页 |
2.5.11 Western Blot | 第40页 |
2.5.12 药物处理 | 第40页 |
2.5.13 胚胎热激实验 | 第40-41页 |
2.5.14 染色质免疫沉淀(ChIP)实验 | 第41-42页 |
2.5.15 荧光定量PCR | 第42页 |
2.5.16 荧光素酶报告实验 | 第42-43页 |
2.5.17 显微镜拍照 | 第43页 |
2.6 实验数据统计及分析 | 第43-44页 |
第3章 细胞周期因子Geminin在斑马鱼体节形成和发育建成中的作用机制研究 | 第44-54页 |
3.1 引言 | 第44-45页 |
3.2 实验结果 | 第45-51页 |
3.2.1 Geminin参与了体节发生过程的调控 | 第45-48页 |
3.2.2 Geminin特异性的参与了体节发生过程的调控 | 第48-51页 |
3.3 讨论 | 第51-52页 |
3.4 总结 | 第52-54页 |
第4章 Geminin通过调控Fgf8和视黄酸(RA)的拮抗作用影响体节发生过程的作用机制研究 | 第54-64页 |
4.1 引言 | 第54-56页 |
4.2 实验结果 | 第56-61页 |
4.2.1 Geminin特异性的参与调控体节大小,依靠RA-FGF8在体节发生中的浓度拮抗变化 | 第56-61页 |
4.3 讨论 | 第61页 |
4.4 结论 | 第61-64页 |
第5章 Geminin通过依赖于mib1的Notch信号通路途径和非依赖于mib1的Notch信号通路途径对体节发生调控的作用机制研究 | 第64-78页 |
5.1 引言 | 第64-65页 |
5.2 实验结果 | 第65-75页 |
5.2.1 内源性Geminin下调后Notch信号通路在介导体节发育中的作用 | 第65-69页 |
5.2.2 Geminin调控体节发育时期胚胎mib1基因的表达 | 第69-72页 |
5.2.3 转录因子Brg1协助geminin与mib1基因内含子3相互结合从而调控转录因子mib1的转录 | 第72-75页 |
5.3 讨论 | 第75-76页 |
5.4 结论 | 第76-78页 |
第6章 总结 | 第78-82页 |
参考文献 | 第82-92页 |
致谢 | 第92-94页 |
博士在读期间发表论文及科研工作 | 第94页 |
一、科研论文 | 第94页 |
二、科研工作 | 第94页 |