| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 专业词汇中英文对照表 | 第12-14页 |
| 第一章 引言 | 第14-34页 |
| 1.1 人源DNA聚合酶δ | 第14-24页 |
| 1.1.1 人源DNA聚合酶δ的亚基组成与结构 | 第14-20页 |
| 1.1.2 人源DNA聚合酶δ的功能 | 第20-24页 |
| 1.2 DNA损伤耐受与TLS聚合酶 | 第24-27页 |
| 1.2.1 DNA损伤耐受 | 第24页 |
| 1.2.2 TLS聚合酶 | 第24-27页 |
| 1.3 增殖细胞核抗原(PCNA)和泛素化修饰 | 第27-29页 |
| 1.3.1 增殖细胞核抗原(PCNA) | 第27-28页 |
| 1.3.2 泛素化修饰 | 第28-29页 |
| 1.4 跨损伤合成中Polδ和TLS聚合酶的交换机制 | 第29-32页 |
| 1.4.1 跨损伤合成 | 第29-30页 |
| 1.4.2 聚合酶交换机制 | 第30-31页 |
| 1.4.3 TLS途径中可能存在某种未知的聚合酶交换新机制 | 第31-32页 |
| 1.5 立题依据 | 第32页 |
| 1.6 研究内容与研究意义 | 第32-34页 |
| 1.6.1 研究内容 | 第32-33页 |
| 1.6.2 研究意义 | 第33-34页 |
| 第二章 材料与方法 | 第34-54页 |
| 2.1 实验材料 | 第34-41页 |
| 2.1.1 菌种、质粒及细胞系 | 第34页 |
| 2.1.2 蛋白和抗体 | 第34页 |
| 2.1.3 试剂、试剂盒及材料 | 第34-36页 |
| 2.1.4 相关试剂的配制 | 第36-40页 |
| 2.1.5 实验仪器 | 第40-41页 |
| 2.2 实验方法 | 第41-54页 |
| 2.2.1 引物合成 | 第41页 |
| 2.2.2 菌种的复苏与活化 | 第41页 |
| 2.2.3 质粒的提取 | 第41-42页 |
| 2.2.4 PCR合成目的基因 | 第42-43页 |
| 2.2.5 PCR产物纯化 | 第43页 |
| 2.2.6 目的基因与载体的双酶切 | 第43页 |
| 2.2.7 酶切产物胶回收 | 第43-44页 |
| 2.2.8 目的基因与载体连接 | 第44页 |
| 2.2.9 感受态细胞的制备 | 第44-45页 |
| 2.2.10 连接产物转化DH5α | 第45页 |
| 2.2.11 菌液PCR | 第45-46页 |
| 2.2.12 重组质粒双酶切验证 | 第46页 |
| 2.2.13 细胞的培养 | 第46-47页 |
| 2.2.14 去内毒素质粒的提取 | 第47-48页 |
| 2.2.15 细胞转染 | 第48页 |
| 2.2.16 UV-C损伤处理 | 第48-49页 |
| 2.2.17 细胞收集 | 第49页 |
| 2.2.18 细胞总蛋白的提取 | 第49页 |
| 2.2.19 免疫沉淀 | 第49页 |
| 2.2.20 SDS-PAGE电泳 | 第49-50页 |
| 2.2.21 免疫印迹(Western-Blot) | 第50-51页 |
| 2.2.22 体外泛素化反应 | 第51-52页 |
| 2.2.23 免疫荧光技术 | 第52-54页 |
| 第三章 研究结果 | 第54-71页 |
| 3.1 不同E2/E3调控系统下体外Polδ各亚基泛素化修饰的分析 | 第54-61页 |
| 3.1.1 UbcH5c/RNF8介导的Polδ各亚基的泛素化修饰 | 第54-57页 |
| 3.1.2 Rad6/Rad18介导的Polδ各亚基的泛素化修饰 | 第57-61页 |
| 3.2 UV诱导产生DNA损伤情况下细胞内p50泛素化修饰的验证 | 第61-66页 |
| 3.2.1 细胞内p50的泛素化修饰 | 第61-62页 |
| 3.2.2 经免疫沉淀后细胞内p50的泛素化修饰 | 第62-63页 |
| 3.2.3 过表达下细胞内p50的泛素化修饰 | 第63-66页 |
| 3.3 UV诱导产生DNA损伤情况下TLS相关蛋白的亚细胞定位 | 第66-71页 |
| 3.3.1 Polδ(p50)在DNA损伤点的募集 | 第66-67页 |
| 3.3.2 Polδ与RNF8在DNA损伤点的亚细胞共定位 | 第67-69页 |
| 3.3.3 Polδ与Polε在DNA损伤点的亚细胞共定位 | 第69-71页 |
| 第四章 分析与讨论 | 第71-75页 |
| 参考文献 | 第75-89页 |
| 致谢 | 第89-91页 |
| 在学期间发表的学术论文及其他科研成果 | 第91页 |
