摘要 | 第5-7页 |
ABSTRAC | 第7-9页 |
中英文缩略词表 | 第10-13页 |
第一章 绪论 | 第13-19页 |
1.1 小肠结肠炎耶尔森菌简介 | 第13-14页 |
1.2 革兰阴性细菌OmpA功能介绍 | 第14-19页 |
1.2.1 OmpA与细菌致病性 | 第15-16页 |
1.2.2 OmpA与细菌耐药 | 第16-17页 |
1.2.3 OmpA的免疫保护功能 | 第17-19页 |
第二章 研究目的、内容及技术路线 | 第19-20页 |
2.1 研究目的 | 第19页 |
2.2 研究内容 | 第19页 |
2.3 技术路线 | 第19-20页 |
第三章 致病性小肠结肠炎耶尔森菌OmpA在细菌粘附侵袭和毒性中的作用研究 | 第20-41页 |
3.1 材料与仪器 | 第20-23页 |
3.1.1 菌株及质粒 | 第20-21页 |
3.1.2 主要试剂 | 第21-22页 |
3.1.3 主要溶液配制 | 第22-23页 |
3.1.4 主要仪器与耗材 | 第23页 |
3.2 方法 | 第23-35页 |
3.2.1 构建小肠结肠炎耶尔森菌ail缺失株 | 第23-30页 |
3.2.2 实验菌株鉴定 | 第30-31页 |
3.2.3 细胞培养 | 第31-32页 |
3.2.4 粘附侵袭实验 | 第32-33页 |
3.2.5 细胞毒性实验 | 第33-34页 |
3.2.6 统计学分析 | 第34-35页 |
3.3 结果 | 第35-39页 |
3.3.1 成功构建小肠结肠炎耶尔森菌ail缺失株 | 第35页 |
3.3.2 实验所用菌株PCR鉴定结果 | 第35-36页 |
3.3.3 OmpA在小肠结肠炎耶尔森菌细胞粘附能力中的作用 | 第36-37页 |
3.3.4 OmpA在小肠结肠炎耶尔森菌细胞侵袭能力中的作用 | 第37-38页 |
3.3.5 OmpA在小肠结肠炎耶尔森菌产生细胞毒性中的作用 | 第38-39页 |
3.4 讨论 | 第39-41页 |
第四章 致病性小肠结肠炎耶尔森菌OmpA在细菌耐药中的作用研究 | 第41-53页 |
4.1 材料与仪器 | 第41-43页 |
4.1.1 菌株 | 第41-42页 |
4.1.2 主要试剂 | 第42页 |
4.1.3 主要溶液配制 | 第42页 |
4.1.4 主要仪器与耗材 | 第42-43页 |
4.2 方法 | 第43-46页 |
4.2.1 105.5 R(r)及其缺失株MIC值测定 | 第43页 |
4.2.2 105.5 R(r)及其缺失株ampC启动子活性检测 | 第43-44页 |
4.2.3 105.5 R(r)及其缺失株β-内酰胺酶活性检测 | 第44-45页 |
4.2.4 105.5 R(r)及其缺失株生长曲线测定 | 第45-46页 |
4.2.5 统计学分析 | 第46页 |
4.3 结果 | 第46-51页 |
4.3.1 105.5 R(r)及其缺失株药敏实验结果 | 第46页 |
4.3.2 OmpA在ampC基因调控中的作用 | 第46页 |
4.3.3 OmpA对β-内酰胺酶活性的影响 | 第46-49页 |
4.3.4 OmpA在细菌抵抗氧化压力、铁缺乏条件中的作用 | 第49-51页 |
4.4 讨论 | 第51-53页 |
第五章 致病性小肠结肠炎耶尔森菌OmpA对SD大鼠免疫保护的作用研究 | 第53-69页 |
5.1 材料与试剂 | 第53-56页 |
5.1.1 实验动物 | 第53页 |
5.1.2 主要试剂 | 第53-54页 |
5.1.3 主要溶液配制 | 第54-56页 |
5.1.4 主要仪器与耗材 | 第56页 |
5.2 方法 | 第56-61页 |
5.2.1 目的蛋白的表达与纯化 | 第56-57页 |
5.2.2 目的蛋白的验证 | 第57-58页 |
5.2.3 目的蛋白的定量 | 第58页 |
5.2.4 目的蛋白的复性 | 第58-59页 |
5.2.5 动物免疫 | 第59页 |
5.2.6 免疫大鼠的攻毒 | 第59页 |
5.2.7 粪便排菌检测 | 第59-60页 |
5.2.8 制作组织病理切片 | 第60-61页 |
5.3 结果 | 第61-66页 |
5.3.1 OmpA蛋白的验证结果 | 第61页 |
5.3.2 攻毒后大鼠存活率 | 第61-62页 |
5.3.3 攻毒后大鼠排菌情况 | 第62页 |
5.3.4 攻毒后大鼠肝、脾、肠大体病理变化 | 第62-63页 |
5.3.5 攻毒后大鼠组织病理学分析 | 第63-66页 |
5.4 讨论 | 第66-69页 |
小结 | 第69-70页 |
参考文献 | 第70-76页 |
致谢 | 第76-77页 |
攻读硕士学位期间发表的论文和参与的课题 | 第77页 |