摘要 | 第5-7页 |
abstract | 第7-9页 |
缩写索引 | 第12-13页 |
1 绪论 | 第13-18页 |
1.1 伤寒沙门菌简介 | 第13-14页 |
1.2 非编码RNA | 第14-16页 |
1.3 鞭毛和flhDC操纵子 | 第16-17页 |
1.4 课题由来 | 第17-18页 |
2 本论文研究目的、内容、技术路线 | 第18-21页 |
2.1 研究目的 | 第18页 |
2.2 研究内容 | 第18页 |
2.3 技术路线 | 第18-21页 |
2.3.1 伤寒沙门菌ncRNAAsfD的分子特征鉴定 | 第18-19页 |
2.3.2 伤寒沙门菌ncRNAAsfD的表达特性研究 | 第19页 |
2.3.3 伤寒沙门菌ncRNAAsfD功能研究 | 第19页 |
2.3.4 伤寒沙门菌ncRNAAsfD影响动力的分子机制 | 第19-21页 |
3 材料与方法 | 第21-43页 |
3.1 材料 | 第21-26页 |
3.1.1 菌株和质粒 | 第21页 |
3.1.2 主要试剂 | 第21-22页 |
3.1.3 主要溶液 | 第22-25页 |
3.1.4 主要仪器 | 第25-26页 |
3.2 实验方法 | 第26-43页 |
3.2.1 伤寒沙门菌ncRNAAsfD的存在性分析 | 第26-29页 |
3.2.2 伤寒沙门菌ncRNAAsfD的全长鉴定 | 第29-36页 |
3.2.3 伤寒沙门菌ncRNAAsfD的表达特性分析 | 第36-37页 |
3.2.4 伤寒沙门菌ncRNAAsfD高表达菌株的构建 | 第37-40页 |
3.2.5 伤寒沙门菌ncRNAAsfD的功能研究 | 第40-41页 |
3.2.6 伤寒沙门菌ncRNA AsfD影响动力的分子机制 | 第41-43页 |
4 结果 | 第43-59页 |
4.1 伤寒沙门菌AsfD的存在性分析 | 第43-44页 |
4.1.1 RT-PCR验证伤寒沙门菌中AsfD的存在 | 第43页 |
4.1.2 Northern杂交法鉴定AsfD在伤寒沙门菌中的存在 | 第43-44页 |
4.2 伤寒沙门菌AsfD分子全长鉴定 | 第44-48页 |
4.2.1 RT-PCR分析AsfD的转录起始和终止位区域 | 第44-45页 |
4.2.2 5 ’RACE分析AsfD的5’端位置 | 第45-48页 |
4.2.3 伤寒沙门菌AsfD的基因结构图 | 第48页 |
4.3 伤寒沙门菌AsfD的表达特性分析 | 第48-49页 |
4.3.1 Northern杂交法检测伤寒沙门菌不同生长时期AsfD的表达 | 第48页 |
4.3.2 qRT-PCR检测伤寒沙门菌不同生长时期AsfD的表达水平 | 第48-49页 |
4.3.3 qRT-PCR检测伤寒沙门菌在不同应激下AsfD的表达 | 第49页 |
4.4 伤寒沙门菌AsfD高表达菌株的制备 | 第49-55页 |
4.5 AsfD功能分析 | 第55-57页 |
4.5.1 AsfD高表达菌株对伤寒沙门菌动力的影响 | 第55页 |
4.5.2 AsfD高表达菌株生物膜试验 | 第55-56页 |
4.5.3 HeLa细胞侵袭实验 | 第56-57页 |
4.6 伤寒沙门菌AsfD影响动力的分子机制 | 第57-59页 |
4.6.1 qRT-PCR分析AsfD对flhDC及鞭毛基因mRNA影响 | 第57-58页 |
4.6.2 Westernblot分析AsfD对FljB蛋白水平的影响 | 第58-59页 |
5 讨论 | 第59-63页 |
6 主要结论及展望 | 第63-64页 |
6.1 主要结论 | 第63页 |
6.2 展望 | 第63-64页 |
参考文献 | 第64-71页 |
致谢 | 第71-72页 |
攻读硕士学位期间发表论文及学术交流 | 第72页 |