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伤寒孙门菌反义RNA AsfD分子特性及功能研究

摘要第5-7页
abstract第7-9页
缩写索引第12-13页
1 绪论第13-18页
    1.1 伤寒沙门菌简介第13-14页
    1.2 非编码RNA第14-16页
    1.3 鞭毛和flhDC操纵子第16-17页
    1.4 课题由来第17-18页
2 本论文研究目的、内容、技术路线第18-21页
    2.1 研究目的第18页
    2.2 研究内容第18页
    2.3 技术路线第18-21页
        2.3.1 伤寒沙门菌ncRNAAsfD的分子特征鉴定第18-19页
        2.3.2 伤寒沙门菌ncRNAAsfD的表达特性研究第19页
        2.3.3 伤寒沙门菌ncRNAAsfD功能研究第19页
        2.3.4 伤寒沙门菌ncRNAAsfD影响动力的分子机制第19-21页
3 材料与方法第21-43页
    3.1 材料第21-26页
        3.1.1 菌株和质粒第21页
        3.1.2 主要试剂第21-22页
        3.1.3 主要溶液第22-25页
        3.1.4 主要仪器第25-26页
    3.2 实验方法第26-43页
        3.2.1 伤寒沙门菌ncRNAAsfD的存在性分析第26-29页
        3.2.2 伤寒沙门菌ncRNAAsfD的全长鉴定第29-36页
        3.2.3 伤寒沙门菌ncRNAAsfD的表达特性分析第36-37页
        3.2.4 伤寒沙门菌ncRNAAsfD高表达菌株的构建第37-40页
        3.2.5 伤寒沙门菌ncRNAAsfD的功能研究第40-41页
        3.2.6 伤寒沙门菌ncRNA AsfD影响动力的分子机制第41-43页
4 结果第43-59页
    4.1 伤寒沙门菌AsfD的存在性分析第43-44页
        4.1.1 RT-PCR验证伤寒沙门菌中AsfD的存在第43页
        4.1.2 Northern杂交法鉴定AsfD在伤寒沙门菌中的存在第43-44页
    4.2 伤寒沙门菌AsfD分子全长鉴定第44-48页
        4.2.1 RT-PCR分析AsfD的转录起始和终止位区域第44-45页
        4.2.2 5 ’RACE分析AsfD的5’端位置第45-48页
        4.2.3 伤寒沙门菌AsfD的基因结构图第48页
    4.3 伤寒沙门菌AsfD的表达特性分析第48-49页
        4.3.1 Northern杂交法检测伤寒沙门菌不同生长时期AsfD的表达第48页
        4.3.2 qRT-PCR检测伤寒沙门菌不同生长时期AsfD的表达水平第48-49页
        4.3.3 qRT-PCR检测伤寒沙门菌在不同应激下AsfD的表达第49页
    4.4 伤寒沙门菌AsfD高表达菌株的制备第49-55页
    4.5 AsfD功能分析第55-57页
        4.5.1 AsfD高表达菌株对伤寒沙门菌动力的影响第55页
        4.5.2 AsfD高表达菌株生物膜试验第55-56页
        4.5.3 HeLa细胞侵袭实验第56-57页
    4.6 伤寒沙门菌AsfD影响动力的分子机制第57-59页
        4.6.1 qRT-PCR分析AsfD对flhDC及鞭毛基因mRNA影响第57-58页
        4.6.2 Westernblot分析AsfD对FljB蛋白水平的影响第58-59页
5 讨论第59-63页
6 主要结论及展望第63-64页
    6.1 主要结论第63页
    6.2 展望第63-64页
参考文献第64-71页
致谢第71-72页
攻读硕士学位期间发表论文及学术交流第72页

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