| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 第1章 文献综述 | 第10-18页 |
| 1.1 组蛋白去乙酰酶的研究进展 | 第10-12页 |
| 1.1.1 组蛋白去乙酰化酶的分类 | 第10-11页 |
| 1.1.2 组蛋白去乙酰化酶在植物生长发育过程的作用 | 第11-12页 |
| 1.1.3 组蛋白去乙酰化酶在植物胁迫反应中的作用 | 第12页 |
| 1.2 MADS家族的研究进展 | 第12-14页 |
| 1.2.1 MADS家族的分类特点 | 第12-13页 |
| 1.2.2 MADS家族在植物生长发育中的作用 | 第13-14页 |
| 1.2.3 MADS家族在植物胁迫反应中的作用 | 第14页 |
| 1.3 蛋白-蛋白互作的研究方法 | 第14-16页 |
| 1.3.1 酵母双杂交系统 | 第14-15页 |
| 1.3.2 Pull-down | 第15-16页 |
| 1.4 蛋白-DNA互作的研究方法 | 第16-18页 |
| 1.4.1 酵母单杂交系统 | 第16页 |
| 1.4.2 双萤光素酶报告基因系统 | 第16-18页 |
| 第2章 引言 | 第18-20页 |
| 2.1 研究背景及意义 | 第18-19页 |
| 2.2 技术路线 | 第19-20页 |
| 第3章 BjuHDA9和BjuAGL19基因克隆及生物信息学分析 | 第20-31页 |
| 3.1 材料 | 第20页 |
| 3.1.1 试验材料 | 第20页 |
| 3.1.2 菌种及载体 | 第20页 |
| 3.1.3 试验试剂 | 第20页 |
| 3.1.4 主要仪器 | 第20页 |
| 3.2 方法 | 第20-26页 |
| 3.2.1 试剂配制 | 第20-21页 |
| 3.2.2 植物总RNA提取 | 第21页 |
| 3.2.3 第一链cDNA合成 | 第21-22页 |
| 3.2.4 引物设计 | 第22-26页 |
| 3.2.5 生物信息学分析 | 第26页 |
| 3.3 结果与分析 | 第26-31页 |
| 3.3.1 BjuHDA9、BjuAGL19的cDNA克隆 | 第26-27页 |
| 3.3.2 BjuHDA9氨基酸序列的生物信息学分析 | 第27-29页 |
| 3.3.3 BjuAGL19氨基酸序列的生物信息学分析 | 第29-31页 |
| 第4章 BjuHDA9和BjuAGL19基因表达分析 | 第31-36页 |
| 4.1 材料 | 第31页 |
| 4.1.1 试验材料 | 第31页 |
| 4.1.2 试验试剂 | 第31页 |
| 4.2 方法 | 第31-34页 |
| 4.2.1 植株处理 | 第31页 |
| 4.2.2 取材 | 第31页 |
| 4.2.3 总RNA的提取 | 第31页 |
| 4.2.4 cDNA的合成 | 第31页 |
| 4.2.5 BjuHDA9和BjuAGL19基因定量引物设计及扩增条件探索 | 第31-33页 |
| 4.2.6 BjuHDA9和BjuAGL19表达模式分析 | 第33-34页 |
| 4.3 结果与分析 | 第34-36页 |
| 4.3.1 BjuHDA9和BjuAGL19基因在芥菜不同器官中的表达模式 | 第34-35页 |
| 4.3.2 BjuHDA9基因在不同光照条件下的不同组织中的表达模式 | 第35页 |
| 4.3.3 BjuHDA9在不同处理下的表达模式分析 | 第35-36页 |
| 第5章 BjuHDA9、BjuAGL19与BjuSOC1、BjuAGL24蛋白互作分析 | 第36-53页 |
| 5.1 材料 | 第36页 |
| 5.1.1 菌种及载体 | 第36页 |
| 5.1.2 试验试剂 | 第36页 |
| 5.2 方法 | 第36-44页 |
| 5.2.1 试剂配制 | 第36-37页 |
| 5.2.2 引物设计 | 第37-38页 |
| 5.2.3 重组质粒的构建 | 第38-39页 |
| 5.2.4 酵母感受态细胞的制备 | 第39页 |
| 5.2.5 酵母重组质粒的转化 | 第39-40页 |
| 5.2.6 酵母重组质粒的自激活、毒性检测 | 第40页 |
| 5.2.7 酵母双杂交检测蛋白相互作用 | 第40-41页 |
| 5.2.8 原核表达载体的构建 | 第41页 |
| 5.2.9 诱导表达目的蛋白 | 第41-42页 |
| 5.2.10 SDS-PAGE电泳 | 第42-43页 |
| 5.2.11 目的蛋白的纯化 | 第43页 |
| 5.2.12 Pull-down试验检测蛋白相互作用 | 第43-44页 |
| 5.3 结果与分析 | 第44-53页 |
| 5.3.1 酵母表达载体的构建 | 第44页 |
| 5.3.2 酵母重组质粒的自激活及毒性检测 | 第44-46页 |
| 5.3.3 原核表达载体的构建 | 第46页 |
| 5.3.4 目标蛋白的诱导表达 | 第46-47页 |
| 5.3.5 目的蛋白的纯化 | 第47-48页 |
| 5.3.6 BjuHDA9与BjuSOC1、BjuAGL24蛋白互作检测 | 第48-50页 |
| 5.3.7 BjuAGL19与BjuSOC1、BjuAGL24蛋白互作检测 | 第50-53页 |
| 第6章 BjuHDA9、BjuAGL19与BjuSOC1、BjuAGL24的启动子互作分析 | 第53-64页 |
| 6.1 材料 | 第53页 |
| 6.1.1 菌种及载体酵母菌株 | 第53页 |
| 6.1.2 实验试剂 | 第53页 |
| 6.2 方法 | 第53-56页 |
| 6.2.1 试验试剂的配制 | 第53-54页 |
| 6.2.2 酵母感受态细胞的制备 | 第54页 |
| 6.2.3 酵母单杂交检测蛋白-DNA互作 | 第54页 |
| 6.2.4 双萤光素酶载体构建 | 第54页 |
| 6.2.5 农杆菌感受态细胞的制备 | 第54-55页 |
| 6.2.6 农杆菌转化 | 第55页 |
| 6.2.7 阳性克隆的确定 | 第55页 |
| 6.2.8 农杆菌侵染接种 | 第55-56页 |
| 6.2.9 萤光素酶活性检测 | 第56页 |
| 6.3 结果与分析 | 第56-64页 |
| 6.3.1 双萤光素酶载体构建 | 第56-57页 |
| 6.3.2 BjuHDA9蛋白分别与BjuSOC1、BjuAGL24的启动子相互作用鉴定 | 第57-61页 |
| 6.3.3 BjuAGL19蛋白分别与BjuSOC1、BjuAGL24启动子相互作用鉴定 | 第61-64页 |
| 第7章 BjuHDA9蛋白氨基酸位点突变及其与BjuSOC1、BjuAGL24启动子互作 | 第64-71页 |
| 7.1 材料 | 第64页 |
| 7.2 方法 | 第64-66页 |
| 7.2.1 BjuHDA9突变体扩增引物设计 | 第64-65页 |
| 7.2.2 BjuHDA9突变体的构建 | 第65页 |
| 7.2.3 BjuHDA9蛋白突变体酵母重组质粒构建 | 第65页 |
| 7.2.4 BjuHDA9蛋白突变体双萤光素酶重组质粒构建 | 第65页 |
| 7.2.5 酵母单杂交鉴定蛋白-DNA互作 | 第65-66页 |
| 7.2.6 双萤光素酶报告系统鉴定蛋白-DNA互作 | 第66页 |
| 7.3 结果与分析 | 第66-71页 |
| 7.3.1 BjuHDA9点突变体的构建 | 第66页 |
| 7.3.2 酵母重组载体的构建 | 第66-67页 |
| 7.3.3 双萤光素酶重组质粒构建 | 第67-68页 |
| 7.3.4 BjuHDA9突变体蛋白分别与BjuSOC1、BjuAGL24启动子相互作用鉴定 | 第68-71页 |
| 第8章 结论 | 第71-72页 |
| 第9章 讨论 | 第72-74页 |
| 9.1 探讨BjuHDA9与BjuSOC1、BjuAGL24关系 | 第72页 |
| 9.2 探讨BjuAGL19与BjuSOC1、BjuAGL24关系 | 第72-74页 |
| 参考文献 | 第74-79页 |
| 附录 | 第79-82页 |
| 致谢 | 第82-83页 |
| 在校期间发表的学术论文 | 第83-84页 |
| 在校期间参与的科研项目 | 第84页 |
