| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-25页 |
| 1.1 J蛋白研究概况 | 第11-13页 |
| 1.1.1 J蛋白的结构及分类 | 第11页 |
| 1.1.2 J蛋白的特征与功能 | 第11-12页 |
| 1.1.3 拟南芥J蛋白家族成员 | 第12-13页 |
| 1.2 J3基因及调控作用 | 第13-14页 |
| 1.2.1 J3基因结构及表达模式 | 第13页 |
| 1.2.2 J3调控环境胁迫 | 第13页 |
| 1.2.3 J3调控开花时间 | 第13-14页 |
| 1.3 开花相关整合子 | 第14-18页 |
| 1.3.1 开花因子MADS-box家族 | 第14-15页 |
| 1.3.2SOC1 | 第15-16页 |
| 1.3.3AGL24 | 第16-17页 |
| 1.3.4 SVP | 第17-18页 |
| 1.4 实时荧光定量PCR技术 | 第18-19页 |
| 1.4.1 实时荧光定量PCR原理 | 第18-19页 |
| 1.4.2 实时荧光定量PCR数据分析 | 第19页 |
| 1.4.3 实时荧光定量PCR研究进展 | 第19页 |
| 1.4.4 实时荧光定量PCR应用 | 第19页 |
| 1.5 蛋白质之间相互作用的研究方法 | 第19-21页 |
| 1.5.1 酵母双杂交系统 | 第19-21页 |
| 1.5.2 pulldown技术 | 第21页 |
| 1.6 DNA与蛋白质相互作用的研究方法 | 第21-25页 |
| 1.6.1 酵母单杂交系统 | 第22-23页 |
| 1.6.2 双荧光素酶报告基因系统 | 第23-25页 |
| 第二章 引言 | 第25-27页 |
| 第三章 BjuJ3基因克隆及表达分析 | 第27-37页 |
| 3.1 材料 | 第27页 |
| 3.1.1 植物材料及生长环境 | 第27页 |
| 3.1.2 菌种及载体 | 第27页 |
| 3.1.3 试验试剂 | 第27页 |
| 3.1.4 主要仪器 | 第27页 |
| 3.2 方法 | 第27-34页 |
| 3.2.1 试剂配制 | 第27-28页 |
| 3.2.2 引物设计 | 第28页 |
| 3.2.3 BjuJ3基因克隆 | 第28-33页 |
| 3.2.4 BjuJ3生物信息学分析 | 第33页 |
| 3.2.5 RT-PCR检测BjuJ3表达模式 | 第33-34页 |
| 3.3 结果与分析 | 第34-37页 |
| 3.3.1 BjuJ3基因的克隆 | 第34页 |
| 3.3.2 BjuJ3生物信息学分析 | 第34-35页 |
| 3.3.3 BjuJ3表达模式分析 | 第35-37页 |
| 第四章 BjuJ3遗传转化及功能分析 | 第37-44页 |
| 4.1 材料 | 第37页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第37页 |
| 4.1.2 菌种及载体 | 第37页 |
| 4.2 方法 | 第37-41页 |
| 4.2.1 试剂配制 | 第37-38页 |
| 4.2.2 引物设计 | 第38页 |
| 4.2.3 植物表达载体的构建 | 第38-39页 |
| 4.2.4 农杆菌感受态的制备 | 第39页 |
| 4.2.5 重组质粒转化农杆菌及确定阳性克隆 | 第39页 |
| 4.2.6 农杆菌介导转化烟草 | 第39-40页 |
| 4.2.7 转基因植株鉴定 | 第40-41页 |
| 4.3 结果与分析 | 第41-44页 |
| 4.3.1 载体构建 | 第41-42页 |
| 4.3.2 获得抗性植株 | 第42-43页 |
| 4.3.3 抗性烟草植株的PCR鉴定 | 第43页 |
| 4.3.4 转基因烟草表型鉴定 | 第43-44页 |
| 第五章 BjuJ3与BjuSVP、BjuSOC1、BjuAGL24蛋白互作检测 | 第44-59页 |
| 5.1 材料 | 第44页 |
| 5.1.1 菌种及载体 | 第44页 |
| 5.1.2 试验试剂 | 第44页 |
| 5.2 方法 | 第44-52页 |
| 5.2.1 试剂配制 | 第44-45页 |
| 5.2.2 引物设计 | 第45-46页 |
| 5.2.3 酵母双杂交鉴定蛋白互作 | 第46-48页 |
| 5.2.4 pull-down鉴定蛋白互作 | 第48-52页 |
| 5.3 结果与分析 | 第52-59页 |
| 5.3.1 酵母双杂交鉴定BjuJ3与BjuSVP、BjuSOC1、BjuAGL24的蛋白互作 | 第52-55页 |
| 5.3.2 Hispull-down鉴定BjuJ3与BjuSVP、BjuSOC1、BjuAGL24的蛋白互作 | 第55-59页 |
| 第六章 BjuJ3蛋白与BjuSOC1、BjuAGL24启动子互作分析 | 第59-66页 |
| 6.1 材料 | 第59页 |
| 6.1.1 植物材料 | 第59页 |
| 6.1.2 菌种及载体 | 第59页 |
| 6.1.3 试验试剂 | 第59页 |
| 6.1.4 主要仪器 | 第59页 |
| 6.2 方法 | 第59-62页 |
| 6.2.1 试验试剂的配制 | 第59-60页 |
| 6.2.2 引物设计 | 第60页 |
| 6.2.3 酵母单杂交检测BjuSOC1和BjuAGL24的启动子与BjuJ3蛋白相互作用 | 第60-61页 |
| 6.2.4 双荧光素酶系统检测BjuSOC1和BjuAGL24的启动子与BjuJ3蛋白相互作用 | 第61-62页 |
| 6.3 结果与分析 | 第62-66页 |
| 6.3.1 酵母单杂交系统鉴定BjuSOC1和BjuAGL24的启动子与BjuJ3蛋白相互作用 | 第62-63页 |
| 6.3.2 双荧光素酶系统鉴定BjuSOC1和BjuAGL24的启动子与BjuJ3蛋白相互作用 | 第63-66页 |
| 第七章 结论 | 第66-67页 |
| 7.1 克隆了芥菜BjuJ3基因 | 第66页 |
| 7.2 光周期途径及低温春化途径能促进BjuJ3的表达 | 第66页 |
| 7.3 BjuJ3促进植物开花 | 第66页 |
| 7.4 BjuJ3蛋白与BjuSVP、BjuSOC1、BjuAGL24蛋白无互作 | 第66页 |
| 7.5 BjuJ3蛋白与BjuSOC1的启动子互作,与BjuAGL24启动子无互作. | 第66-67页 |
| 第八章 讨论 | 第67-69页 |
| 参考文献 | 第69-75页 |
| 附录 | 第75-80页 |
| 致谢 | 第80-81页 |
| 在校期间论文发表 | 第81-82页 |
| 在校期间参与的科研项目 | 第82页 |
