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柿果实成熟软化中β-半乳糖苷酶基因功能分析

摘要第5-7页
abstract第7-9页
第一章 文献综述第14-26页
    1.1 引言第14-15页
    1.2 细胞壁结构第15-18页
        1.2.1 果胶第15-17页
        1.2.2 半纤维素第17-18页
        1.2.3 纤维素第18页
    1.3 果实软化细胞壁结构变化第18-20页
        1.3.1 果胶溶解第18-19页
        1.3.2 细胞壁溶胀第19页
        1.3.3 果胶分子解聚第19-20页
        1.3.4 木葡聚糖解聚第20页
    1.4 参与细胞壁降解的细胞壁酶第20-23页
        1.4.1 与果胶降解相关的酶第20-22页
        1.4.2 半纤维素修饰酶第22页
        1.4.3 扩张蛋白第22-23页
    1.5 β-半乳糖苷酶在细胞壁代谢中的作用第23-25页
        1.5.1 β-半乳糖苷酶与果实成熟第23-24页
        1.5.2 β-半乳糖苷酶与植物生长发育第24页
        1.5.3 β-半乳糖苷酶与器官衰老第24-25页
    1.6 本研究的目的、意义及主要内容第25-26页
        1.6.1 本研究的目的及意义第25页
        1.6.2 主要研究内容第25-26页
第二章 β-半乳糖苷酶在柿果实成熟中的作用第26-33页
    2.1 材料与方法第26-28页
        2.1.1 试验材料及试验设置第26页
        2.1.2 测定指标及方法第26-28页
        2.1.3 统计与分析第28页
    2.2 结果与分析第28-31页
        2.2.1 丙烯和1-MCP处理对采后柿果实生理指标的影响第28-29页
        2.2.2 不同成熟时期柿果实细胞壁组分变化第29-30页
        2.2.3 不同成熟时期柿果实半乳糖含量变化第30-31页
    2.3 讨论第31-32页
    2.4 小结第32-33页
第三章 柿β-半乳糖苷酶基因克隆及表达特性分析第33-45页
    3.1 试验材料第33页
    3.2 试验方法第33-35页
        3.2.1 柿果实RNA的提取及cDNA第一链的合成第33页
        3.2.2 GAL中间片段PCR扩增及克隆测序第33-34页
        3.2.3 GAL5’及3’RACEPCR扩增及全长序列获得第34页
        3.2.4 GAL序列特性分析第34页
        3.2.5 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测与半定量PCR分析第34-35页
        3.2.6 统计与分析第35页
    3.3 结果分析第35-42页
        3.3.1 柿GAL基因片段克隆第35页
        3.3.2 柿GAL基因3’、5’RACE及全长序列扩增结果第35-36页
        3.3.3 柿GAL基因序列特性分析第36-38页
        3.3.4 DkGALs基因在柿不同组织中的表达分析第38-39页
        3.3.5 DkGALs基因柿果实发育期的表达分析第39-40页
        3.3.6 丙烯和1-MCP处理对采后柿果实DkGALs基因表达的影响第40-42页
    3.4 讨论第42-44页
    3.5 小结第44-45页
第四章 柿DkGAL1基因功能分析第45-70页
    4.1 试验材料第45页
    4.2 试验方法第45-52页
        4.2.1 DkGAL1启动子克隆与分析第45-47页
        4.2.2 重组质粒转化农杆菌第47页
        4.2.3 农杆菌介导的启动子融合表达载体瞬时表达及GUS活性检测第47-48页
        4.2.4 DkGAL1过表达载体构建第48-49页
        4.2.5 农杆菌介导的番茄转化第49-50页
        4.2.6 转基因番茄表型鉴定第50-51页
        4.2.7 荧光定量PCR分析第51-52页
        4.2.8 统计与分析第52页
    4.3 结果与分析第52-66页
        4.3.1 DkGAL1启动子克隆及序列分析第52-54页
        4.3.2 DkGAL1基因启动子活性分析第54-57页
        4.3.3 DkGAL1过表达载体构建第57-58页
        4.3.4 转基因番茄植株鉴定第58-59页
        4.3.5 过表达DkGAL1促进番茄植株果实成熟第59-61页
        4.3.6 过表达DkGAL1促进番茄果肉细胞分离第61页
        4.3.7 过表达DkGAL1促进采后番茄果实后熟软化第61-63页
        4.3.8 过表达DkGAL1促进番茄种子萌发及胚根伸长第63-66页
    4.4 讨论第66-69页
    4.5 小结第69-70页
第五章 柿DkGAL2基因功能分析第70-87页
    5.1 试验材料第70页
    5.2 试验方法第70-72页
        5.2.1 DkGAL2启动子克隆与分析第70页
        5.2.2 DkGAL2过表达载体构建与农杆菌转化第70页
        5.2.3 农杆菌介导的DkGAL2拟南芥转化第70-71页
        5.2.4 转基因拟南芥表型鉴定第71-72页
        5.2.5 荧光定量PCR分析第72页
        5.2.6 统计与分析第72页
    5.3 结果与分析第72-84页
        5.3.1 DkGAL2基因启动子克隆及序列分析第72-75页
        5.3.2 DkGAL2启动子瞬时表达载体构建及活性检测第75-76页
        5.3.3 不同成熟期果实DkGAL2启动子活性分析第76页
        5.3.4 DkGAL2启动子对不同生长调节剂的响应第76-77页
        5.3.5 DkGAL2过表达载体构建第77-78页
        5.3.6 DkGAL2转基因拟南芥植株鉴定第78页
        5.3.7 过表达DkGAL2促进拟南芥叶片发育第78-80页
        5.3.8 过表达DkGAL2提高拟南芥逆境胁迫抗性第80-81页
        5.3.9 过表达DkGAL2延缓拟南芥衰老第81-84页
    5.4 讨论第84-85页
    5.5 小结第85-87页
第六章 结论与创新点第87-88页
    6.1 结论第87页
    6.2 创新点第87-88页
参考文献第88-100页
缩略词第100-102页
附录第102-105页
致谢第105-106页
作者简介第106页

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