| 缩略语索引1 | 第9-10页 |
| 第一部分 利用CRISPR/Cas9对小鼠胚胎进行基因敲除 | 第10-48页 |
| 摘要 | 第10-11页 |
| Abstract | 第11-12页 |
| 第一章 研究背景 | 第12-28页 |
| 1.1 转基因动物技术 | 第12-15页 |
| 1.1.1 转基因技术的原理 | 第12-13页 |
| 1.1.2 转基因的方法 | 第13-14页 |
| 1.1.3 胚胎干细胞同源重组 | 第14页 |
| 1.1.4 体细胞核移植法 | 第14页 |
| 1.1.5 精子载体法 | 第14-15页 |
| 1.1.6 其它方法 | 第15页 |
| 1.2 转基因动物技术的应用 | 第15-17页 |
| 1.2.1 转基因动物技术在动物发育中的应用 | 第15-16页 |
| 1.2.2 转基因动物技术在基因功能研究的应用 | 第16页 |
| 1.2.3 转基因技术构建人类疾病模型的应用 | 第16-17页 |
| 1.3 影响显微注射胚胎发育的因素 | 第17-20页 |
| 1.3.1 培养液关键成分对于显微注射胚胎发育的影响 | 第17-18页 |
| 1.3.2 培养环境条件 | 第18-19页 |
| 1.3.3 培养方法 | 第19-20页 |
| 1.3.4 显微注射对早期胚胎体外发育的影响 | 第20页 |
| 1.3.5 其它因素 | 第20页 |
| 1.4 显微注射对转基因胚胎基因敲除效率的影响因素 | 第20-21页 |
| 1.4.1 外源基因对转基因效率的影响 | 第20-21页 |
| 1.4.2 显微注射时间对转基因效率的影响 | 第21页 |
| 1.4.3 显微注射注射位置对转基因效率的影响 | 第21页 |
| 1.5 基因组编辑技术——人工核酸酶技术 | 第21-24页 |
| 1.5.1 人工核酸酶的类型 | 第22页 |
| 1.5.2 ZFN | 第22-23页 |
| 1.5.3 TALEN | 第23页 |
| 1.5.4 CRISPR系统 | 第23-24页 |
| 1.6 CRISPR/Cas9 | 第24-28页 |
| 1.6.1 CRISPR/Cas9的原理 | 第24-25页 |
| 1.6.2 CRISPR/Cas9用于基因的编辑 | 第25页 |
| 1.6.3 CRISPR/Cas9用于基因治疗 | 第25页 |
| 1.6.4 CRISPR/Cas9的其他应用 | 第25-26页 |
| 1.6.5 CRISPR/Cas9与ZFN和TALEN比较 | 第26页 |
| 1.6.6 展望 | 第26-28页 |
| 第二章 CRISPR/Cas9介导的小鼠胚胎的体外培养 | 第28-36页 |
| 2.1 实验方案 | 第28页 |
| 2.2 材料与方法 | 第28-32页 |
| 2.2.1 实验动物 | 第28-29页 |
| 2.2.2 实验试剂 | 第29页 |
| 2.2.3 实验仪器 | 第29-30页 |
| 2.2.4 试剂配方 | 第30页 |
| 2.2.5 实验方法 | 第30-32页 |
| 2.2.6 数据统计学处理 | 第32页 |
| 2.3 实验结果与分析 | 第32-34页 |
| 2.3.1 不同时间段原核注射胚胎的发育情况 | 第32-33页 |
| 2.3.2 显微注射对胚胎体外发育的影响 | 第33页 |
| 2.3.3 不同显微注射方式对胚胎发育的影响 | 第33-34页 |
| 2.4 小结 | 第34-36页 |
| 2.4.1 不同时间段原核注射Cas9胚胎对发育的影响 | 第34页 |
| 2.4.2 显微注射对胚胎发育的影响 | 第34-35页 |
| 2.4.3 不同显微注射方式对胚胎发育的影响 | 第35-36页 |
| 第三章 CRISPR/Cas9介导的小鼠胚胎的基因敲除效率 | 第36-44页 |
| 3.1 实验方案 | 第36页 |
| 3.2 材料与方法 | 第36-39页 |
| 3.2.1 实验动物 | 第36-37页 |
| 3.2.2 实验试剂 | 第37页 |
| 3.2.3 实验仪器 | 第37页 |
| 3.2.4 实验方法 | 第37-39页 |
| 3.2.5 数据统计学处理 | 第39页 |
| 3.3 实验结果与分析 | 第39-40页 |
| 3.3.1 不同注射浓度对Cas9介导胚胎的发育影响 | 第39-40页 |
| 3.3.2 不同注射浓度对cas9介导胚胎的敲除效率的影响 | 第40页 |
| 3.4 小结 | 第40-44页 |
| 3.4.1 不同Cas9注射浓度对胚胎的发育影响 | 第40-41页 |
| 3.4.2 不同注射方式对Cas9介导胚胎的基因敲除的影响 | 第41页 |
| 3.4.3 不同cas9注射浓度对于胚胎的基因敲除效率的影响 | 第41-44页 |
| 第四章 结论 | 第44-45页 |
| 附图及说明 | 第45-48页 |
| 缩略语索引2 | 第48-50页 |
| 第二部分 食蟹猴精子的超低温冷冻保存 | 第50-74页 |
| 摘要 | 第50-52页 |
| Abstract | 第52-54页 |
| 第一章 研究背景 | 第54-64页 |
| 1.1 灵长类精子冷冻保存 | 第54-55页 |
| 1.1.1 精液冷冻研究现状 | 第54-55页 |
| 1.1.2 精子冷冻保存的原理 | 第55页 |
| 1.2 精子冷冻的主要影响因素 | 第55-62页 |
| 1.2.1 种间差异 | 第55-56页 |
| 1.2.2 冷冻保护剂 | 第56-59页 |
| 1.2.3 冷冻保存的方法 | 第59-60页 |
| 1.2.4 降温速率 | 第60-61页 |
| 1.2.5 冷冻 | 第61-62页 |
| 1.3 精液质量测评方法 | 第62-64页 |
| 1.3.1 外观检查法 | 第62页 |
| 1.3.2 显微镜检查法 | 第62-63页 |
| 1.3.3 精子顶体完整性 | 第63页 |
| 1.3.4 受精能力检测 | 第63-64页 |
| 第二章 SpermCryo无卵黄冷冻液对食蟹猴精子冷冻保存 | 第64-72页 |
| 2.1 实验方案 | 第65页 |
| 2.2 材料与方法 | 第65-68页 |
| 2.2.1 实验动物 | 第65页 |
| 2.2.2 实验药品 | 第65-66页 |
| 2.2.3 实验仪器 | 第66页 |
| 2.2.4 实验方法 | 第66-67页 |
| 2.2.5 数据统计 | 第67-68页 |
| 2.3 实验结果与分析 | 第68-72页 |
| 2.3.1 冷冻平衡时间对食蟹猴精子冷冻复苏活力的影响 | 第68-69页 |
| 2.3.2 降温速率对食蟹猴精子冷冻复苏活力的影响 | 第69-72页 |
| 第三章 结论 | 第72-74页 |
| 附录1 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-86页 |
