中英文缩略词表 | 第6-8页 |
中文摘要 | 第8-10页 |
英文摘要 | 第10-12页 |
前言 | 第13-16页 |
第一章 研究背景 | 第16-25页 |
1.1 睾酮合成,睾酮的生理功能和作用机制 | 第16-20页 |
1.2 泛素化—蛋白酶体系统和Smurf1的生理功能 | 第20-23页 |
1.3 Lhx9的结构和生理功能 | 第23-25页 |
第二章 实验材料与方法 | 第25-38页 |
2.1 实验材料 | 第25-27页 |
2.1.1 细胞和菌株 | 第25页 |
2.1.2 试剂 | 第25页 |
2.1.3 SiRNA和ShRNA | 第25-26页 |
2.1.4 质粒 | 第26页 |
2.1.5 抗体 | 第26-27页 |
2.1.6 小鼠 | 第27页 |
2.2 实验方法 | 第27-38页 |
2.2.1 细胞培养和质粒转染 | 第27-28页 |
2.2.2 蛋白免疫印迹技术 | 第28页 |
2.2.3 免疫共沉淀和体内泛素化检测 | 第28-30页 |
2.2.4 间接免疫荧光 | 第30页 |
2.2.5 组织形态、免疫组化及定量分析 | 第30-32页 |
2.2.6 原核蛋白诱导表达和Pull-down实验 | 第32-33页 |
2.2.7 siRNA的感染、慢病毒的包装及稳定株筛选 | 第33页 |
2.2.8 双荧光素酶报告基因实验 | 第33页 |
2.2.9 RNA的提取、逆转录和定量PCR | 第33-35页 |
2.2.10 MTT检测细胞增殖 | 第35页 |
2.2.11原代胚胎成纤维细胞(MEF)分离与培养 | 第35-36页 |
2.2.12原代睾丸间质细胞分离技术 | 第36页 |
2.2.13体外刺激原代睪丸间质细胞分泌睾酮 | 第36页 |
2.2.14睾酮和黄体生成素的检测 | 第36-37页 |
2.2.15小鼠的基因型鉴定 | 第37页 |
2.2.16统计方法 | 第37-38页 |
第三章 研究结果 | 第38-64页 |
3.1 hCG刺激下睾丸间质细胞生成睾酮的过程中Lhx9蛋白表达上调 | 第38-39页 |
3.2 Lhx9可以被泛素修饰 | 第39-41页 |
3.3 Smurf1负调控Lhx9蛋白稳定性 | 第41-47页 |
3.4 Smurf1促进Lhx9泛素化修饰 | 第47-49页 |
3.5 Smurf1与Lhx9可以发生直接相互作用 | 第49-53页 |
3.6 Smurf1抑制Lhx9的转录功能 | 第53-56页 |
3.7 Smurf1抑制睾丸间质细胞的睾酮生成 | 第56-59页 |
3.8 Smurf1基因敲除小鼠体内的睾酮生成增加 | 第59-64页 |
第四章 讨论与结论 | 第64-70页 |
参考文献 | 第70-77页 |
文献综述 | 第77-87页 |
参考文献 | 第83-87页 |
个人简历 | 第87-88页 |
致谢 | 第88页 |