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高毒力肺炎克雷伯菌基因组序列分析及其与中性粒细胞的作用机制研究

中英文缩略词第7-8页
中文摘要第8-10页
英文摘要第10-12页
前言第13-17页
第一部分 病例分析第17-23页
    病例1 高毒力肺炎克雷伯菌致胰腺脓肿病例第17页
    病例2 高毒力肺炎克雷伯菌致肝脓肿病例第17-18页
    病例3 高毒力肺炎克雷伯菌致血流感染病例第18-20页
    病例分析与文献复习第20-23页
第二部分 高毒力肺炎克雷伯菌全基因组测序和分析第23-49页
    1 实验材料第23-24页
        1.1 菌株来源第23页
        1.2 试剂第23页
        1.3 主要仪器第23-24页
    2 实验方法第24-34页
        2.1 菌株复苏鉴定及药敏第24页
        2.2 菌株基因组DNA提取第24-25页
        2.3 第三代测序文库构建第25页
        2.4 第三代单分子实时测序和基因组拼接、组装第25-26页
        2.5 第二代Illumina Hiseq测序及基因组矫正第26页
        2.6 基因注释和预测第26页
        2.7 毒力基因、耐药基因分析第26-34页
    3 实验结果第34-45页
        3.1 测序菌株的药敏结果第34页
        3.2 第三代SMRT测序结果第34-35页
        3.3 第二代测序结果第35页
        3.4 6株HvKP菌株的基因组拼接、矫正和注释第35-38页
        3.5 测序菌株染色体与质粒基因功能聚类第38-39页
        3.6 菌株特异基因的功能分析第39-42页
        3.7 菌株毒力基因分析第42-44页
        3.8 菌株耐药基因分析第44-45页
    4 讨论第45-48页
    5 结论第48-49页
第三部分 高毒力肺炎克雷伯菌与中性粒细胞作用机制研究第49-71页
    1 实验材料第49-50页
        1.1 试剂第49页
        1.2 试剂配置第49-50页
        1.3 主要仪器第50页
    2 实验方法第50-59页
        2.1 临床菌株来源、鉴定、筛选第51-52页
        2.2 实验菌株分组第52-53页
        2.3 临床肝脓肿患者穿刺液标本涂片和革兰染色第53页
        2.4 人外周血中性粒细胞提取第53-54页
        2.5 FITC荧光染料标记细菌的制备第54-55页
        2.6 收集患者血清第55页
        2.7 中性粒细胞吞噬实验第55页
        2.8 中性粒细胞杀菌试验第55-56页
        2.9 透射电镜标本制作及观察第56-57页
        2.10 体外诱导中性粒细胞形成NETs第57-58页
        2.11 扫描电镜标本染色及观察第58页
        2.12 免疫荧光组化及共聚焦显微镜观察第58-59页
        2.13 统计学分析第59页
    3 实验结果第59-68页
        3.1 菌株鉴定及筛选结果第59-60页
        3.2 肝脓肿穿刺液标本涂片第60页
        3.3 中性粒细胞提取纯度及细胞存活率第60页
        3 4 FITC标记效率检测结果第60-61页
        3.5 中性粒细胞吞噬率检测结果第61-62页
        3.6 中性粒细胞存活指数第62-64页
        3.7 透射电镜观察结果第64-65页
        3.8 扫描电镜观察结果第65-67页
        3.9 免疫荧光染色鉴定NETs第67-68页
    4 讨论第68-70页
    5 结论第70-71页
全文总结第71-75页
参考文献第75-81页
文献综述第81-91页
    参考文献第85-91页
攻读学位期间发表文章情况第91页
攻读学位期间参与编写的专业书籍第91-93页
致谢第93-94页

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