| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 缩略语表 | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-22页 |
| 1.1 花粉管研究概述 | 第10-14页 |
| 1.1.1 花粉管的生长特点 | 第10-11页 |
| 1.1.2 花粉管细胞壁的结构及组成成分 | 第11-14页 |
| 1.2 果胶酯酶研究进展 | 第14-19页 |
| 1.2.1 果胶酯酶与果胶 | 第14-15页 |
| 1.2.2 果胶酯酶的表达特性与生物特性 | 第15-16页 |
| 1.2.3 果胶酯酶活性抑制因子——果胶酯酶抑制剂 | 第16-18页 |
| 1.2.4 果胶酯酶的三维结构 | 第18页 |
| 1.2.5 PME与PMEI的相互作用模式 | 第18-19页 |
| 1.3 果胶酯酶(PME)与花粉管的生长 | 第19-20页 |
| 1.4 三倍体枇杷育性的研究概况 | 第20-22页 |
| 第二章 引言 | 第22-24页 |
| 第三章 枇杷果胶酯酶基因的克隆及生物信息学分析 | 第24-52页 |
| 3.1 实验材料与试剂 | 第24-25页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第24页 |
| 3.1.2 候选基因 | 第24页 |
| 3.1.3 主要试剂和仪器设备主要试剂 | 第24-25页 |
| 3.2 实验方法与步骤 | 第25-32页 |
| 3.2.1 枇杷花器官总RNA的提取及检测 | 第25-26页 |
| 3.2.2 候选基因在枇杷里的片段克隆 | 第26-29页 |
| 3.2.3 RACE法克隆目的基因的全长 | 第29-31页 |
| 3.2.4 cDNA序列的全长拼接 | 第31-32页 |
| 3.2.5 目的基因的开放阅读框扩增 | 第32页 |
| 3.3 结果与分析 | 第32-41页 |
| 3.3.1 枇杷花器官总RNA的提取结果 | 第32页 |
| 3.3.2 候选基因的克隆验证结果 | 第32-33页 |
| 3.3.3 目的基因的cDNA末端扩增结果 | 第33-34页 |
| 3.3.4 cDNA全长拼接结果 | 第34-37页 |
| 3.3.5 目的基因开放阅读框扩增结果 | 第37-41页 |
| 3.4 生物信息学分析 | 第41-49页 |
| 3.4.1 氨基酸序列同源性分析与系统进化树构建 | 第41-43页 |
| 3.4.2 EjPPME1和EjPPME2编码蛋白的理化性质分析对比 | 第43-44页 |
| 3.4.3 EjPPME1与EjPPME2编码蛋白的疏水性分析 | 第44页 |
| 3.4.4 EjPPME1和EjPPME2编码蛋白跨膜区域分析 | 第44-45页 |
| 3.4.5 EjPPME1和EjPPME2编码蛋白的Coil分区 | 第45页 |
| 3.4.6 EjPPME1与EjPPME2编码蛋白的亚细胞定位 | 第45-46页 |
| 3.4.7 EjPPME1和EjPPME2的结构域分析及motif搜索 | 第46-47页 |
| 3.4.8 EjPPME1和EjPPME2的二级结构分析 | 第47-48页 |
| 3.4.9 EjPPME1与EjPPME2三级级结构预测 | 第48-49页 |
| 3.5 讨论 | 第49-52页 |
| 3.5.1 RACE法克隆目的基因的全长 | 第49-50页 |
| 3.5.2 枇杷果胶酯酶基因的克隆与生物信息学分析 | 第50-52页 |
| 第四章 EJPPMEl和EJPPME2在枇杷花器官中的表达特性分析 | 第52-62页 |
| 4.1 实验材料与试剂 | 第52页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第52页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第52页 |
| 4.1.3 主要仪器 | 第52页 |
| 4.2 实验方法 | 第52-55页 |
| 4.2.1 荧光定量引物的设计 | 第52-53页 |
| 4.2.2 各个时期总RNA提取和检测 | 第53页 |
| 4.2.3 cDNA的合成 | 第53页 |
| 4.2.4 荧光定量PCR反应条件的筛选 | 第53-54页 |
| 4.2.5 引物特异性鉴定 | 第54页 |
| 4.2.6 标准曲线的绘制和引物扩增效率验证 | 第54页 |
| 4.2.7 EjPPME1与EjPPME2表达特性的Real-time PCR分析 | 第54-55页 |
| 4.3 结果与分析 | 第55-59页 |
| 4.3.1 总RNA提取结果 | 第55页 |
| 4.3.2 标准曲线的绘制 | 第55-57页 |
| 4.3.3 目的基因在授粉前后不同时期的花器官中的定量表达分析 | 第57-58页 |
| 4.3.4 EjPPME1与EjPPME2在枇杷花器官的不同组织部位中的表达情况分析 | 第58-59页 |
| 4.4 讨论 | 第59-62页 |
| 第五章 结论与创新点 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-71页 |
