| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第1章 文献综述 | 第12-29页 |
| 1.1 体细胞胚胎发生的理论基础 | 第12-14页 |
| 1.1.1 体细胞胚胎发生的几种假说 | 第12-13页 |
| 1.1.2 体细胞胚胎发生的特点和起源方式 | 第13-14页 |
| 1.2 植物体细胞胚胎发生的的分子机制 | 第14-18页 |
| 1.2.1 植物体细胞胚胎发生相关基因的分离 | 第15-17页 |
| 1.2.2 植物体细胞胚胎发生的相关蛋白的分离 | 第17-18页 |
| 1.2.3 植物体细胞胚胎发生相关基因的表达 | 第18页 |
| 1.3 体细胞胚发生受体类激酶基因的研究进展 | 第18-27页 |
| 1.3.1 SERK 基因家族的发现 | 第18-19页 |
| 1.3.2 SERK 基因家族的基因及蛋白结构特征 | 第19-20页 |
| 1.3.3 SERK 基因的表达与调控 | 第20-21页 |
| 1.3.4 SERK 基因及其蛋白功能 | 第21-26页 |
| 1.3.5 展望 | 第26-27页 |
| 1.4 研究内容和意义 | 第27页 |
| 1.5 研究策略和方法 | 第27-29页 |
| 1.5.1 研究策略 | 第27-28页 |
| 1.5.2 技术路线 | 第28-29页 |
| 第2章 玉米体胚发生过程中 ZmSERK 基因的克隆与生物信息学分析 | 第29-52页 |
| 2.1 材料与仪器 | 第29-32页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第29页 |
| 2.1.2 菌株与质粒 | 第29-30页 |
| 2.1.3 实验试剂 | 第30页 |
| 2.1.4 主要培养基及试剂配制 | 第30-31页 |
| 2.1.5 引物及测序 | 第31页 |
| 2.1.6 仪器 | 第31-32页 |
| 2.2 实验方法 | 第32-40页 |
| 2.2.1 玉米愈伤总 RNA 的提取 | 第32-33页 |
| 2.2.2 cDNA 第一条链的合成 | 第33页 |
| 2.2.3 引物设计 | 第33-34页 |
| 2.2.4 PCR 扩增及电泳检测 | 第34-35页 |
| 2.2.5 回收目的片段 | 第35页 |
| 2.2.6 回收产物的平末端加 A | 第35-36页 |
| 2.2.7 基因与 pMD18-T 载体连接 | 第36页 |
| 2.2.8 大肠杆菌感受态细胞的制备（CaCl2法） | 第36-37页 |
| 2.2.9 连接产物的转化 | 第37页 |
| 2.2.10 大肠杆菌转化子的 PCR 鉴定 | 第37-38页 |
| 2.2.11 大肠杆菌质粒 DNA 的提取 | 第38-39页 |
| 2.2.12 重组质粒的 PCR 鉴定 | 第39页 |
| 2.2.13 质粒的酶切鉴定与测序 | 第39页 |
| 2.2.14 生物信息学分析 | 第39-40页 |
| 2.3 结果分析 | 第40-51页 |
| 2.3.1 高质量总 RNA 的提取 | 第40-41页 |
| 2.3.2 cDNA 第一链的合成 | 第41页 |
| 2.3.3 目的基因获得 | 第41-42页 |
| 2.3.4 目的片段的回收、连接、转化、重组质粒的酶切和 PCR 鉴定 | 第42-43页 |
| 2.3.5 玉米 ZmSERK 基因的测序结果 | 第43页 |
| 2.3.6 玉米体胚发生关键基因 ZmSERK 的结构分析 | 第43-46页 |
| 2.3.7 ZmSERK 生物信息学分析 | 第46-51页 |
| 2.4 小结与讨论 | 第51-52页 |
| 2.4.1 小结 | 第51页 |
| 2.4.2 讨论 | 第51-52页 |
| 第3章 玉米体胚发生过程中 ZmSERK 基因的实时荧光定量 PCR 分析 | 第52-60页 |
| 3.1 材料与仪器 | 第52-53页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第52页 |
| 3.1.2 试剂 | 第52页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第52-53页 |
| 3.2 实验方法 | 第53-55页 |
| 3.2.1 玉米体胚发生各个时期总 RNA 的提取 | 第53页 |
| 3.2.2 各个时期总 RNA 反转录成 cDNA | 第53页 |
| 3.2.3 Real-time 引物的设计 | 第53-54页 |
| 3.2.4 引物特异性和灵敏性的检测 | 第54页 |
| 3.2.5 Real-time qRT-PCR 扩增 | 第54-55页 |
| 3.2.6 表达分析 | 第55页 |
| 3.3 结果 | 第55-57页 |
| 3.3.1 预扩增 | 第55页 |
| 3.3.2 特异扩增产物的确定 | 第55-56页 |
| 3.3.3 Real-time 结果 | 第56-57页 |
| 3.4 讨论 | 第57-60页 |
| 3.4.1 Real-time PCR | 第57-58页 |
| 3.4.2 表达量结果分析 | 第58-60页 |
| 第4章 植物表达载体构建 | 第60-83页 |
| 4.1 植物过表达载体构建 | 第60-66页 |
| 4.1.1 材料与仪器 | 第60-62页 |
| 4.1.2 方法 | 第62-64页 |
| 4.1.3 结果 | 第64-66页 |
| 4.2 植物干扰载体构建 | 第66-83页 |
| 4.2.1 材料与仪器 | 第66-67页 |
| 4.2.2 方法 | 第67-76页 |
| 4.2.3 结果 | 第76-81页 |
| 4.2.4 小结与讨论 | 第81-83页 |
| 第5章 玉米体胚发生相关基因 ZmSERK 功能的研究 | 第83-97页 |
| 5.1 实验材料 | 第83-85页 |
| 5.1.1 植物材料 | 第83页 |
| 5.1.2 表达载体 | 第83页 |
| 5.1.3 试验仪器 | 第83页 |
| 5.1.4 药品 | 第83-84页 |
| 5.1.5 主要培养基 | 第84页 |
| 5.1.6 试剂配制 | 第84-85页 |
| 5.2 实验方法 | 第85-89页 |
| 5.2.1 双丙氨磷筛选浓度的确定 | 第85页 |
| 5.2.2 农杆菌的培养 | 第85-86页 |
| 5.2.3 体细胞胚胎的准备 | 第86页 |
| 5.2.4 农杆菌侵染体细胞胚胎 | 第86页 |
| 5.2.5 抗性愈伤观察统计 | 第86-87页 |
| 5.2.6 CTAB 法提取植物叶片 DNA | 第87页 |
| 5.2.7 PCR 检测 | 第87页 |
| 5.2.8 PCR-Southern 杂交 | 第87-89页 |
| 5.2.9 荧光定量 PCR 分析 | 第89页 |
| 5.3 实验结果 | 第89-95页 |
| 5.3.1 双丙氨磷筛选压的确定 | 第89-90页 |
| 5.3.2 体细胞胚胎的诱导 | 第90-91页 |
| 5.3.3 农杆菌侵染体细胞胚胎 | 第91-92页 |
| 5.3.4 转基因植株观察统计 | 第92页 |
| 5.3.5 PCR 检测和 PCR-Southern 杂交验证 | 第92-94页 |
| 5.3.6 转基因植株荧光定量 PCR 分析 | 第94-95页 |
| 5.4 讨论 | 第95-97页 |
| 5.4.1 双丙氨磷筛选剂的选择 | 第95-96页 |
| 5.4.2 农杆菌介导法获得转基因植株 | 第96-97页 |
| 结论 | 第97-98页 |
| 参考文献 | 第98-110页 |
| 作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第110-111页 |
| 致谢 | 第111页 |
