| 摘要 | 第5-7页 |
| abstract | 第7-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-20页 |
| 1.1 豆科植物和生物固氮 | 第12-16页 |
| 1.1.1 生物固氮作用 | 第12页 |
| 1.1.2 豆科植物与根瘤菌共生体系 | 第12页 |
| 1.1.3 根瘤的形成及类型 | 第12-13页 |
| 1.1.4 豆科植物结瘤的分子机制 | 第13-15页 |
| 1.1.5 根瘤中金属离子的转运 | 第15-16页 |
| 1.2 Cu与植物的关系 | 第16-17页 |
| 1.2.1 Cu在植物生长及共生固氮中的作用 | 第16页 |
| 1.2.2 植物中的铜稳态 | 第16-17页 |
| 1.3 植物中的重金属转运蛋白 | 第17-18页 |
| 1.4 研究目的及意义 | 第18-19页 |
| 1.5 技术路线 | 第19-20页 |
| 第二章 基因的选取及时空表达分析 | 第20-27页 |
| 2.1 引言 | 第20页 |
| 2.2 试验材料、试剂和仪器 | 第20页 |
| 2.2.1 试验材料 | 第20页 |
| 2.2.2 试验试剂 | 第20页 |
| 2.2.3 试验仪器 | 第20页 |
| 2.3 试验方法 | 第20-23页 |
| 2.3.1 系统发育分析 | 第20-21页 |
| 2.3.2 蒺藜苜蓿HMA5基因的定量分析 | 第21-22页 |
| 2.3.3 MTR_8g079250基因的时空表达分析 | 第22-23页 |
| 2.4 结果与分析 | 第23-25页 |
| 2.4.1 系统发育分析 | 第23页 |
| 2.4.2 蒺藜苜蓿HMA5基因表达分析 | 第23-25页 |
| 2.4.3 MTR_8g079250的时空表达分析 | 第25页 |
| 2.5 小结与讨论 | 第25-27页 |
| 第三章 MTR_8g079250基因的亚细胞定位 | 第27-39页 |
| 3.1 引言 | 第27页 |
| 3.2 试验材料、试剂及仪器 | 第27页 |
| 3.2.1 试验材料 | 第27页 |
| 3.2.2 试验试剂 | 第27页 |
| 3.2.3 试验仪器 | 第27页 |
| 3.3 试验方法 | 第27-33页 |
| 3.3.1 洋葱表皮亚细胞定位载体的构建 | 第27-30页 |
| 3.3.2 基因枪转化洋葱表皮细胞 | 第30-31页 |
| 3.3.3 烟草叶片亚细胞定位载体的构建 | 第31-33页 |
| 3.3.4 烟草的瞬时转化 | 第33页 |
| 3.4 结果与分析 | 第33-37页 |
| 3.4.1 洋葱表皮亚细胞定位载体的构建 | 第33-35页 |
| 3.4.2 洋葱表皮亚细胞定位结果 | 第35页 |
| 3.4.3 烟草叶片亚细胞定位载体的构建 | 第35-37页 |
| 3.4.4 烟草叶片亚细胞定位结果 | 第37页 |
| 3.5 小结与讨论 | 第37-39页 |
| 第四章 MTR_8g079250基因的组织表达 | 第39-46页 |
| 4.1 引言 | 第39页 |
| 4.2 试验材料、仪器 | 第39页 |
| 4.2.1 试验材料 | 第39页 |
| 4.2.2 试剂与配方 | 第39页 |
| 4.2.3 试验仪器 | 第39页 |
| 4.3 试验方法 | 第39-42页 |
| 4.3.1 启动子融合表达载体的构建 | 第39-42页 |
| 4.3.2 启动子表达部位的检测 | 第42页 |
| 4.4 结果与分析 | 第42-44页 |
| 4.4.1 载体的构建 | 第42-43页 |
| 4.4.2 MTR_8g079250的组织表达分析 | 第43-44页 |
| 4.5 小结与讨论 | 第44-46页 |
| 第五章 MTR_8g079250基因的RNA沉默和过量表达 | 第46-70页 |
| 5.1 引言 | 第46页 |
| 5.2 试验材料、试剂和仪器 | 第46页 |
| 5.2.1 试验材料 | 第46页 |
| 5.2.2 试剂与配方 | 第46页 |
| 5.2.3 试验仪器 | 第46页 |
| 5.3 试验方法 | 第46-54页 |
| 5.3.1 RNA干扰载体的构建 | 第46-49页 |
| 5.3.2 MTR_8g079250过量表达载体的构建 | 第49页 |
| 5.3.3 重组质粒电转入发根农杆菌Arqua | 第49-50页 |
| 5.3.4 蒺藜苜蓿发根转化体系 | 第50-51页 |
| 5.3.5 试验结果的鉴定 | 第51页 |
| 5.3.6 基因的表达分析 | 第51-53页 |
| 5.3.7 根瘤的透射电镜分析 | 第53-54页 |
| 5.4 结果与分析 | 第54-69页 |
| 5.4.1 目的基因扩增结果 | 第54页 |
| 5.4.2 RNA干扰载体的构建 | 第54-55页 |
| 5.4.3 过量表达载体构建 | 第55-56页 |
| 5.4.4 诱导转化植株发根的形成 | 第56-57页 |
| 5.4.5 RNA干扰及过量表达的效率检测 | 第57-60页 |
| 5.4.6 转化植株的表型观察及统计 | 第60-63页 |
| 5.4.7 根瘤的超微结构观察 | 第63-65页 |
| 5.4.8 转化植株中相关基因的表达 | 第65-69页 |
| 5.5 讨论 | 第69-70页 |
| 第六章 结论 | 第70-71页 |
| 6.1 结论 | 第70页 |
| 6.2 展望 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-79页 |
| 附录1 | 第79-81页 |
| 附录2 | 第81-83页 |
| 附录3 | 第83-87页 |
| 致谢 | 第87-88页 |
| 作者简介 | 第88页 |
