中文摘要 | 第4-6页 |
英文摘要 | 第6-7页 |
英文缩略词表 | 第8-12页 |
第一章 前言 | 第12-26页 |
1.1 半纤维素简介 | 第12-13页 |
1.1.1 木聚糖 | 第12-13页 |
1.1.2 甘露聚糖 | 第13页 |
1.1.3 β-葡聚糖 | 第13页 |
1.1.4 木葡聚糖 | 第13页 |
1.2 半纤维素的结构 | 第13-15页 |
1.2.1 半纤维素与纤维素以及木质素的连接方式 | 第13-14页 |
1.2.2 半纤维素的化学组成与化学键连结 | 第14-15页 |
1.3 木聚糖 | 第15-16页 |
1.3.1 木聚糖的结构 | 第15页 |
1.3.2 木聚糖的理化性质 | 第15-16页 |
1.3.3 木聚糖的功能 | 第16页 |
1.4 木聚糖酶的研究进展 | 第16-23页 |
1.4.1 木聚糖酶的来源及分子结构 | 第16-19页 |
1.4.2 木聚糖酶的催化机制 | 第19-20页 |
1.4.3 木聚糖酶的组成 | 第20-21页 |
1.4.4 木聚糖酶的应用 | 第21-23页 |
1.5 碱性木聚糖酶 | 第23-25页 |
1.5.1 产碱性木聚糖酶的环境及微生物 | 第24页 |
1.5.2 碱性木聚糖酶的研究现状 | 第24-25页 |
1.5.3 碱性木聚糖酶的获得途径 | 第25页 |
1.6 本论文的立题依据及研究内容 | 第25-26页 |
第二章 不同培养条件对菌株Cellulomonas bogoriensis产木聚糖酶的影响及粗酶性质研究 | 第26-44页 |
2.1 实验材料 | 第26-27页 |
2.1.1 实验菌株 | 第26页 |
2.1.2 实验药品 | 第26-27页 |
2.1.3 培养基 | 第27页 |
2.1.4 实验仪器 | 第27页 |
2.2 实验方法 | 第27-31页 |
2.2.1 制备木聚糖酶粗酶液 | 第27页 |
2.2.2 木聚糖酶活力的测定 | 第27-29页 |
2.2.3 菌株产木聚糖酶的条件的优化 | 第29-30页 |
2.2.4 粗酶性质研究 | 第30-31页 |
2.3 结果与讨论 | 第31-43页 |
2.3.1 Cellulomonas bogoriensis的生长曲线 | 第31-32页 |
2.3.2 木聚糖酶的最佳产酶时间 | 第32-33页 |
2.3.3 培养基中的最佳的装液量 | 第33页 |
2.3.4 菌株产木聚糖酶的最佳培养温度 | 第33-34页 |
2.3.5 菌株产木聚糖酶的最佳培养基初始pH值 | 第34-35页 |
2.3.6 不同碳源对菌株产酶的影响 | 第35页 |
2.3.7 麸皮的浓度对菌株产木聚糖酶的影响 | 第35-36页 |
2.3.8 不同氮源对菌株产酶的影响 | 第36-37页 |
2.3.9 酵母浸粉浓度对菌株产酶的影响 | 第37-38页 |
2.3.10 不同NaCl含量对菌株产木聚糖酶的影响 | 第38-39页 |
2.3.11 不同Tween-80含量对菌株产木聚糖酶的影响 | 第39-40页 |
2.3.12 接种量对菌株产木聚糖酶的影响 | 第40页 |
2.3.13 粗酶性质研究 | 第40-43页 |
2.4 小结 | 第43-44页 |
第三章 Cellulomonas bogoriensis基因组中木聚糖酶基因的分析 | 第44-56页 |
3.1 实验菌株 | 第44页 |
3.2 实验方法 | 第44页 |
3.3 实验结果 | 第44-54页 |
3.3.1 木聚糖酶的氨基酸序列分析 | 第44-45页 |
3.3.2 木聚糖酶理化性质的预测 | 第45-48页 |
3.3.3 蛋白质序列比对及结构域分析 | 第48-50页 |
3.3.4 信号肽与跨膜通道蛋白的预测 | 第50页 |
3.3.5 多重序列分析 | 第50-51页 |
3.3.6 SWISS-MODEL同源建模 | 第51-54页 |
3.4 小结 | 第54-56页 |
第四章 五种内切木聚糖酶基因的克隆表达及重组酶的性质研究 | 第56-92页 |
4.1 实验材料 | 第56-59页 |
4.1.1 实验菌株、质粒和表达宿主菌种 | 第56页 |
4.1.2 实验试剂与药品 | 第56-57页 |
4.1.3 培养基与缓冲液 | 第57-58页 |
4.1.4 实验仪器 | 第58-59页 |
4.2 实验方法 | 第59-66页 |
4.2.1 重组质粒的构建 | 第59-61页 |
4.2.2 构建异源表达重组菌 | 第61-62页 |
4.2.3 重组蛋白的聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测 | 第62-63页 |
4.2.4 不同诱导温度对重组蛋白表达量的影响 | 第63页 |
4.2.5 诱导剂IPTG浓度对重组蛋白表达的影响 | 第63页 |
4.2.6 重组蛋白的分离纯化 | 第63页 |
4.2.7 重组蛋白的木聚糖酶活测定 | 第63-64页 |
4.2.8 重组蛋白的酶学性质测定 | 第64-66页 |
4.3 结果与讨论 | 第66-90页 |
4.3.1 木聚糖酶基因克隆 | 第66-68页 |
4.3.2 重组蛋白的表达与最佳诱导表达条件的探究 | 第68-71页 |
4.3.3 重组蛋白的纯化 | 第71-72页 |
4.3.4 蛋白浓度的测定 | 第72页 |
4.3.5 重组蛋白的酶学性质 | 第72-90页 |
4.4 小结 | 第90-92页 |
总结及展望 | 第92-94页 |
参考文献 | 第94-100页 |
致谢 | 第100页 |