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来源于Cellulomonas bogoriensis的耐碱木聚糖酶的基因克隆、异源表达及酶学性质研究

中文摘要第4-6页
英文摘要第6-7页
英文缩略词表第8-12页
第一章 前言第12-26页
    1.1 半纤维素简介第12-13页
        1.1.1 木聚糖第12-13页
        1.1.2 甘露聚糖第13页
        1.1.3 β-葡聚糖第13页
        1.1.4 木葡聚糖第13页
    1.2 半纤维素的结构第13-15页
        1.2.1 半纤维素与纤维素以及木质素的连接方式第13-14页
        1.2.2 半纤维素的化学组成与化学键连结第14-15页
    1.3 木聚糖第15-16页
        1.3.1 木聚糖的结构第15页
        1.3.2 木聚糖的理化性质第15-16页
        1.3.3 木聚糖的功能第16页
    1.4 木聚糖酶的研究进展第16-23页
        1.4.1 木聚糖酶的来源及分子结构第16-19页
        1.4.2 木聚糖酶的催化机制第19-20页
        1.4.3 木聚糖酶的组成第20-21页
        1.4.4 木聚糖酶的应用第21-23页
    1.5 碱性木聚糖酶第23-25页
        1.5.1 产碱性木聚糖酶的环境及微生物第24页
        1.5.2 碱性木聚糖酶的研究现状第24-25页
        1.5.3 碱性木聚糖酶的获得途径第25页
    1.6 本论文的立题依据及研究内容第25-26页
第二章 不同培养条件对菌株Cellulomonas bogoriensis产木聚糖酶的影响及粗酶性质研究第26-44页
    2.1 实验材料第26-27页
        2.1.1 实验菌株第26页
        2.1.2 实验药品第26-27页
        2.1.3 培养基第27页
        2.1.4 实验仪器第27页
    2.2 实验方法第27-31页
        2.2.1 制备木聚糖酶粗酶液第27页
        2.2.2 木聚糖酶活力的测定第27-29页
        2.2.3 菌株产木聚糖酶的条件的优化第29-30页
        2.2.4 粗酶性质研究第30-31页
    2.3 结果与讨论第31-43页
        2.3.1 Cellulomonas bogoriensis的生长曲线第31-32页
        2.3.2 木聚糖酶的最佳产酶时间第32-33页
        2.3.3 培养基中的最佳的装液量第33页
        2.3.4 菌株产木聚糖酶的最佳培养温度第33-34页
        2.3.5 菌株产木聚糖酶的最佳培养基初始pH值第34-35页
        2.3.6 不同碳源对菌株产酶的影响第35页
        2.3.7 麸皮的浓度对菌株产木聚糖酶的影响第35-36页
        2.3.8 不同氮源对菌株产酶的影响第36-37页
        2.3.9 酵母浸粉浓度对菌株产酶的影响第37-38页
        2.3.10 不同NaCl含量对菌株产木聚糖酶的影响第38-39页
        2.3.11 不同Tween-80含量对菌株产木聚糖酶的影响第39-40页
        2.3.12 接种量对菌株产木聚糖酶的影响第40页
        2.3.13 粗酶性质研究第40-43页
    2.4 小结第43-44页
第三章 Cellulomonas bogoriensis基因组中木聚糖酶基因的分析第44-56页
    3.1 实验菌株第44页
    3.2 实验方法第44页
    3.3 实验结果第44-54页
        3.3.1 木聚糖酶的氨基酸序列分析第44-45页
        3.3.2 木聚糖酶理化性质的预测第45-48页
        3.3.3 蛋白质序列比对及结构域分析第48-50页
        3.3.4 信号肽与跨膜通道蛋白的预测第50页
        3.3.5 多重序列分析第50-51页
        3.3.6 SWISS-MODEL同源建模第51-54页
    3.4 小结第54-56页
第四章 五种内切木聚糖酶基因的克隆表达及重组酶的性质研究第56-92页
    4.1 实验材料第56-59页
        4.1.1 实验菌株、质粒和表达宿主菌种第56页
        4.1.2 实验试剂与药品第56-57页
        4.1.3 培养基与缓冲液第57-58页
        4.1.4 实验仪器第58-59页
    4.2 实验方法第59-66页
        4.2.1 重组质粒的构建第59-61页
        4.2.2 构建异源表达重组菌第61-62页
        4.2.3 重组蛋白的聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测第62-63页
        4.2.4 不同诱导温度对重组蛋白表达量的影响第63页
        4.2.5 诱导剂IPTG浓度对重组蛋白表达的影响第63页
        4.2.6 重组蛋白的分离纯化第63页
        4.2.7 重组蛋白的木聚糖酶活测定第63-64页
        4.2.8 重组蛋白的酶学性质测定第64-66页
    4.3 结果与讨论第66-90页
        4.3.1 木聚糖酶基因克隆第66-68页
        4.3.2 重组蛋白的表达与最佳诱导表达条件的探究第68-71页
        4.3.3 重组蛋白的纯化第71-72页
        4.3.4 蛋白浓度的测定第72页
        4.3.5 重组蛋白的酶学性质第72-90页
    4.4 小结第90-92页
总结及展望第92-94页
参考文献第94-100页
致谢第100页

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