中文摘要 | 第4-5页 |
ABSTRACT | 第5页 |
第一章 文献综述 | 第9-26页 |
1.1 锂的生物学特性 | 第9-12页 |
1.1.1 锂的理化性质 | 第9页 |
1.1.2 锂盐与疾病的关系 | 第9-10页 |
1.1.3 锂盐的作用机制 | 第10-12页 |
1.2 酿酒酵母高盐胁迫应答机制 | 第12-21页 |
1.2.1 钾离子的吸收与调节机制 | 第14-15页 |
1.2.2 钠离子的吸收与排出机制 | 第15-20页 |
1.2.3 HAL5 基因相关研究进展 | 第20-21页 |
1.3 酿酒酵母 VPS 基因家族 | 第21-24页 |
1.4 酿酒酵母减数分裂和孢子形成 | 第24-25页 |
1.5 本课题研究的主要内容和意义 | 第25-26页 |
第二章 实验材料与方法 | 第26-43页 |
2.1 实验材料 | 第26-38页 |
2.1.1 菌种、质粒及引物 | 第26-33页 |
2.1.2 主要实验仪器 | 第33-34页 |
2.1.3 主要实验试剂 | 第34-35页 |
2.1.4 培养基 | 第35-36页 |
2.1.5 相关试剂制备 | 第36-38页 |
2.2 实验方法 | 第38-43页 |
2.2.1 菌株的培养与菌种保存 | 第38页 |
2.2.2 PCR 扩增 DNA 片断 | 第38页 |
2.2.3 DNA 片断的柱纯化 | 第38-39页 |
2.2.4 酶切 | 第39页 |
2.2.5 连接 | 第39页 |
2.2.6 质粒转化大肠杆菌感受态细胞 | 第39-40页 |
2.2.7 SDS 碱裂解法小量制备质粒 DNA | 第40页 |
2.2.8 玻璃珠法提取酵母基因组 DNA | 第40-41页 |
2.2.9 乙酸锂法转化酿酒酵母细胞 | 第41页 |
2.2.10 倍比稀释生长实验 | 第41页 |
2.2.11 β-半乳糖苷酶活性测定 | 第41-42页 |
2.2.12 原子吸收法测定胞内离子浓度 | 第42页 |
2.2.13 生物信息学方法 | 第42-43页 |
第三章 酿酒酵母基因组中锂离子敏感基因缺失株的鉴定与分析 | 第43-58页 |
3.1 酿酒酵母缺失株对锂离子敏感性的表型验证 | 第43-47页 |
3.2 原子吸收法测定锂敏感菌株胞内锂离子含量 | 第47-48页 |
3.3 敏感表型基因参与锂盐胁迫应答反应的遗传学分析 | 第48-56页 |
3.3.1 HOG-MAPK 途径相关基因缺失株表型验证 | 第48-50页 |
3.3.2 Pkc1p-MAPK 途径相关基因缺失株表型验证 | 第50-51页 |
3.3.3 钾离子转运相关基因分析 | 第51-55页 |
3.3.4 减数分裂与孢子形成相关基因分析 | 第55-56页 |
3.4 本章小结 | 第56-58页 |
第四章 酿酒酵母 VPS 基因家族参与锂盐胁迫的研究 | 第58-73页 |
4.1 VPS 基因缺失株对锂离子的表型验证与分析 | 第58-70页 |
4.1.1 VPS 基因缺失株的表型验证 | 第64-66页 |
4.1.2 锂敏感相关 VPS 基因分析 | 第66-69页 |
4.1.3 锂抗性相关 VPS 基因分析 | 第69-70页 |
4.2 原子吸收法测定锂敏感 VPS 基因菌株胞内锂离子浓度 | 第70-72页 |
4.3 本章小结 | 第72-73页 |
第五章 HAL5 基因参与应答锂盐胁迫的研究与分析 | 第73-86页 |
5.1 Hal5p 蛋白功能分析 | 第73-79页 |
5.1.1 HAL5 基因突变表达载体的构建 | 第74-78页 |
5.1.2 HAL5 基因突变的表型验证 | 第78-79页 |
5.2 HAL5 基因与锂敏感基因在遗传上的相互作用关系 | 第79-85页 |
5.2.1 锂离子敏感基因缺失株中高表达 HAL5 基因的表型验证 | 第79-81页 |
5.2.2 HAL5 基因与麦角甾醇的生物合成途径遗传学关系的研究 | 第81-82页 |
5.2.3 HAL5 基因与 VPS 基因遗传学关系的研究 | 第82-85页 |
5.3 本章小结 | 第85-86页 |
第六章 酿酒酵母锂离子抗性缺失株鉴定与分析 | 第86-97页 |
6.1 酿酒酵母缺失株对锂离子抗性的表型验证 | 第86-87页 |
6.2 原子吸收法测定锂耐受基因缺失菌株胞内锂离子浓度 | 第87-89页 |
6.3 HAL5 基因与锂抗性基因遗传学关系的研究 | 第89-94页 |
6.3.1 锂抗性基因缺失株中高表达 HAL5 基因的表型验证 | 第89-91页 |
6.3.2 锂抗性基因缺失株中转录水平上调节 HAL5 基因的研究 | 第91-94页 |
6.4 URE2 基因与钾离子吸收的关系 | 第94-96页 |
6.5 本章小结 | 第96-97页 |
第七章 总结与展望 | 第97-99页 |
7.1 主要工作总结 | 第97-98页 |
7.2 展望 | 第98-99页 |
参考文献 | 第99-115页 |
发表论文和参加科研情况 | 第115-116页 |
致谢 | 第116页 |