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酿酒酵母耐锂盐的分子机理研究

中文摘要第4-5页
ABSTRACT第5页
第一章 文献综述第9-26页
    1.1 锂的生物学特性第9-12页
        1.1.1 锂的理化性质第9页
        1.1.2 锂盐与疾病的关系第9-10页
        1.1.3 锂盐的作用机制第10-12页
    1.2 酿酒酵母高盐胁迫应答机制第12-21页
        1.2.1 钾离子的吸收与调节机制第14-15页
        1.2.2 钠离子的吸收与排出机制第15-20页
        1.2.3 HAL5 基因相关研究进展第20-21页
    1.3 酿酒酵母 VPS 基因家族第21-24页
    1.4 酿酒酵母减数分裂和孢子形成第24-25页
    1.5 本课题研究的主要内容和意义第25-26页
第二章 实验材料与方法第26-43页
    2.1 实验材料第26-38页
        2.1.1 菌种、质粒及引物第26-33页
        2.1.2 主要实验仪器第33-34页
        2.1.3 主要实验试剂第34-35页
        2.1.4 培养基第35-36页
        2.1.5 相关试剂制备第36-38页
    2.2 实验方法第38-43页
        2.2.1 菌株的培养与菌种保存第38页
        2.2.2 PCR 扩增 DNA 片断第38页
        2.2.3 DNA 片断的柱纯化第38-39页
        2.2.4 酶切第39页
        2.2.5 连接第39页
        2.2.6 质粒转化大肠杆菌感受态细胞第39-40页
        2.2.7 SDS 碱裂解法小量制备质粒 DNA第40页
        2.2.8 玻璃珠法提取酵母基因组 DNA第40-41页
        2.2.9 乙酸锂法转化酿酒酵母细胞第41页
        2.2.10 倍比稀释生长实验第41页
        2.2.11 β-半乳糖苷酶活性测定第41-42页
        2.2.12 原子吸收法测定胞内离子浓度第42页
        2.2.13 生物信息学方法第42-43页
第三章 酿酒酵母基因组中锂离子敏感基因缺失株的鉴定与分析第43-58页
    3.1 酿酒酵母缺失株对锂离子敏感性的表型验证第43-47页
    3.2 原子吸收法测定锂敏感菌株胞内锂离子含量第47-48页
    3.3 敏感表型基因参与锂盐胁迫应答反应的遗传学分析第48-56页
        3.3.1 HOG-MAPK 途径相关基因缺失株表型验证第48-50页
        3.3.2 Pkc1p-MAPK 途径相关基因缺失株表型验证第50-51页
        3.3.3 钾离子转运相关基因分析第51-55页
        3.3.4 减数分裂与孢子形成相关基因分析第55-56页
    3.4 本章小结第56-58页
第四章 酿酒酵母 VPS 基因家族参与锂盐胁迫的研究第58-73页
    4.1 VPS 基因缺失株对锂离子的表型验证与分析第58-70页
        4.1.1 VPS 基因缺失株的表型验证第64-66页
        4.1.2 锂敏感相关 VPS 基因分析第66-69页
        4.1.3 锂抗性相关 VPS 基因分析第69-70页
    4.2 原子吸收法测定锂敏感 VPS 基因菌株胞内锂离子浓度第70-72页
    4.3 本章小结第72-73页
第五章 HAL5 基因参与应答锂盐胁迫的研究与分析第73-86页
    5.1 Hal5p 蛋白功能分析第73-79页
        5.1.1 HAL5 基因突变表达载体的构建第74-78页
        5.1.2 HAL5 基因突变的表型验证第78-79页
    5.2 HAL5 基因与锂敏感基因在遗传上的相互作用关系第79-85页
        5.2.1 锂离子敏感基因缺失株中高表达 HAL5 基因的表型验证第79-81页
        5.2.2 HAL5 基因与麦角甾醇的生物合成途径遗传学关系的研究第81-82页
        5.2.3 HAL5 基因与 VPS 基因遗传学关系的研究第82-85页
    5.3 本章小结第85-86页
第六章 酿酒酵母锂离子抗性缺失株鉴定与分析第86-97页
    6.1 酿酒酵母缺失株对锂离子抗性的表型验证第86-87页
    6.2 原子吸收法测定锂耐受基因缺失菌株胞内锂离子浓度第87-89页
    6.3 HAL5 基因与锂抗性基因遗传学关系的研究第89-94页
        6.3.1 锂抗性基因缺失株中高表达 HAL5 基因的表型验证第89-91页
        6.3.2 锂抗性基因缺失株中转录水平上调节 HAL5 基因的研究第91-94页
    6.4 URE2 基因与钾离子吸收的关系第94-96页
    6.5 本章小结第96-97页
第七章 总结与展望第97-99页
    7.1 主要工作总结第97-98页
    7.2 展望第98-99页
参考文献第99-115页
发表论文和参加科研情况第115-116页
致谢第116页

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