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基于核酸探针和纳米材料的生物传感新方法研究

摘要第5-8页
Abstract第8-11页
第1章 绪论第15-35页
    1.1 核酸探针在生物传感的应用第15-24页
        1.1.1 基于核酸酶的生物传感技术第16-17页
        1.1.2 基于适配体的生物传感技术第17-20页
        1.1.3 基于G-四链体的生物传感技术第20-23页
        1.1.4 基于小分子连接的DNA探针的生物传感技术第23-24页
    1.2 等温核酸扩增技术第24-30页
        1.2.1 基于酶参与的信号扩增技术第25-28页
        1.2.2 基于无酶参与的信号扩增技术第28-30页
    1.3 纳米材料在生物传感中的应用第30-34页
        1.3.1 氧化石墨烯在生物传感中的应用第30-32页
        1.3.2 银纳米簇在生物传感中的应用第32-34页
    1.4 本研究论文的工作内容第34-35页
第2章 基于裂开型核酸适配体介导的内切酶放大用于小分子检测第35-49页
    2.1 前言第35-36页
    2.2 实验部分第36-38页
        2.2.1 材料与试剂第36页
        2.2.2 三通结构介导的酶放大的荧光分析第36-37页
        2.2.3 琼脂糖凝胶电泳分析第37页
        2.2.4 基于裂开型核酸适配体介导的内切酶放大策略的荧光分析第37-38页
    2.3 结果与讨论第38-48页
        2.3.0 DNA三通结构介导的Endo Ⅳ放大设计原理第38-41页
        2.3.1 SAMEA策略用于腺苷的检测第41-45页
        2.3.2 SAMEA策略用于可卡因的检测第45-48页
    2.4 小结第48-49页
第3章 基于氧化石墨烯-多肽纳米组装体检测平台用于组蛋白去乙酰化酶检测分析第49-62页
    3.1 前言第49-50页
    3.2 实验部分第50-52页
        3.2.1 材料与试剂第50页
        3.2.2 氧化石墨烯的制备和表征第50-51页
        3.2.3 HDAC1酶活性分析以及机理验证第51页
        3.2.4 HDAC1抑制剂IC_(50)值测定第51页
        3.2.5 细胞培养及细胞核的提取第51-52页
    3.3 结果与讨论第52-61页
        3.3.1 HDAC1活性分析方法的设计原理第52页
        3.3.2 氧化石墨烯的的表征第52-54页
        3.3.3 实验原理的验证第54-56页
        3.3.4 实验条件的优化第56-58页
        3.3.5 分析方法的选择性研究第58页
        3.3.6 检测平台的传感性能研究第58-60页
        3.3.7 抑制剂IC_(50)值的测定第60-61页
        3.3.8 细胞核提取物的测定第61页
    3.4 小结第61-62页
第4章 基于核酸探针/氧化石墨烯纳米组装体平台用于生物分子的无标记荧光检测第62-72页
    4.1 前言第62-63页
    4.2 实验部分第63-65页
        4.2.1 试剂与材料第63页
        4.2.2 氧化石墨烯的制备和表征第63-64页
        4.2.3 凝血酶的测定第64页
        4.2.4 AMP的测定第64-65页
    4.3 结果与讨论第65-71页
        4.3.1 氧化石墨烯的表征第65页
        4.3.2 传感器的构建第65-66页
        4.3.3 实验原理的验证第66页
        4.3.4 实验条件的优化第66-68页
        4.3.5 传感器的分析性能研究第68页
        4.3.6 传感器的选择性研究第68-69页
        4.3.7 分析方法的通用性研究第69-71页
    4.4 小结第71-72页
第5章 基于小分子连接的可编程的DNA用于细胞表面标志物免洗成像第72-85页
    5.1 前言第72-73页
    5.2 实验部分第73-75页
        5.2.1 材料与试剂第73页
        5.2.2 叶酸标记氨基修饰的寡核苷酸链第73页
        5.2.3 以DNA为模版合成银簇第73-74页
        5.2.4 细胞培养第74页
        5.2.5 比色分析叶酸受体表达的细胞第74页
        5.2.6 基于qPCR定量叶酸受体的表达第74-75页
        5.2.7 叶酸受体表达的荧光活细胞成像第75页
    5.3 结果与讨论第75-84页
        5.3.1 活细胞表面标志物免洗检测和成像分析原理第75-76页
        5.3.2 比色检测叶酸受体表达的细胞第76-77页
        5.3.3 qPCR测定细胞表面标志物第77-81页
        5.3.4 细胞表面标志物的成像第81-84页
    5.4 小结第84-85页
第6章 基于杂交链反应诱导银簇荧光增强用于mRNA的检测第85-95页
    6.1 前言第85-86页
    6.2 实验部分第86-89页
        6.2.1 试剂与材料第86页
        6.2.2 银簇的合成和表征第86-87页
        6.2.3 mRNA的测定及AFM表征第87-88页
        6.2.4 琼脂糖电泳表征第88页
        6.2.5 细胞培养及总RNA的提取第88页
        6.2.6 定量反转录PCR(qRT-PCR)分析细胞中mRNA第88-89页
    6.3 结果与讨论第89-94页
        6.3.1 基于杂交链反应诱导银簇荧光增强用于mRNA检测原理第89页
        6.3.2 原理的验证第89-92页
        6.3.3 mRNA的检测的响应性能第92页
        6.3.4 分析方法的选择性第92-93页
        6.3.5 细胞提取RNA的定量检测第93-94页
    6.4 小结第94-95页
结论第95-97页
参考文献第97-120页
附录A 攻读学位期间发表的学术论文目录第120-121页
致谢第121-122页

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