摘要 | 第5-8页 |
Abstract | 第8-11页 |
第1章 绪论 | 第15-35页 |
1.1 核酸探针在生物传感的应用 | 第15-24页 |
1.1.1 基于核酸酶的生物传感技术 | 第16-17页 |
1.1.2 基于适配体的生物传感技术 | 第17-20页 |
1.1.3 基于G-四链体的生物传感技术 | 第20-23页 |
1.1.4 基于小分子连接的DNA探针的生物传感技术 | 第23-24页 |
1.2 等温核酸扩增技术 | 第24-30页 |
1.2.1 基于酶参与的信号扩增技术 | 第25-28页 |
1.2.2 基于无酶参与的信号扩增技术 | 第28-30页 |
1.3 纳米材料在生物传感中的应用 | 第30-34页 |
1.3.1 氧化石墨烯在生物传感中的应用 | 第30-32页 |
1.3.2 银纳米簇在生物传感中的应用 | 第32-34页 |
1.4 本研究论文的工作内容 | 第34-35页 |
第2章 基于裂开型核酸适配体介导的内切酶放大用于小分子检测 | 第35-49页 |
2.1 前言 | 第35-36页 |
2.2 实验部分 | 第36-38页 |
2.2.1 材料与试剂 | 第36页 |
2.2.2 三通结构介导的酶放大的荧光分析 | 第36-37页 |
2.2.3 琼脂糖凝胶电泳分析 | 第37页 |
2.2.4 基于裂开型核酸适配体介导的内切酶放大策略的荧光分析 | 第37-38页 |
2.3 结果与讨论 | 第38-48页 |
2.3.0 DNA三通结构介导的Endo Ⅳ放大设计原理 | 第38-41页 |
2.3.1 SAMEA策略用于腺苷的检测 | 第41-45页 |
2.3.2 SAMEA策略用于可卡因的检测 | 第45-48页 |
2.4 小结 | 第48-49页 |
第3章 基于氧化石墨烯-多肽纳米组装体检测平台用于组蛋白去乙酰化酶检测分析 | 第49-62页 |
3.1 前言 | 第49-50页 |
3.2 实验部分 | 第50-52页 |
3.2.1 材料与试剂 | 第50页 |
3.2.2 氧化石墨烯的制备和表征 | 第50-51页 |
3.2.3 HDAC1酶活性分析以及机理验证 | 第51页 |
3.2.4 HDAC1抑制剂IC_(50)值测定 | 第51页 |
3.2.5 细胞培养及细胞核的提取 | 第51-52页 |
3.3 结果与讨论 | 第52-61页 |
3.3.1 HDAC1活性分析方法的设计原理 | 第52页 |
3.3.2 氧化石墨烯的的表征 | 第52-54页 |
3.3.3 实验原理的验证 | 第54-56页 |
3.3.4 实验条件的优化 | 第56-58页 |
3.3.5 分析方法的选择性研究 | 第58页 |
3.3.6 检测平台的传感性能研究 | 第58-60页 |
3.3.7 抑制剂IC_(50)值的测定 | 第60-61页 |
3.3.8 细胞核提取物的测定 | 第61页 |
3.4 小结 | 第61-62页 |
第4章 基于核酸探针/氧化石墨烯纳米组装体平台用于生物分子的无标记荧光检测 | 第62-72页 |
4.1 前言 | 第62-63页 |
4.2 实验部分 | 第63-65页 |
4.2.1 试剂与材料 | 第63页 |
4.2.2 氧化石墨烯的制备和表征 | 第63-64页 |
4.2.3 凝血酶的测定 | 第64页 |
4.2.4 AMP的测定 | 第64-65页 |
4.3 结果与讨论 | 第65-71页 |
4.3.1 氧化石墨烯的表征 | 第65页 |
4.3.2 传感器的构建 | 第65-66页 |
4.3.3 实验原理的验证 | 第66页 |
4.3.4 实验条件的优化 | 第66-68页 |
4.3.5 传感器的分析性能研究 | 第68页 |
4.3.6 传感器的选择性研究 | 第68-69页 |
4.3.7 分析方法的通用性研究 | 第69-71页 |
4.4 小结 | 第71-72页 |
第5章 基于小分子连接的可编程的DNA用于细胞表面标志物免洗成像 | 第72-85页 |
5.1 前言 | 第72-73页 |
5.2 实验部分 | 第73-75页 |
5.2.1 材料与试剂 | 第73页 |
5.2.2 叶酸标记氨基修饰的寡核苷酸链 | 第73页 |
5.2.3 以DNA为模版合成银簇 | 第73-74页 |
5.2.4 细胞培养 | 第74页 |
5.2.5 比色分析叶酸受体表达的细胞 | 第74页 |
5.2.6 基于qPCR定量叶酸受体的表达 | 第74-75页 |
5.2.7 叶酸受体表达的荧光活细胞成像 | 第75页 |
5.3 结果与讨论 | 第75-84页 |
5.3.1 活细胞表面标志物免洗检测和成像分析原理 | 第75-76页 |
5.3.2 比色检测叶酸受体表达的细胞 | 第76-77页 |
5.3.3 qPCR测定细胞表面标志物 | 第77-81页 |
5.3.4 细胞表面标志物的成像 | 第81-84页 |
5.4 小结 | 第84-85页 |
第6章 基于杂交链反应诱导银簇荧光增强用于mRNA的检测 | 第85-95页 |
6.1 前言 | 第85-86页 |
6.2 实验部分 | 第86-89页 |
6.2.1 试剂与材料 | 第86页 |
6.2.2 银簇的合成和表征 | 第86-87页 |
6.2.3 mRNA的测定及AFM表征 | 第87-88页 |
6.2.4 琼脂糖电泳表征 | 第88页 |
6.2.5 细胞培养及总RNA的提取 | 第88页 |
6.2.6 定量反转录PCR(qRT-PCR)分析细胞中mRNA | 第88-89页 |
6.3 结果与讨论 | 第89-94页 |
6.3.1 基于杂交链反应诱导银簇荧光增强用于mRNA检测原理 | 第89页 |
6.3.2 原理的验证 | 第89-92页 |
6.3.3 mRNA的检测的响应性能 | 第92页 |
6.3.4 分析方法的选择性 | 第92-93页 |
6.3.5 细胞提取RNA的定量检测 | 第93-94页 |
6.4 小结 | 第94-95页 |
结论 | 第95-97页 |
参考文献 | 第97-120页 |
附录A 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第120-121页 |
致谢 | 第121-122页 |