摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-10页 |
1 引言 | 第10-18页 |
·RNA 干扰技术 | 第10-12页 |
·RNAi 的发现 | 第10页 |
·RNAi 的作用机制 | 第10-11页 |
·RNAi 的特点 | 第11-12页 |
·RNAi 的应用 | 第12页 |
·植物中的钙离子 | 第12-13页 |
·蛋白激酶的分类 | 第13-14页 |
·钙依赖蛋白激酶(CDPKs)的研究进展 | 第14-18页 |
·CDPKs 的结构 | 第15页 |
·拟南芥中CDPK 的序列同源性及其在染色体上的分布 | 第15-16页 |
·CDPK 在植物体内的生理功能 | 第16-18页 |
·研究目的及意义 | 第18页 |
2 材料与方法 | 第18-39页 |
·实验材料 | 第18-21页 |
·植物材料 | 第18页 |
·菌株和质粒 | 第18页 |
·酶及化学试剂 | 第18-19页 |
·溶液的配制 | 第19-21页 |
·实验方法 | 第21-39页 |
·植物培养 | 第21-22页 |
·CDPK1 和 CDPK1a 基因 RNAi 表达载体的构建 | 第22-34页 |
·植物表达载体的农杆菌转化 | 第34-35页 |
·转基因植物的获得及纯合体的获得 | 第35-36页 |
·转基因植物的分子鉴定 | 第36-39页 |
3 结果与分析 | 第39-48页 |
·CDPK1 和 CDPK1a 基因 RNAi 载体的构建 | 第39-44页 |
·中间载体pHAN-Fx-Rx 的构建 | 第39-43页 |
·植物表达载体pART27-x 的构建 | 第43-44页 |
·pART27-x 表达载体的农杆菌转化 | 第44-45页 |
·转基因植株的筛选 | 第45-46页 |
·转基因植株目的基因沉默和转录水平的半定量RT-PCR 检测 | 第46-48页 |
·转基因纯合体 CDPK-a 目的基因沉默和转录水平的检测 | 第46-47页 |
·转基因纯合体 CDPK-c 目的基因沉默和转录水平的检测 | 第47-48页 |
·转基因纯合体 CDPK1a-2 目的基因转录水平的检测 | 第48页 |
·转基因纯合体 CDPK1a-2 基因沉默特异性的检测 | 第48页 |
4 讨论 | 第48-49页 |
·植物中基因沉默载体的选择及构建 | 第48-49页 |
·用 RNAi 技术研究拟南芥 AtCDPK1 和 AtCDPK1a 基因功能 | 第49页 |
5 结论 | 第49-51页 |
致谢 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-57页 |
作者简介 | 第57页 |