| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-23页 |
| 1.1 粒重相关基因的研究 | 第11-16页 |
| 1.1.1 GW2基因 | 第11-12页 |
| 1.1.2 GW5/qSW5基因 | 第12页 |
| 1.1.3 GS3基因 | 第12-13页 |
| 1.1.4 qGL3基因 | 第13-14页 |
| 1.1.5 GS5基因 | 第14页 |
| 1.1.6 GIF1基因 | 第14页 |
| 1.1.7 OsSPL16/qGW8基因 | 第14-15页 |
| 1.1.8 OsTZF9基因 | 第15页 |
| 1.1.9 OsPPDKB/flo4基因 | 第15页 |
| 1.1.10 基因之间的相互调控 | 第15-16页 |
| 1.2 基因编辑技术 | 第16-21页 |
| 1.2.1 锌指核酸酶ZFNs | 第17-18页 |
| 1.2.2 转录激活样效应因子核酸酶TALENs | 第18-20页 |
| 1.2.2.1 TALENs发展过程 | 第18页 |
| 1.2.2.2 TALENs原理 | 第18-19页 |
| 1.2.2.3 TALENs优势和缺陷 | 第19-20页 |
| 1.2.3 成簇规律间隔短回文重复技术CRISPR/Cas9 | 第20-21页 |
| 1.2.3.1 CRISPR/Cas9发展过程 | 第20页 |
| 1.2.3.2 CRISPR/Cas9原理 | 第20-21页 |
| 1.2.3.3 CRISPR/Cas9优势和缺陷 | 第21页 |
| 1.3 本研究的目的意义 | 第21-23页 |
| 第二章 材料与方法 | 第23-26页 |
| 2.1 材料 | 第23页 |
| 2.2 质粒与菌株 | 第23页 |
| 2.2.1 质粒(载体) | 第23页 |
| 2.2.2 菌株 | 第23页 |
| 2.3 引物设计 | 第23页 |
| 2.4 试剂及仪器 | 第23页 |
| 2.5 载体构建及常用方法 | 第23-24页 |
| 2.5.1 TALENs载体构建 | 第23页 |
| 2.5.2 CRISPR/Cas9载体构建 | 第23-24页 |
| 2.5.3 载体构建常用方法 | 第24页 |
| 2.6 电激农杆菌 | 第24页 |
| 2.7 农杆菌介导遗传转化 | 第24页 |
| 2.8 检测筛选方法 | 第24-25页 |
| 2.8.1 测序法 | 第24页 |
| 2.8.2 小片段PCR | 第24页 |
| 2.8.3 潮霉素抗性检测 | 第24-25页 |
| 2.8.4 后代中表达框检测 | 第25页 |
| 2.9 RT-PCR | 第25页 |
| 2.10 后代突变体水稻粒型粒重及其它农艺性状分析 | 第25-26页 |
| 第三章 结果与分析 | 第26-51页 |
| 3.1 GW2基因定点突变研究 | 第26-42页 |
| 3.1.1 GW2基因在水稻不同品种中的多态性分析 | 第26-28页 |
| 3.1.2 GW2基因TALENs表达载体的构建及水稻的遗传转化 | 第28-33页 |
| 3.1.2.1 TALENs表达载体的构建 | 第28-32页 |
| 3.1.2.2 水稻的遗传转化 | 第32-33页 |
| 3.1.3 gw2突变植株的筛选及表达分析 | 第33-38页 |
| 3.1.4 gw2突变植株的粒型粒重分析 | 第38-40页 |
| 3.1.5 gw2突变植株的穗长和抽穗期分析 | 第40-41页 |
| 3.1.6 不含外源DNA序列的gw2突变植株的获得与分析 | 第41-42页 |
| 3.2 OsTZF9的定点突变研究 | 第42-51页 |
| 3.2.1 TALENs载体的构建及水稻的遗传转化 | 第42-46页 |
| 3.2.1.1 TALENs表达载体的构建 | 第42-45页 |
| 3.2.1.2 水稻的遗传转化及检测 | 第45-46页 |
| 3.2.2 农杆菌中的TALENs模块序列分析 | 第46-47页 |
| 3.2.3 转基因植物基因组中TALENs的模块序列分析 | 第47-49页 |
| 3.2.4 CRISPR/Cas9载体的构建及水稻的遗传转化 | 第49-51页 |
| 第四章 讨论 | 第51-54页 |
| 4.1 创制水稻高产新材料的可行性 | 第51页 |
| 4.2 TALENs技术 | 第51-52页 |
| 4.3 后续工作 | 第52-54页 |
| 4.3.1 OsTZF9基因功能观察 | 第53页 |
| 4.3.2 GW2杂交实验 | 第53页 |
| 4.3.3 GW2基因与其它基因的关联性 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 附录1 CTAB法提取水稻基因组DNA(小量) | 第62-63页 |
| 附录2 PCR反应体系、电泳分析 | 第63-65页 |
| 附录3 SC-E大米外观品质检测分析系统 | 第65-66页 |
| 附录4 常用试剂及仪器 | 第66-67页 |
| 附录5 TALENs、CRISPR/Cas9载体构建 | 第67-70页 |
| 附录6 载体构建的基本方法 | 第70-73页 |
| 附录7 农杆菌介导水稻遗传转化 | 第73-74页 |
| 附录8 植物总RNA提取 | 第74-75页 |
| 附录9 测序比对结果 | 第75-79页 |
