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松材线虫体内细菌多样性及对宿主抗氧化作用研究

致谢第3-4页
摘要第4-5页
abstract第5-6页
第一章 文献综述第10-20页
    1 松材线虫病发生与研究进展第10-12页
        1.1 松材线虫病简介第10页
        1.2 我国松材线虫病发生概况第10页
        1.3 松材线虫病病原的研究第10-11页
        1.4 松材线虫致病机理研究第11-12页
    2 线虫与细菌的相互作用关系第12-14页
        2.1 昆虫病原线虫与细菌第12页
        2.2 植物寄生线虫与细菌的关系第12-13页
        2.3 松材线虫与伴生细菌的关系第13-14页
            2.3.1 松材线虫伴生细菌的多样性第13-14页
            2.3.2 松材线虫伴生细菌与线虫生长发育及繁殖的关系第14页
            2.3.3 松材线虫伴生细菌与线虫致病性(力)的关系第14页
    3 松树感病过程中的主要生理生化变化研究进展第14-16页
    4 线虫抗氧化酶研究进展第16-18页
        4.1 超氧化物歧化酶第16-17页
        4.2 过氧化物还原酶第17页
        4.3 谷胱甘肽过氧化物酶第17页
        4.4 过氧化氢酶第17-18页
    5 微生物种类及多样性相关研究方法第18-19页
        5.1 16S rRNA基因序列分析第18页
        5.2 Biolog微孔鉴定系统第18页
        5.3 宏基因组技术第18-19页
        5.4 RT-PCR技术第19页
    6 本研究的目的及意义第19-20页
第二章 不同地区马尾松中松材线虫体内细菌多样性研究第20-33页
    1 材料与方法第20-23页
        1.1 供试线虫第20-21页
        1.2 松材线虫体表无菌化处理及体内细菌分离第21页
        1.3 松材线虫体内细菌的鉴定第21-22页
            1.3.1 松材线虫体内细菌形态观察第21页
            1.3.2 松材线虫体内细菌DNA的提取与检测第21-22页
            1.3.3 松材线虫体内细菌 16S rDNA序列分析第22页
            1.3.4 Biolog96孔碳源鉴定及部分细菌生理生化特征测定第22页
        1.4 16S rRNA高通量测序分析线虫伴生细菌多样性第22-23页
            1.4.1 松材线虫体表无菌化处理及伴生细菌总DNA提取第22-23页
            1.4.2 细菌 16S rDNA V4区的PCR扩增及测序第23页
            1.4.3 生物信息学分析第23页
    2 结果与分析第23-31页
        2.1 松材线虫体内可培养细菌分离鉴定结果第23-26页
        2.2 松材线虫体内可培养细菌Biolog96孔碳源鉴定结果第26-27页
        2.3 来自不同地区马尾松的松材线虫伴生细菌物种丰度分析第27-31页
            2.3.1 松材线虫伴生细菌总DNA检测结果第27页
            2.3.2 16S rDNA V4区测序的总体结果第27-28页
            2.3.3 来自不同地区马尾松的松材线虫伴生细菌群落结构分析第28-31页
    3 结论与讨论第31-33页
第三章 松材线虫体内细菌与线虫抗氧化能力的关系第33-41页
    1 材料与方法第33-35页
        1.1 供试线虫及细菌菌株第33页
        1.2 无菌线虫的制备及体内细菌的培养第33-34页
        1.3 松材线虫体内细菌离体抗氧化能力测定第34页
        1.4 野生型及无菌型松材线虫的离体抗氧化能力测定第34页
        1.5 无菌松材线虫与细菌互作后抗氧化能力的测定第34-35页
            1.5.1 不同细菌处理后线虫产卵量的测定第34页
            1.5.2 线虫头部摆动频率和身体弯曲频率的测定第34页
            1.5.3 松材线虫体内活性氧物质(ROS)含量测定第34-35页
            1.5.4 松材线虫体内抗氧化酶活性的检测第35页
    2 结果与分析第35-40页
        2.1 松材线虫体内细菌离体抗氧化能力第35-36页
        2.2 野生型及无菌型松材线虫AMA3的抗氧化能力第36-37页
        2.3 不同细菌对松材线虫产卵量的影响第37页
        2.4 过氧化氢胁迫下体内细菌对松材线虫运动行为能力的影响第37-38页
        2.5 氧化胁迫下体内细菌对线虫体内ROS的影响第38-39页
        2.6 过氧化氢处理下优势体内细菌对线虫抗氧化酶的影响第39-40页
    3 结论与讨论第40-41页
第四章 松材线虫体内细菌对其抗氧化酶基因表达的影响第41-47页
    1 材料和方法第41-43页
        1.1 供试线虫及细菌菌株第41页
        1.2 无菌线虫的制备及体内细菌的培养第41页
        1.3 细菌处理无菌松材线虫第41-42页
        1.4 细菌处理后的松材线虫虫株接种马尾松第42页
        1.5 松材线虫RNA提取第42页
        1.6 松材线虫总RNA的纯化、分析及第一链cDNA的合成第42-43页
        1.7 目的基因荧光定量PCR引物设计第43页
        1.8 荧光定量PCR反应及SOD-3 和 2-Cys Prx基因转录水平分析第43页
    2 结果与分析第43-46页
        2.1 荧光定量PCR产物扩增曲线和标准曲线分析第43-45页
        2.2 不同侵染时期各处理松材线虫中SOD-3 和 2-Cys Prx基因差异比较第45-46页
    3 结论与讨论第46-47页
第五章 松材线虫体内细菌对线虫毒力的影响第47-51页
    1 材料与方法第47-48页
        1.1 供试松材线虫及细菌菌株第47页
        1.2 供试松苗第47页
        1.3 无菌线虫制备及供试细菌的培养第47页
        1.4 细菌处理松材线虫第47页
        1.5 松材线虫接种马尾松及致病力测定第47-48页
        1.6 松材线虫接种马尾松苗 40d后繁殖量测定第48页
    2 结果与分析第48-50页
        2.1 不同体内细菌对松材线虫毒力的影响第48-49页
        2.2 不同细菌处理的松材线虫接种马尾松苗 40d繁殖量变化第49-50页
    3 结论与讨论第50-51页
全文总结与展望第51-53页
    1 主要研究结果第51-52页
        1.1 不同地区感病马尾松中松材线虫体内细菌及伴生细菌多样性第51页
        1.2 松材线虫体内细菌与线虫抗氧化能力的关系第51页
        1.3 松材线虫体内细菌对线虫抗氧化酶基因表达的影响第51-52页
        1.4 松材线虫体内细菌对线虫毒力的影响第52页
    2 存在问题与展望第52-53页
参考文献第53-58页

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