摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
缩写词 (Abbreviation) | 第8-12页 |
第一章 前言 | 第12-20页 |
1.1 植物中的蛋白酶 | 第12-14页 |
1.1.1 肽链内切酶 | 第12页 |
1.1.2 氨肽酶 | 第12-13页 |
1.1.3 羧肽酶 | 第13-14页 |
1.2 拟南芥丝氨酸羧肽酶及其类蛋白家族 | 第14-16页 |
1.2.1 丝氨酸羧肽酶及其类蛋白家族分类 | 第14-15页 |
1.2.2 丝氨酸羧肽酶及其类蛋白结构与催化特点 | 第15页 |
1.2.3 丝氨酸羧肽酶及其类蛋白亚细胞定位 | 第15-16页 |
1.2.4 丝氨酸羧肽酶及其类蛋白基因表达特性 | 第16页 |
1.2.5 丝氨酸羧肽酶及类蛋白功能 | 第16页 |
1.3 CRISPR/Cas9技术 | 第16-18页 |
1.3.1 CRISPR/Cas9技术的由来 | 第16-17页 |
1.3.2 CRISPR/Cas9技术的发展 | 第17页 |
1.3.3 CRISPR/Cas9技术在植物中的应用 | 第17-18页 |
1.4 NADK2基因 | 第18-20页 |
1.4.1 NADK2的定位和表型 | 第18页 |
1.4.2 NADK2的作用 | 第18-20页 |
第二章 拟南芥丝氨酸羧肽酶KL58分析 | 第20-38页 |
2.1 立题依据 | 第20页 |
2.2 材料与方法 | 第20-27页 |
2.2.1 实验材料 | 第20页 |
2.2.2 实验试剂的配置和保存 | 第20-23页 |
2.2.3 实验仪器 | 第23-24页 |
2.2.4 实验方法 | 第24-27页 |
2.3 结果与分析 | 第27-36页 |
2.3.1 拟南芥KL58基因的获得 | 第27-28页 |
2.3.2 kl58在低钾及其他非生物胁迫下的表型分析 | 第28-30页 |
2.3.3 KL58主要在幼苗根部表达 | 第30-32页 |
2.3.4 KL58亚细胞定位分析 | 第32-34页 |
2.3.5 KL58超表达载体构建 | 第34-35页 |
2.3.6 KL58在细菌中诱导表达及Western-Blot检测 | 第35-36页 |
2.4 讨论 | 第36-38页 |
第三章 利用CRISPR/Cas9技术沉默NADK2研究 | 第38-50页 |
3.1 立题依据 | 第38页 |
3.2 材料与方法 | 第38-41页 |
3.2.1 实验材料 | 第38-39页 |
3.2.2 实验试剂的配置和保存 | 第39-40页 |
3.2.3 实验方法 | 第40-41页 |
3.3 结果与分析 | 第41-46页 |
3.3.1 含两个gRNA CRISPR/Cas9载体的构建 | 第41-42页 |
3.3.2 T1代植株表型及统计 | 第42-43页 |
3.3.3 T2代植株表型及鉴定 | 第43-44页 |
3.3.4 转基因阳性植株的分子鉴定 | 第44-46页 |
3.4 讨论 | 第46-50页 |
结论 | 第50-52页 |
参考文献 | 第52-56页 |
致谢 | 第56页 |