摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
缩写词 | 第8-12页 |
1 前言 | 第12-20页 |
1.1 植物类受体蛋白激酶 | 第12-15页 |
1.1.1 植物类受体蛋白激酶的结构 | 第12-13页 |
1.1.2 植物类受体蛋白激酶的分类 | 第13-14页 |
1.1.3 CrRLK1L类受体蛋白激酶 | 第14-15页 |
1.2 根毛的发育及其对NH_4~+的吸收 | 第15-18页 |
1.2.1 根毛的发育 | 第15-16页 |
1.2.2 根毛对氮营养的吸收 | 第16-18页 |
1.3 类受体蛋白激酶CAP1在根毛发育中的作用 | 第18页 |
1.4 立题依据 | 第18-20页 |
2 材料和方法 | 第20-38页 |
2.1 实验室常用实验常规仪器 | 第20-21页 |
2.2 实验常用软件及生物查询网站 | 第21页 |
2.2.1 实验常用软件 | 第21页 |
2.2.2 常用生物查询网站 | 第21页 |
2.3 实验材料、载体及菌株 | 第21页 |
2.4 实验常用试剂及重要耗材 | 第21-22页 |
2.5 实验试剂 | 第22-25页 |
2.5.1 常规溶液配制 | 第22-23页 |
2.5.2 常用培养基的配制 | 第23页 |
2.5.3 常用抗生素的配制 | 第23页 |
2.5.4 蛋白实验溶液配制 | 第23-24页 |
2.5.5 蛋白磷酸化检测所用溶液配制 | 第24-25页 |
2.6 试验方法 | 第25-38页 |
2.6.1 拟南芥的种植 | 第25页 |
2.6.2 Trizol法提取拟南芥总RNA | 第25-26页 |
2.6.3 拟南芥cDNA的反转录制备 | 第26页 |
2.6.4 载体构建 | 第26-27页 |
2.6.5 DNA的酶切及酶连 | 第27-28页 |
2.6.6 大肠杆菌感受态的制备及转化 | 第28-29页 |
2.6.9 重组载体的验证 | 第29-30页 |
2.6.10 目的基因的定点突变 | 第30-31页 |
2.6.11 蛋白的小量诱导表达 | 第31-32页 |
2.6.12 GST标签蛋白的纯化及介质的重生 | 第32页 |
2.6.13 蛋白的浓缩及含量的测定 | 第32-33页 |
2.6.14 蛋白的凝胶电泳 | 第33-34页 |
2.6.15 蛋白胶考马斯亮蓝染色 | 第34页 |
2.6.16 Western Blot检测目的蛋白 | 第34-35页 |
2.6.17 体外磷酸化反应 | 第35页 |
2.6.18 体外去磷酸化反应 | 第35-36页 |
2.6.19 Phos-Tag检测蛋白磷酸化 | 第36页 |
2.6.20 农杆菌感受态细胞制备与转化 | 第36-37页 |
2.6.21 农杆菌转导的拟南芥植株 | 第37-38页 |
3 结果与分析 | 第38-46页 |
3.1 AtCAP1激酶区磷酸化位点生物信息学分析及点突变位点的选择 | 第38-39页 |
3.2 AtCAP1激酶区磷酸化位点生化特性分析 | 第39-42页 |
3.2.1 AtCAP1激酶区体外表达和纯化 | 第39-41页 |
3.2.2 AtCAP1激酶区蛋白的体外磷酸化检测 | 第41-42页 |
3.3 AtCAP1激酶区磷酸化位点生物功能研究 | 第42-43页 |
3.3.1 AtCAP1激酶区磷酸化位点的点突基因的超表达载体的构建 | 第42-43页 |
3.3.2 转植物材料分析 | 第43页 |
3.4 AtCAP1受体区功能分析 | 第43-46页 |
4 讨论 | 第46-48页 |
5 结论 | 第48-50页 |
参考文献 | 第50-56页 |
致谢 | 第56页 |