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CAP1蛋白生化特性及功能研究

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-7页
缩写词第8-12页
1 前言第12-20页
    1.1 植物类受体蛋白激酶第12-15页
        1.1.1 植物类受体蛋白激酶的结构第12-13页
        1.1.2 植物类受体蛋白激酶的分类第13-14页
        1.1.3 CrRLK1L类受体蛋白激酶第14-15页
    1.2 根毛的发育及其对NH_4~+的吸收第15-18页
        1.2.1 根毛的发育第15-16页
        1.2.2 根毛对氮营养的吸收第16-18页
    1.3 类受体蛋白激酶CAP1在根毛发育中的作用第18页
    1.4 立题依据第18-20页
2 材料和方法第20-38页
    2.1 实验室常用实验常规仪器第20-21页
    2.2 实验常用软件及生物查询网站第21页
        2.2.1 实验常用软件第21页
        2.2.2 常用生物查询网站第21页
    2.3 实验材料、载体及菌株第21页
    2.4 实验常用试剂及重要耗材第21-22页
    2.5 实验试剂第22-25页
        2.5.1 常规溶液配制第22-23页
        2.5.2 常用培养基的配制第23页
        2.5.3 常用抗生素的配制第23页
        2.5.4 蛋白实验溶液配制第23-24页
        2.5.5 蛋白磷酸化检测所用溶液配制第24-25页
    2.6 试验方法第25-38页
        2.6.1 拟南芥的种植第25页
        2.6.2 Trizol法提取拟南芥总RNA第25-26页
        2.6.3 拟南芥cDNA的反转录制备第26页
        2.6.4 载体构建第26-27页
        2.6.5 DNA的酶切及酶连第27-28页
        2.6.6 大肠杆菌感受态的制备及转化第28-29页
        2.6.9 重组载体的验证第29-30页
        2.6.10 目的基因的定点突变第30-31页
        2.6.11 蛋白的小量诱导表达第31-32页
        2.6.12 GST标签蛋白的纯化及介质的重生第32页
        2.6.13 蛋白的浓缩及含量的测定第32-33页
        2.6.14 蛋白的凝胶电泳第33-34页
        2.6.15 蛋白胶考马斯亮蓝染色第34页
        2.6.16 Western Blot检测目的蛋白第34-35页
        2.6.17 体外磷酸化反应第35页
        2.6.18 体外去磷酸化反应第35-36页
        2.6.19 Phos-Tag检测蛋白磷酸化第36页
        2.6.20 农杆菌感受态细胞制备与转化第36-37页
        2.6.21 农杆菌转导的拟南芥植株第37-38页
3 结果与分析第38-46页
    3.1 AtCAP1激酶区磷酸化位点生物信息学分析及点突变位点的选择第38-39页
    3.2 AtCAP1激酶区磷酸化位点生化特性分析第39-42页
        3.2.1 AtCAP1激酶区体外表达和纯化第39-41页
        3.2.2 AtCAP1激酶区蛋白的体外磷酸化检测第41-42页
    3.3 AtCAP1激酶区磷酸化位点生物功能研究第42-43页
        3.3.1 AtCAP1激酶区磷酸化位点的点突基因的超表达载体的构建第42-43页
        3.3.2 转植物材料分析第43页
    3.4 AtCAP1受体区功能分析第43-46页
4 讨论第46-48页
5 结论第48-50页
参考文献第50-56页
致谢第56页

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