致谢 | 第4-6页 |
摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
第一章 研究背景 | 第14-25页 |
第一节 细胞凋亡与Caspase家族蛋白 | 第14-16页 |
第二节 细胞凋亡的调控机制 | 第16-19页 |
一、转录水平的调控作用 | 第16页 |
二、死亡受体介导的调控作用 | 第16-17页 |
三、Bcl-2 家族蛋白介导的调控作用 | 第17页 |
四、IAP家族蛋白介导的调控作用 | 第17页 |
五、翻译后修饰的调控作用 | 第17-18页 |
六、病原菌对宿主细胞凋亡的调控机制 | 第18-19页 |
第三节 软体动物中细胞凋亡机制的研究进展 | 第19-23页 |
第四节 本研究的主要目的及意义 | 第23-25页 |
一、研究意义 | 第23-25页 |
第二章 实验材料和方法 | 第25-47页 |
第一节 实验材料 | 第25-31页 |
一、实验动物、菌株及细胞系 | 第25页 |
二、试剂耗材及仪器设备 | 第25-31页 |
第二节 实验方法 | 第31-47页 |
一、长牡蛎总RNA提取及c DNA文库构建 | 第31-32页 |
二、基因克隆与序列分析 | 第32-34页 |
三、重组蛋白原核表达及纯化 | 第34-38页 |
四、多克隆抗体制备 | 第38-39页 |
五、Western Blotting | 第39页 |
六、实时荧光定量PCR | 第39-40页 |
七、长牡蛎血淋巴细胞原代培养 | 第40页 |
八、免疫荧光组化 | 第40-41页 |
九、LPS亲和层析及质谱鉴定 | 第41页 |
十、LPS-Sepharose pull-down实验 | 第41-42页 |
十一、基于Elisa的重组蛋白LPS结合实验 | 第42页 |
十二、表面等离子共振原理(SPR)定量检测实验 | 第42-43页 |
十三、Caspase酶活性检测 | 第43-44页 |
十四、细胞凋亡检测 | 第44页 |
十五、细胞转染 | 第44-45页 |
十六、细胞增殖与毒性检测 | 第45页 |
十七、长牡蛎免疫刺激实验 | 第45-46页 |
十八、实验数据处理 | 第46-47页 |
第三章 实验结果 | 第47-73页 |
第一节 长牡蛎Caspase家族基因的基本特征分析 | 第47-58页 |
一、长牡蛎Caspase家族基因的分子特征 | 第47-54页 |
二、长牡蛎Caspase家族重组蛋白及多克隆抗体制备 | 第54页 |
三、长牡蛎个体发育时期Caspase家族基因的mRNA表达特征 | 第54-56页 |
四、长牡蛎Caspase家族基因组织表达分布及蛋白水平的细胞定位 | 第56-58页 |
第二节 CgCaspase-3 分子功能及其介导的细胞凋亡调控机制 | 第58-68页 |
一、CgCaspase-3 蛋白酶活性 | 第58-59页 |
二、CgCaspase-3 对细胞增殖的影响 | 第59-60页 |
三、CgCaspase-3 诱导细胞凋亡 | 第60-61页 |
四、CgCaspase-3 与LPS相互作用 | 第61-66页 |
五、LPS抑制CgCaspase-3 引起的细胞凋亡 | 第66-68页 |
第三节 CgCaspase-8 分子功能及其对免疫刺激的响应情况 | 第68-73页 |
一. CgCaspase-8 蛋白酶活性 | 第68-69页 |
二、CgCaspase-8 对细胞增殖的影响 | 第69页 |
三、CgCaspase-8 诱导细胞凋亡 | 第69-71页 |
三、CgCaspase-8 与CgCaspase-3 共定位 | 第71页 |
四、免疫刺激后长牡蛎血淋巴细胞中CgCaspase-8 mRNA水平表达时序变化 | 第71-72页 |
五、免疫刺激后长牡蛎血淋巴细胞中CgCaspase-8 蛋白水平表达时序变化 | 第72-73页 |
第四章 分析与讨论 | 第73-81页 |
第一节 长牡蛎Caspase-3 和Caspase-8 的基本特征及分布 | 第73-75页 |
一、CgCaspase-3 和CgCaspase-8 分子的基本特征 | 第73-74页 |
二、CgCaspase-3 和CgCaspase-8 在长牡蛎各组织中的分布及在血淋巴细胞中的定位 | 第74-75页 |
第二节 长牡蛎Caspase-3 分子功能及其介导的细胞凋亡调控机制 | 第75-78页 |
一、CgCaspase-3 蛋白酶活性及其介导的细胞凋亡 | 第75-76页 |
二、CgCaspase-3 可作为胞内LPS特异性识别受体 | 第76-77页 |
三、LPS抑制CgCaspase-3 引起的细胞凋亡 | 第77-78页 |
第三节 长牡蛎Caspase-8 分子功能及其对免疫刺激的响应情况 | 第78-81页 |
一、CgCaspase-8 蛋白酶活性及其介导的细胞凋亡 | 第78-79页 |
二、免疫刺激后Cg Caspase-8 分子mRNA及蛋白水平表达时序变化 | 第79-81页 |
第五章 结论 | 第81-83页 |
参考文献 | 第83-94页 |
作者简历 | 第94-95页 |
已完成和发表的论文 | 第95页 |