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长牡蛎Caspase家族蛋白调控细胞凋亡的机制研究

致谢第4-6页
摘要第6-8页
ABSTRACT第8-10页
第一章 研究背景第14-25页
    第一节 细胞凋亡与Caspase家族蛋白第14-16页
    第二节 细胞凋亡的调控机制第16-19页
        一、转录水平的调控作用第16页
        二、死亡受体介导的调控作用第16-17页
        三、Bcl-2 家族蛋白介导的调控作用第17页
        四、IAP家族蛋白介导的调控作用第17页
        五、翻译后修饰的调控作用第17-18页
        六、病原菌对宿主细胞凋亡的调控机制第18-19页
    第三节 软体动物中细胞凋亡机制的研究进展第19-23页
    第四节 本研究的主要目的及意义第23-25页
        一、研究意义第23-25页
第二章 实验材料和方法第25-47页
    第一节 实验材料第25-31页
        一、实验动物、菌株及细胞系第25页
        二、试剂耗材及仪器设备第25-31页
    第二节 实验方法第31-47页
        一、长牡蛎总RNA提取及c DNA文库构建第31-32页
        二、基因克隆与序列分析第32-34页
        三、重组蛋白原核表达及纯化第34-38页
        四、多克隆抗体制备第38-39页
        五、Western Blotting第39页
        六、实时荧光定量PCR第39-40页
        七、长牡蛎血淋巴细胞原代培养第40页
        八、免疫荧光组化第40-41页
        九、LPS亲和层析及质谱鉴定第41页
        十、LPS-Sepharose pull-down实验第41-42页
        十一、基于Elisa的重组蛋白LPS结合实验第42页
        十二、表面等离子共振原理(SPR)定量检测实验第42-43页
        十三、Caspase酶活性检测第43-44页
        十四、细胞凋亡检测第44页
        十五、细胞转染第44-45页
        十六、细胞增殖与毒性检测第45页
        十七、长牡蛎免疫刺激实验第45-46页
        十八、实验数据处理第46-47页
第三章 实验结果第47-73页
    第一节 长牡蛎Caspase家族基因的基本特征分析第47-58页
        一、长牡蛎Caspase家族基因的分子特征第47-54页
        二、长牡蛎Caspase家族重组蛋白及多克隆抗体制备第54页
        三、长牡蛎个体发育时期Caspase家族基因的mRNA表达特征第54-56页
        四、长牡蛎Caspase家族基因组织表达分布及蛋白水平的细胞定位第56-58页
    第二节 CgCaspase-3 分子功能及其介导的细胞凋亡调控机制第58-68页
        一、CgCaspase-3 蛋白酶活性第58-59页
        二、CgCaspase-3 对细胞增殖的影响第59-60页
        三、CgCaspase-3 诱导细胞凋亡第60-61页
        四、CgCaspase-3 与LPS相互作用第61-66页
        五、LPS抑制CgCaspase-3 引起的细胞凋亡第66-68页
    第三节 CgCaspase-8 分子功能及其对免疫刺激的响应情况第68-73页
        一. CgCaspase-8 蛋白酶活性第68-69页
        二、CgCaspase-8 对细胞增殖的影响第69页
        三、CgCaspase-8 诱导细胞凋亡第69-71页
        三、CgCaspase-8 与CgCaspase-3 共定位第71页
        四、免疫刺激后长牡蛎血淋巴细胞中CgCaspase-8 mRNA水平表达时序变化第71-72页
        五、免疫刺激后长牡蛎血淋巴细胞中CgCaspase-8 蛋白水平表达时序变化第72-73页
第四章 分析与讨论第73-81页
    第一节 长牡蛎Caspase-3 和Caspase-8 的基本特征及分布第73-75页
        一、CgCaspase-3 和CgCaspase-8 分子的基本特征第73-74页
        二、CgCaspase-3 和CgCaspase-8 在长牡蛎各组织中的分布及在血淋巴细胞中的定位第74-75页
    第二节 长牡蛎Caspase-3 分子功能及其介导的细胞凋亡调控机制第75-78页
        一、CgCaspase-3 蛋白酶活性及其介导的细胞凋亡第75-76页
        二、CgCaspase-3 可作为胞内LPS特异性识别受体第76-77页
        三、LPS抑制CgCaspase-3 引起的细胞凋亡第77-78页
    第三节 长牡蛎Caspase-8 分子功能及其对免疫刺激的响应情况第78-81页
        一、CgCaspase-8 蛋白酶活性及其介导的细胞凋亡第78-79页
        二、免疫刺激后Cg Caspase-8 分子mRNA及蛋白水平表达时序变化第79-81页
第五章 结论第81-83页
参考文献第83-94页
作者简历第94-95页
已完成和发表的论文第95页

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