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广陈皮植物化学物生物活性及橙皮素抑制乳腺癌细胞活性机理研究

摘要第5-7页
ABSTRACT第7-9页
缩略词表第16-19页
第一章 绪论第19-37页
    1.1 引言第19页
    1.2 广陈皮和茶枝柑第19-20页
    1.3 果实成熟对生物活性物质的影响第20-21页
    1.4 柑橘黄酮类化合物的生物活性第21-29页
        1.4.1 柑橘黄酮的分类与组成第21-23页
        1.4.2 抗癌活性第23-27页
        1.4.3 抗炎活性第27-28页
        1.4.4 其它活性第28-29页
            1.4.4.1 抗动脉粥样硬化活性第28页
            1.4.4.2 神经保护作用第28-29页
    1.5 柑橘黄酮的生物利用率第29-30页
        1.5.1 黄烷酮及其糖苷第29-30页
        1.5.2 多甲氧基黄酮第30页
    1.6 天然活性成分防治乳腺癌作用研究第30-31页
    1.7 转录组学研究的应用第31-34页
    1.8 本课题的研究意义和研究内容第34-37页
        1.8.1 研究意义第34-35页
        1.8.2 研究内容第35-37页
第二章 果实成熟对茶枝柑中植物化学物、抗氧化及抗增殖活性的影响第37-55页
    2.1 引言第37页
    2.2 材料与方法第37-45页
        2.2.1 实验材料第37页
        2.2.2 主要试剂第37-39页
        2.2.3 仪器与设备第39-40页
        2.2.4 实验方法第40-45页
            2.2.4.1 水分测定第40页
            2.2.4.2 维生素C测定第40-41页
            2.2.4.3 植物化学物提取第41页
            2.2.4.4 总酚含量测定第41页
            2.2.4.5 总黄酮含量测定第41-42页
            2.2.4.6 高效液相色谱分析酚类物质成分第42页
            2.2.4.7 过氧自由基清除能力(PSC)测定第42-43页
            2.2.4.8 氧自由基吸收能力(ORAC)测定第43页
            2.2.4.9 细胞培养第43页
            2.2.4.10 细胞抗氧化活性(CAA)测定第43-44页
            2.2.4.11 抗增殖活性测定第44页
            2.2.4.12 统计分析第44-45页
    2.3 实验结果与讨论第45-54页
        2.3.1 新会柑成熟过程中的形态特征第45-46页
        2.3.2 维生素C含量变化第46-47页
        2.3.3 总酚含量变化第47-48页
        2.3.4 总黄酮含量变化第48-49页
        2.3.5 酚类物质分析第49页
        2.3.6 抗氧化活性变化第49-52页
        2.3.7 细胞抗氧化活性变化第52-53页
        2.3.8 抗增殖活性变化第53-54页
    2.4 本章小结第54-55页
第三章 广陈皮制备陈化过程中植物化学物、抗氧化及抗增殖活性变化第55-75页
    3.1 引言第55页
    3.2 材料与方法第55-57页
        3.2.1 实验材料第55-56页
        3.2.2 主要试剂第56页
        3.2.3 仪器与设备第56页
        3.2.4 实验方法第56-57页
            3.2.4.1 酚类物质提取第56-57页
            3.2.4.2 总酚和总黄酮含量测定第57页
            3.2.4.3 体外抗氧化活性测定第57页
            3.2.4.4 细胞培养,细胞抗氧化活性(CAA)及抗增殖活性分析第57页
            3.2.4.5 HPLC-PAD分析酚类物质组成第57页
            3.2.4.6 统计分析第57页
    3.3 实验结果与讨论第57-74页
        3.3.1 广陈皮制备陈化样品分析第57-59页
        3.3.2 广陈皮制备陈化过程中总酚和总黄酮含量变化第59-61页
        3.3.3 广陈皮制备陈化过程中酚类物质组成的变化第61-64页
        3.3.4 广陈皮制备陈化过程中抗氧化活性变化第64-68页
        3.3.5 不同样品抗增殖活性分析第68-69页
        3.3.6 广陈皮多变量统计分析第69-72页
        3.3.7 两年陈化过程对广陈皮中酚类物质影响第72-74页
    3.4 本章小结第74-75页
第四章 广陈皮体外模拟消化过程中植物化学物及生物活性变化第75-89页
    4.1 引言第75页
    4.2 材料与方法第75-80页
        4.2.1 实验材料第75-76页
        4.2.2 主要试剂第76页
        4.2.3 仪器与设备第76页
        4.2.4 实验方法第76-80页
            4.2.4.1 体外模拟消化第76-77页
            4.2.4.2 酚类物质提取第77页
            4.2.4.3 总酚和总黄酮含量测定第77页
            4.2.4.4 抗氧化活性测定第77页
            4.2.4.5 HPLC-PAD分析酚类物质组成第77页
            4.2.4.6 抗炎症活性分析第77页
            4.2.4.7 RNA提取及荧光定量PCR分析第77-79页
            4.2.4.8 统计分析第79-80页
    4.3 实验结果与讨论第80-88页
        4.3.1 体外消化过程中总酚和总黄酮含量变化第80-82页
        4.3.2 体外消化过程中酚类物质含量变化第82-83页
        4.3.3 体外消化过程中抗氧化活性变化第83-86页
        4.3.4 体外消化过程中抗炎活性第86-88页
    4.4 本章小结第88-89页
第五章 橙皮素抑制乳腺癌MCF-7细胞活性作用的转录组分析第89-114页
    5.1 引言第89-90页
    5.2 材料与方法第90-96页
        5.2.1 实验材料第90页
        5.2.2 主要试剂第90-91页
        5.2.3 仪器与设备第91页
        5.2.4 实验方法第91-96页
            5.2.4.1 橙皮素对MCF-7细胞毒性及抗增殖活性评价第91-92页
            5.2.4.2 RNA提取第92页
            5.2.4.3 构建文库第92-93页
            5.2.4.4 数字基因表达谱(DGE)测序第93页
            5.2.4.5 数据过滤和比对第93页
            5.2.4.6 基因定量及表达水品分析第93页
            5.2.4.7 差异基因筛选第93-94页
            5.2.4.8 DEG的功能分析和聚类分析第94页
            5.2.4.9 IPA分析第94页
            5.2.4.10 蛋白交互作用网络分析第94页
            5.2.4.11 荧光定量PCR分析第94-95页
            5.2.4.12 统计分析第95-96页
    5.3 实验结果与讨论第96-112页
        5.3.1 橙皮素对雌激素受体阳性乳腺癌细胞MCF-7的细胞毒性和抗增殖活性分析第96页
        5.3.2 测序样品的准备和质量评估第96-97页
        5.3.3 DGE测序基本信息第97-98页
        5.3.4 基因表达水平分析第98-101页
        5.3.5 差异表达基因的筛选第101页
        5.3.6 差异基因的GO功能显著性分析第101-107页
        5.3.7 差异基因的KEGG分析第107页
        5.3.8 蛋白交互作用网络分析第107-109页
        5.3.9 橙皮素作用4h和24h的差异表达基因比较第109-112页
    5.4 本章小结第112-114页
第六章 橙皮素对两种乳腺癌细胞的作用机理异同分析第114-123页
    6.1 引言第114页
    6.2 材料与方法第114-115页
        6.2.1 实验材料第114页
        6.2.2 主要试剂第114页
        6.2.3 仪器与设备第114页
        6.2.4 实验方法第114-115页
            6.2.4.1 细胞毒性及抗增殖活性评价第114页
            6.2.4.2 RNA提取第114-115页
            6.2.4.3 荧光定量PCR分析第115页
            6.2.4.4 统计分析第115页
    6.3 结果与讨论第115-122页
        6.3.1 橙皮素处理雌激素受体阳性乳腺癌MCF-7细胞的主要通路的调控规律第115-120页
            6.3.1.1 内质网应激第115-117页
            6.3.1.2 MAPK信号通路第117-119页
            6.3.1.3 雌激素代谢调控第119-120页
        6.3.2 橙皮素对雌激素受体阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231细胞毒性及抗增殖活性分析第120页
        6.3.3 橙皮素对MDA-MB-231细胞转录水平的影响第120-121页
        6.3.4 橙皮素对两种乳腺癌细胞的作用机理异同分析第121-122页
    6.4 本章小结第122-123页
结论与展望第123-126页
    一、结论第123-125页
    二、创新点第125页
    三、展望第125-126页
参考文献第126-149页
攻读博士学位期间取得的研究成果第149-151页
致谢第151-152页
附件第152页

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