| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 符号与缩略语 | 第12-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-30页 |
| 1.1 S-腺苷甲硫氨酸的结构 | 第13-14页 |
| 1.2 SAM的稳定性 | 第14-15页 |
| 1.2.1 SAM的降解机理 | 第14-15页 |
| 1.2.2 SAM失活反应的影响因素 | 第15页 |
| 1.3 SAM的生理作用 | 第15-17页 |
| 1.3.1 转甲基作用 | 第15-16页 |
| 1.3.2 转硫作用 | 第16-17页 |
| 1.3.3 转氨丙基作用 | 第17页 |
| 1.4 SAM的临床应用 | 第17-19页 |
| 1.4.1 肝部疾病 | 第17-18页 |
| 1.4.2 抑郁症 | 第18页 |
| 1.4.3 关节炎 | 第18页 |
| 1.4.4 其他 | 第18-19页 |
| 1.5 SAM的制备方法 | 第19-23页 |
| 1.5.1 化学合成法 | 第19页 |
| 1.5.2 酶促转化法 | 第19-20页 |
| 1.5.3 微生物发酵法 | 第20-23页 |
| 1.6 ATP概述 | 第23页 |
| 1.7 小结 | 第23-24页 |
| 1.8 选题意义、技术路线、研究内容及目标 | 第24-26页 |
| 1.8.1 选题意义 | 第24-25页 |
| 1.8.2 技术路线 | 第25页 |
| 1.8.3 研究内容 | 第25-26页 |
| 1.8.4 研究目标 | 第26页 |
| 参考文献 | 第26-30页 |
| 第二章 S-腺苷甲硫氨酸检测方法的建立 | 第30-44页 |
| 2.1 引言 | 第30页 |
| 2.2 材料与方法 | 第30-35页 |
| 2.2.1 试剂与材料 | 第30-31页 |
| 2.2.2 仪器与设备 | 第31页 |
| 2.2.3 培养基 | 第31-32页 |
| 2.2.4 方法 | 第32-33页 |
| 2.2.5 溶液配制 | 第33页 |
| 2.2.6 纸电泳检测法建立 | 第33-34页 |
| 2.2.7 HPLC法建立 | 第34-35页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第35-42页 |
| 2.3.1 纸电泳方法建立 | 第35-38页 |
| 2.3.2 HPLC法确定 | 第38-42页 |
| 2.4 小结 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-44页 |
| 第三章 酿酒酵母S-腺苷甲硫氨酸合成酶sam2基因在雅致放射毛霉中的克隆表达 | 第44-58页 |
| 3.1 前言 | 第44页 |
| 3.2 材料与方法 | 第44-51页 |
| 3.2.1 菌株和质粒 | 第44-45页 |
| 3.2.2 培养基 | 第45页 |
| 3.2.3 主要试剂 | 第45页 |
| 3.2.4 仪器设备 | 第45页 |
| 3.2.5 溶液配制 | 第45-46页 |
| 3.2.6 sam2基因的获得 | 第46-47页 |
| 3.2.7 重组表达质粒的构建 | 第47-48页 |
| 3.2.8 表达质粒转化雅致放射毛霉 | 第48-49页 |
| 3.2.9 SAM高产转化子筛选及鉴定 | 第49-50页 |
| 3.2.10 SAM高产转化子的遗传稳定性考察 | 第50-51页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第51-55页 |
| 3.3.1 sam2基因的获得 | 第51页 |
| 3.3.2 T质粒克隆 | 第51-52页 |
| 3.3.3 重组表达质粒的双酶切鉴定 | 第52页 |
| 3.3.4 原生质体制备与再生 | 第52-54页 |
| 3.3.5 SAM高产转化子的筛选与鉴定 | 第54-55页 |
| 3.3.6 SAM高产转化子遗传稳定性考察 | 第55页 |
| 3.4 本章小结 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-58页 |
| 第四章 响应面法优化重组雅致放射毛霉的SAM合成工艺 | 第58-75页 |
| 4.1 前言 | 第58页 |
| 4.2 材料与方法 | 第58-59页 |
| 4.2.1 菌种 | 第58页 |
| 4.2.2 试剂 | 第58-59页 |
| 4.2.3 仪器与设备 | 第59页 |
| 4.2.4 培养基 | 第59页 |
| 4.2.5 菌体的获得 | 第59页 |
| 4.2.6 反应体系和反应条件 | 第59页 |
| 4.2.7 产物分析及计算方法 | 第59页 |
| 4.3 结果与分析 | 第59-73页 |
| 4.3.1 单因素试验 | 第59-65页 |
| 4.3.2 Plackett-Burman试验 | 第65-67页 |
| 4.3.3 最陡爬坡试验 | 第67-68页 |
| 4.3.4 转化条件的响应面优化 | 第68-73页 |
| 4.3.5 验证试验 | 第73页 |
| 4.4 本章小结 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-75页 |
| 第五章 总结与展望 | 第75-78页 |
| 5.1 总结 | 第75-76页 |
| 5.2 展望 | 第76-78页 |
| 附录1 | 第78-79页 |
| 附录2 | 第79-81页 |
| 致谢 | 第81-82页 |
| 攻读硕士学位期间主要科研成果 | 第82页 |