| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 主要符号对照表 | 第8-11页 |
| 第1章 引言 | 第11-23页 |
| ·苹果酸脱氢酶 | 第11-12页 |
| ·苹果酸脱氢酶的理化性质及生理功能 | 第11页 |
| ·苹果酸脱氢酶的用途 | 第11-12页 |
| ·极端嗜热菌Thermus thermophilus H827 | 第12-15页 |
| ·蛋白质折叠 | 第15-22页 |
| ·蛋白质折叠研究的概况 | 第15-16页 |
| ·研究蛋白质折叠常用的技术与方法 | 第16-19页 |
| ·蛋白质的变性与去折叠 | 第19-21页 |
| ·蛋白质错误折叠与疾病 | 第21-22页 |
| ·本文的研究目的和主要内容 | 第22-23页 |
| 第2章 材料和方法 | 第23-37页 |
| ·实验材料 | 第23-24页 |
| ·实验仪器 | 第23页 |
| ·实验试剂 | 第23-24页 |
| ·实验方法 | 第24-37页 |
| ·生物信息学分析及预测 | 第24页 |
| ·重组苹果酸脱氢酶的克隆、表达和纯化 | 第24-30页 |
| ·苹果酸脱氢酶的活性测定 | 第30-31页 |
| ·酶促反应动力学常数的测定 | 第31页 |
| ·pH 对苹果酸脱氢酶活性的影响 | 第31-32页 |
| ·温度对苹果酸脱氢酶活性的影响 | 第32页 |
| ·金属阳离子对苹果酸脱氢酶活性的影响 | 第32页 |
| ·抑制动力学研究 | 第32-34页 |
| ·盐酸胍变性实验 | 第34-35页 |
| ·内源荧光光谱测定 | 第35页 |
| ·ANS 结合荧光光谱实验 | 第35-36页 |
| ·osmolytes 对胍变性的Tt-MDH 再折叠过程中防聚沉的作用 | 第36-37页 |
| 第3章 生物信息学分析苹果酸脱氢酶的序列和结构 | 第37-45页 |
| ·引言 | 第37-38页 |
| ·结果 | 第38-44页 |
| ·苹果酸脱氢酶氨基酸序列分析 | 第38-39页 |
| ·苹果酸脱氢酶二级结构的预测 | 第39-40页 |
| ·苹果酸脱氢酶的氨基酸序列同源性分析 | 第40-41页 |
| ·苹果酸脱氢酶高级结构预测分析 | 第41-42页 |
| ·苹果酸脱氢酶的进化树构建 | 第42-44页 |
| ·讨论 | 第44-45页 |
| 第4章 重组苹果酸脱氢酶的表达，纯化和性质研究 | 第45-55页 |
| ·引言 | 第45-46页 |
| ·结果 | 第46-53页 |
| ·苹果酸脱氢酶基因克隆和重组构建 | 第46-47页 |
| ·苹果酸脱氢酶的表达和纯化 | 第47-49页 |
| ·酶促反应动力学常数 | 第49-50页 |
| ·pH 对苹果酸脱氢酶活性的影响 | 第50-51页 |
| ·温度对苹果酸脱氢酶活性的影响 | 第51-53页 |
| ·金属阳离子对苹果酸脱氢酶活性的影响 | 第53页 |
| ·讨论 | 第53-55页 |
| 第5章 盐酸胍变性过程中苹果酸脱氢酶的失活和去折叠研究 | 第55-64页 |
| ·引言 | 第55-56页 |
| ·结果 | 第56-62页 |
| ·盐酸胍对苹果酸脱氢酶活性的影响 | 第56-59页 |
| ·盐酸胍对苹果酸脱氢酶内源荧光光谱的影响 | 第59-61页 |
| ·盐酸胍对苹果酸脱氢酶ANS 结合荧光光谱的影响 | 第61-62页 |
| ·讨论 | 第62-64页 |
| 第6章 苹果酸脱氢酶再折叠过程中的聚沉 | 第64-68页 |
| ·引言 | 第64页 |
| ·结果 | 第64-67页 |
| ·温度、Tt-MDH 浓度对聚沉的影响 | 第64-65页 |
| ·Osmolytes 防止Tt-MDH 聚沉研究 | 第65-67页 |
| ·讨论 | 第67-68页 |
| 总结 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-75页 |
| 致谢 | 第75-76页 |
| 研究期间发表论文情况 | 第76页 |
