| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 缩略词表 | 第12-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-22页 |
| 1 课题的提出 | 第13-14页 |
| 2 抗坏血酸在植物中的生理功能 | 第14-15页 |
| 2.1 AsA在光合作用与光保护中起重要作用 | 第14页 |
| 2.2 AsA在植物体的抗氧化系统中起重要作用 | 第14页 |
| 2.3 AsA在细胞壁代谢和细胞膨大中的作用 | 第14-15页 |
| 2.4 AsA在细胞分裂中的作用 | 第15页 |
| 2.5 抗坏血酸对花期调控的作用 | 第15页 |
| 2.6 抗坏血酸调控植物叶片的衰老 | 第15页 |
| 3 植物抗坏血酸生物合成途径 | 第15-18页 |
| 3.1 D-甘露糖/L-半乳糖途径 | 第17页 |
| 3.2 糖醛酸转变途径 | 第17-18页 |
| 3.3 古洛糖途径 | 第18页 |
| 3.4 肌醇途径 | 第18页 |
| 4 ASA在植物体中的代谢 | 第18-19页 |
| 4.1 AsA在植物细胞内的运输 | 第18-19页 |
| 4.2 AsA在植物体内的氧化还原过程 | 第19页 |
| 4.3 植物体内AsA的降解 | 第19页 |
| 5 抗坏血酸与环境胁迫 | 第19-20页 |
| 6 番茄抗坏血酸合成代谢研究进展 | 第20-21页 |
| 7 本研究的目的、内容和意义 | 第21-22页 |
| 第二章 AMR1的功能鉴定 | 第22-35页 |
| 1 前言 | 第22-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-27页 |
| 2.1 植物材料 | 第23页 |
| 2.2 试剂、菌株和载体 | 第23页 |
| 2.3 实验方法 | 第23-27页 |
| 2.3.1 AMR1组织表达谱及各组织抗坏血酸含量分析 | 第23-24页 |
| 2.3.2 目标基因获得及分析 | 第24页 |
| 2.3.3 超量表达载体的构建 | 第24页 |
| 2.3.4 干涉表达载体的构建 | 第24-25页 |
| 2.3.5 番茄的遗传转化 | 第25页 |
| 2.3.6 转基因植株的阳性检测 | 第25-26页 |
| 2.3.7 转基因植株的基因表达分析 | 第26页 |
| 2.3.8 抗坏血酸含量的测定 | 第26页 |
| 2.3.8.1 超量及干涉转基因植株叶片抗坏血酸含量的测定 | 第26页 |
| 2.3.8.2 超量及干涉转基因植株破色期果实抗坏血酸含量的测定 | 第26页 |
| 2.3.9 数据处理 | 第26-27页 |
| 3 结果与分析 | 第27-33页 |
| 3.1 AMR1组织表达分析及各组织抗坏血酸含量分析 | 第27页 |
| 3.2 AMR1的克隆及序列分析 | 第27-29页 |
| 3.3 转基因植株的获得及分子检测 | 第29-31页 |
| 3.4 转基因番茄株系叶片中相对表达量及抗坏血酸含量的分析 | 第31-32页 |
| 3.4.1 超量表达AMR1降低了番茄叶片抗坏血酸含量 | 第31页 |
| 3.4.2 抑制AMR1表达提高了番茄叶片抗坏血酸含量 | 第31-32页 |
| 3.5 转基因番茄株系果实中抗坏血酸含量的分析 | 第32页 |
| 3.6 AMR1超量表达株系中抗坏血酸合成相关基因的表达分析 | 第32-33页 |
| 4 讨论 | 第33-35页 |
| 第三章 GGP的功能鉴定 | 第35-45页 |
| 1 前言 | 第35页 |
| 2 材料和方法 | 第35-37页 |
| 2.1 植物材料 | 第35页 |
| 2.2 主要试剂、菌株及载体 | 第35-36页 |
| 2.3 实验方法 | 第36-37页 |
| 2.3.1 RNA抽提及反转录 | 第36页 |
| 2.3.2 GGP基因的组织表达谱及各组织抗坏血酸含量分析 | 第36页 |
| 2.3.3 GGP扩增和测序分析 | 第36页 |
| 2.3.4 干涉及超量表达载体的构建及番茄遗传转化 | 第36页 |
| 2.3.5 转基因植株分子检测 | 第36-37页 |
| 2.3.5.1 转基因植株PCR阳性检测 | 第36页 |
| 2.3.5.2 转基因植株相对表达量检测 | 第36-37页 |
| 2.3.6 超量转基因植株相对表达量及抗坏血酸含量分析 | 第37页 |
| 2.3.6.1 叶片相对表达量及抗坏血酸含量分析 | 第37页 |
| 2.3.6.2 果实相对表达量及抗坏血酸含量分析 | 第37页 |
| 2.3.7 干涉转基因植株相对表达量及抗坏血酸含量分析 | 第37页 |
| 3 结果与分析 | 第37-43页 |
| 3.1 GGP的克隆及分析 | 第37-38页 |
| 3.2 GGP在各组织的表达模式及抗坏血酸含量分析 | 第38-39页 |
| 3.3 转基因植株的获得及分子检测 | 第39-40页 |
| 3.3.1 转基因植株的获得及PCR阳性检测 | 第39页 |
| 3.3.2 转基因植株相对表达量检测 | 第39-40页 |
| 3.4 GGP超量转基因植株抗坏血酸含量分析 | 第40-42页 |
| 3.4.1 叶片中相对表达量及抗坏血酸含量分析 | 第40-41页 |
| 3.4.2 破色期果实中相对表达量及抗坏血酸含量分析 | 第41-42页 |
| 3.5 GGP干涉转基因植株相对表达量及抗坏血酸含量分析 | 第42-43页 |
| 3.6 GGP转基因株系果实中抗坏血酸合成代谢相关基因的表达分析 | 第43页 |
| 4 讨论 | 第43-45页 |
| 第四章 GPPs的功能鉴定 | 第45-54页 |
| 1 前言 | 第45页 |
| 2 材料与方法 | 第45-47页 |
| 2.1 植物材料 | 第45页 |
| 2.2 主要试剂、菌株及载体 | 第45页 |
| 2.3 实验方法 | 第45-47页 |
| 2.3.1 GPPs组织表达谱及各组织抗坏血酸含量测定分析 | 第45-46页 |
| 2.3.2 GPPs基因扩增和序列分析 | 第46页 |
| 2.3.3 GPP1与GPP2超量表达载体的构建及番茄遗传转化 | 第46页 |
| 2.3.4 GPPs干涉表达载体的构建及番茄遗传转化 | 第46页 |
| 2.3.5 转基因株系的分子检测 | 第46页 |
| 2.3.6 GPPs超量转基因植株叶片相对表达量及抗坏血酸含量测定 | 第46页 |
| 2.3.7 共干涉转基因植株破色果实相对表达量及抗坏血酸含量测定 | 第46-47页 |
| 3 结果与分析 | 第47-53页 |
| 3.1 GPPs组织表达谱及抗坏血酸含量分析 | 第47页 |
| 3.2 GPPs基因的克隆及序列分析 | 第47-49页 |
| 3.3 转基因株系的获得及分子检测 | 第49-50页 |
| 3.4 GPPs超量转基因植株相对表达量及抗坏血酸含量分析 | 第50-51页 |
| 3.5 GPPs共干涉植株相对表达量及抗坏血酸含量的分析 | 第51页 |
| 3.6 GPPs超量株系抗坏血酸合成代谢相关基因的表达分析 | 第51-52页 |
| 3.7 GPPs共干涉株系抗坏血酸合成代谢相关基因的表达分析 | 第52-53页 |
| 4 讨论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 附录 | 第61-63页 |
