| 中文摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 缩略词索引 | 第10-16页 |
| 第一章 绪论 | 第16-44页 |
| 1.1 胃癌及其早期诊断 | 第16页 |
| 1.2 胃癌相关分子标志物 | 第16-21页 |
| 1.2.1 胃癌传统标志物 | 第17页 |
| 1.2.2 外周血循环DNA(circulating DNA,cirDNA) | 第17-18页 |
| 1.2.3 甲基化 | 第18-19页 |
| 1.2.4 miRNAs | 第19-20页 |
| 1.2.5 基因突变 | 第20-21页 |
| 1.3 胃癌相关分子标志物的检测方法 | 第21-30页 |
| 1.3.1 循环DNA的检测方法 | 第21-22页 |
| 1.3.2 特异位点的甲基化检测方法 | 第22-24页 |
| 1.3.3 miRNAs的检测方法 | 第24-27页 |
| 1.3.4 基因突变的检测方法 | 第27-30页 |
| 1.4 磁性纳米颗粒的特点及生物应用 | 第30-32页 |
| 1.4.1 磁性纳米颗粒的特点 | 第30页 |
| 1.4.2 磁性纳米颗粒的生物应用 | 第30-32页 |
| 1.5 本课题的研究内容和意义 | 第32-33页 |
| 1.5.1 研究内容 | 第32-33页 |
| 1.5.2 研究意义 | 第33页 |
| 参考文献 | 第33-44页 |
| 第二章 基于磁性纳米颗粒的血浆循环DNA异常甲基化检测 | 第44-58页 |
| 2.1 引言 | 第44-45页 |
| 2.1.1 循环DNA异常甲基化的研究目的及意义 | 第44页 |
| 2.1.2 磁分离提取血浆循环DNA的方法及意义 | 第44-45页 |
| 2.2 材料与方法 | 第45-51页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第45-47页 |
| 2.2.2 试验方法 | 第47-51页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第51-55页 |
| 2.3.1 磁性纳米颗粒的制备与表征 | 第51-52页 |
| 2.3.2 提取循环DNA的磁性纳米颗粒选取 | 第52-53页 |
| 2.3.3 E-cadherin基因启动子区异常甲基化定量检测 | 第53-54页 |
| 2.3.4 统计学分析结果 | 第54-55页 |
| 2.4 本章小结 | 第55-58页 |
| 第三章 基于磁性纳米颗粒和化学发光技术的胃癌血浆miR-21检测 | 第58-78页 |
| 3.1 引言 | 第58-60页 |
| 3.2 材料与方法 | 第60-66页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第60-62页 |
| 3.2.1.1 | 第60-62页 |
| 3.2.2 实验方法 | 第62-66页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第66-75页 |
| 3.3.1 特异性检测实验 | 第66-67页 |
| 3.3.2 最佳磁性纳米颗粒用量实验结果 | 第67-68页 |
| 3.3.3 最佳羧基化浓度实验 | 第68页 |
| 3.3.4 最佳捕获探针修饰浓度实验 | 第68-69页 |
| 3.3.5 最佳杂交温度实验 | 第69-70页 |
| 3.3.6 最佳杂交时间实验 | 第70-71页 |
| 3.3.7 检测限实验 | 第71-72页 |
| 3.3.8 胃癌血浆miR-21相对表达量检测的建立及应用 | 第72-75页 |
| 3.4 本章小结 | 第75页 |
| 参考文献 | 第75-78页 |
| 第四章 基于磁性纳米颗粒和基因芯片技术的胃癌多态性研究 | 第78-100页 |
| 4.1 引言 | 第78-79页 |
| 4.2 材料与方法 | 第79-85页 |
| 4.2.1 样本来源 | 第79页 |
| 4.2.2 实验材料 | 第79-81页 |
| 4.2.3 实验方法 | 第81-85页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第85-96页 |
| 4.3.1 磁性纳米颗粒(γ-Fe_2O_3)的制备与亲和素修饰 | 第85-86页 |
| 4.3.2 SA-MNPs的生物活性检测 | 第86-87页 |
| 4.3.3 PCR扩增结果 | 第87页 |
| 4.3.4 杂交温度的优化 | 第87-89页 |
| 4.3.5 SNP初步分型及验证 | 第89-91页 |
| 4.3.6 临床样本SNP分型结果 | 第91-92页 |
| 4.3.7 Hardy-Weinberg遗传平衡检测 | 第92-93页 |
| 4.3.8 胃癌易感性研究 | 第93-95页 |
| 4.3.9 多态性关联研究 | 第95-96页 |
| 4.4 本章小结 | 第96-97页 |
| 4.4.1 建立了COX-2-765G>C与BCL-2-938C>A位点SNP分型方法 | 第96页 |
| 4.4.2 临床样本分型 | 第96-97页 |
| 4.4.3 SNP与胃癌易感性的关系 | 第97页 |
| 参考文献 | 第97-100页 |
| 第五章 基于Pd纳米颗粒的SNP分型方法初探 | 第100-114页 |
| 5.1 引言 | 第100-101页 |
| 5.2 材料与方法 | 第101-105页 |
| 5.2.1 实验材料 | 第101-103页 |
| 5.2.2 实验方法 | 第103-105页 |
| 5.2.2.2 MUA@Pd标记DNA(MUA@Pd-DNA) | 第103页 |
| 5.2.2.3 表征 | 第103-104页 |
| 5.2.2.4 基因芯片的制备 | 第104页 |
| 5.2.2.5 COX-2启动子区-765G>C位点的PCR扩增 | 第104-105页 |
| 5.2.2.6 “三明治”杂交法检测SNP | 第105页 |
| 5.2.2.7 Ag镀液配方及实验方法 | 第105页 |
| 5.2.2.8 DNA序列分析 | 第105页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第105-112页 |
| 5.3.1 MUA@Pd纳米颗粒的制备与表征 | 第105-108页 |
| 5.3.2 Pd纳米颗粒标记DNA微阵列的表征 | 第108-109页 |
| 5.3.3 “三明治”杂交体系的建立 | 第109-110页 |
| 5.3.4 COX-2-765G>C位点PCR扩增 | 第110页 |
| 5.3.5 胃癌标本COX-2-765G>C位点的分型结果 | 第110-111页 |
| 5.3.6 测序验证 | 第111-112页 |
| 5.4 本章小结 | 第112页 |
| 5.4.1 制备MUA@Pd纳米颗粒 | 第112页 |
| 5.4.2 建立了基于Pd纳米颗粒的SNP分型方法 | 第112页 |
| 5.4.3 胃癌样本的COX-2-765G>C位点分型 | 第112页 |
| 参考文献 | 第112-114页 |
| 第六章 总结与展望 | 第114-116页 |
| 6.1 论文工作总结 | 第114-115页 |
| 6.2 下一步工作展望 | 第115-116页 |
| 附录 | 第116-118页 |
| 致谢 | 第118页 |
