摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
第1章 文献综述 | 第11-25页 |
1.1 淀粉酶 | 第11-12页 |
1.2 α-淀粉酶 | 第12-15页 |
1.2.1 α-淀粉酶性质及结构 | 第12-14页 |
1.2.2 低温α-淀粉酶的性质及应用 | 第14页 |
1.2.3 低温α-淀粉酶的克隆与表达 | 第14-15页 |
1.3 米曲霉 | 第15-21页 |
1.3.1 米曲霉基因组信息 | 第15-16页 |
1.3.2 曲霉表达系统 | 第16-18页 |
1.3.3 米曲霉尿嘧啶营养缺陷型 | 第18-20页 |
1.3.4 米曲霉表达异源蛋白 | 第20-21页 |
1.4 低温微生物与Geomyces pannorum | 第21-23页 |
1.4.1 低温微生物 | 第21-22页 |
1.4.2 低温酶 | 第22页 |
1.4.3 G.pannorum | 第22-23页 |
1.5 研究的意义及主要内容 | 第23-25页 |
第2章 米曲霉营养缺陷型菌株的筛选及表达系统的构建 | 第25-47页 |
2.1 引言 | 第25页 |
2.2 实验材料 | 第25-28页 |
2.2.1 菌种和质粒 | 第25-26页 |
2.2.2 工具酶和试剂 | 第26页 |
2.2.3 实验溶液配制 | 第26-27页 |
2.2.4 培养基 | 第27-28页 |
2.2.5 主要实验仪器 | 第28页 |
2.3 实验方法 | 第28-37页 |
2.3.1 米曲霉营养缺陷型菌株的筛选 | 第28-29页 |
2.3.2 菌株的鉴定 | 第29-31页 |
2.3.3 基因回补实验 | 第31-34页 |
2.3.4 表达载体的构建 | 第34-37页 |
2.3.5 绿色荧光蛋白的表达 | 第37页 |
2.4 结果与讨论 | 第37-46页 |
2.4.1 米曲霉尿嘧啶营养缺陷型菌株的筛选 | 第37-38页 |
2.4.2 突变株的鉴定及回补 | 第38-42页 |
2.4.3 表达载体的构建 | 第42-45页 |
2.4.4 报告基因的表达 | 第45-46页 |
2.5 本章小结 | 第46-47页 |
第3章 南极耐寒菌αα-淀粉酶的克隆表达及其鉴定 | 第47-73页 |
3.1 引言 | 第47页 |
3.2 实验材料 | 第47-49页 |
3.2.1 菌株和质粒 | 第47页 |
3.2.2 工具酶及试剂 | 第47-48页 |
3.2.3 实验溶液配制 | 第48-49页 |
3.2.4 培养基 | 第49页 |
3.2.5 主要实验仪器 | 第49页 |
3.3 实验方法 | 第49-58页 |
3.3.1 G.pannorum α-淀粉酶诱导培养 | 第49-50页 |
3.3.2 G.pannorum α-淀粉酶基因克隆与分析 | 第50-55页 |
3.3.3 G.pannorum α-淀粉酶在米曲霉中表达 | 第55-57页 |
3.3.4 G.pannorum α-淀粉酶酶学性质研究 | 第57-58页 |
3.4 结果与讨论 | 第58-71页 |
3.4.1 G.pannorum α-淀粉酶诱导培养 | 第58-59页 |
3.4.2 G.pannorum α-淀粉酶基因克隆与分析 | 第59-63页 |
3.4.3 G.pannorum α-淀粉酶异源表达 | 第63-66页 |
3.4.4 G.pannorum α-淀粉酶的纯化 | 第66-67页 |
3.4.5 G.pannorum α-淀粉酶酶学性质研究 | 第67-71页 |
3.5 本章小结 | 第71-73页 |
第4章 结论与展望 | 第73-75页 |
4.1 结论 | 第73-74页 |
4.2 展望 | 第74-75页 |
参考文献 | 第75-82页 |
致谢 | 第82-83页 |