摘要 | 第6-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
第一部分 文献综述 | 第12-46页 |
第一章 肌肉生长发育的研究现状 | 第12-24页 |
1 肌肉发育概述 | 第12-14页 |
1.1 胚胎期肌肉的发育 | 第13页 |
1.2 成年期的肌肉再生 | 第13-14页 |
2 肌肉发育过程中的重要基因及调控 | 第14-16页 |
2.1 Pax基因在肌肉发育过程中的作用 | 第14页 |
2.2 MRFs基因在肌肉发育过程中的作用 | 第14-15页 |
2.3 肌肉发育的分子调控机制 | 第15-16页 |
3 影响肌肉发育的其它因素 | 第16-18页 |
3.1 Myostatin对肌肉发育的影响 | 第16-17页 |
3.2 激素水平对肌肉发育的影响 | 第17页 |
3.3 营养水平对肌肉发育的影响 | 第17-18页 |
参考文献 | 第18-24页 |
第二章 microRNA的研究进展 | 第24-46页 |
1 microRNA(miRNA)的发现 | 第24页 |
2 miRNA的产生机制 | 第24-29页 |
2.1 miRNA的转录 | 第24-25页 |
2.2 miRNA的成熟 | 第25-27页 |
2.3 RISC的组装 | 第27-29页 |
3 miRNA对靶基因的调控作用机制 | 第29页 |
4 miRNA的生物学功能 | 第29-32页 |
4.1 对分化及细胞周期的影响 | 第29-30页 |
4.2 与癌症的关系 | 第30-31页 |
4.3 对肌肉发育的影响 | 第31-32页 |
5 新一代测序技术在miRNA研究上的应用 | 第32-33页 |
6 miRNA靶标基因的筛选与鉴定 | 第33-34页 |
6.1 利用软件预测靶标基因 | 第33页 |
6.2 利用基因芯片筛选靶标基因 | 第33-34页 |
6.3 利用蛋白组学筛选靶标基因 | 第34页 |
6.4 利用免疫共沉淀钓取靶标基因 | 第34页 |
参考文献 | 第34-46页 |
第二部分 实验部分 | 第46-116页 |
第一章 利用solexa测序技术鉴定猪骨骼肌相关miRNA | 第46-92页 |
1 材料与方法 | 第47-52页 |
1.1 实验动物 | 第47页 |
1.2 试剂耗材与仪器 | 第47页 |
1.3 RNA的提取 | 第47-48页 |
1.4 测序流程简介 | 第48页 |
1.5 信息分析流程 | 第48-51页 |
1.6 miRNA的反转录 | 第51页 |
1.7 定量PCR | 第51-52页 |
2 结果与分析 | 第52-87页 |
2.1 sRNA测序结果统计 | 第52-53页 |
2.2 sRNA的长度分布统计 | 第53-54页 |
2.3 sRNA在基因组中的定位 | 第54页 |
2.4 sRNA的分类注释 | 第54-55页 |
2.5 已知miRNA统计情况 | 第55-56页 |
2.6 novel miRNA预测 | 第56-76页 |
2.7 已知mLRNA种子区域碱基编辑统计 | 第76-83页 |
2.8 高丰度miRNA组织谱定量PCR检测 | 第83-85页 |
2.9 ssc-miR-378在肌肉不同发育阶段的定量PCR检测 | 第85-87页 |
3 讨论 | 第87-89页 |
参考文献 | 第89-92页 |
第二章 miR-378在肌肉发育过程中的生物学功能研究 | 第92-116页 |
1 材料与方法 | 第92-99页 |
1.1 实验动物 | 第92页 |
1.2 试剂耗材与仪器 | 第92-93页 |
1.3 C2C12小鼠肌肉卫星细胞的培养 | 第93页 |
1.4 PIEC猪血管内皮细胞的培养 | 第93页 |
1.5 细胞RNA的提取 | 第93-94页 |
1.6 反转录 | 第94页 |
1.7 定量PCR | 第94页 |
1.8 细胞的转染 | 第94-95页 |
1.9 基因芯片的制备 | 第95-97页 |
1.10 GRB2 3’UTR荧光素酶靶标载体的构建 | 第97-99页 |
1.11 GRB2 3’UTR荧光素酶靶标载体的验证 | 第99页 |
2 结果与分析 | 第99-109页 |
2.1 mmu-miR-378在小鼠不同组织的表达情况 | 第99-100页 |
2.2 C2C12分化过程中,分化Marker基因及miR-378的表达情况 | 第100-101页 |
2.3 基因芯片检测C2C12中过表达miR-378引起的下游基因变化 | 第101-104页 |
2.4 miR-378靶标的预测 | 第104-105页 |
2.5 miR-378调控GRB2的3’UTR | 第105-109页 |
3 讨论 | 第109-112页 |
参考文献 | 第112-116页 |
全文结论 | 第116-118页 |
创新 | 第118-120页 |
致谢 | 第120-122页 |
论文发表 | 第122页 |