| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 1 前言 | 第11-21页 |
| 1.1 饲用蛋白资源 | 第11-12页 |
| 1.2 棉粕 | 第12-15页 |
| 1.2.1 棉籽饼粕的基本特性 | 第12页 |
| 1.2.2 棉酚的性质 | 第12-13页 |
| 1.2.3 棉酚的危害 | 第13-14页 |
| 1.2.4 棉酚的测定方法 | 第14-15页 |
| 1.3 棉粕的脱毒方法 | 第15-18页 |
| 1.3.1 物理法 | 第15-16页 |
| 1.3.2 化学法 | 第16-17页 |
| 1.3.3 微生物发酵法 | 第17-18页 |
| 1.4 微生物发酵法降解棉酚的研究进展 | 第18-20页 |
| 1.4.1 微生物菌株降解棉酚的研究进展 | 第18-19页 |
| 1.4.2 发酵脱毒机理研究 | 第19-20页 |
| 1.5 主要研究内容和意义 | 第20-21页 |
| 1.5.1 本课题的的主要研究内容 | 第20页 |
| 1.5.2 本课题的意义 | 第20-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-28页 |
| 2.1 材料与菌株 | 第21页 |
| 2.1.1 样品来源 | 第21页 |
| 2.1.2 实验菌株 | 第21页 |
| 2.2 主要仪器 | 第21-22页 |
| 2.3 主要试剂 | 第22页 |
| 2.4 培养基 | 第22页 |
| 2.5 实验方法 | 第22-28页 |
| 2.5.1 可降解棉酚的酵母菌的分离 | 第22-23页 |
| 2.5.2 酵母菌形态观察 | 第23页 |
| 2.5.3 酵母菌数的测定方法 | 第23页 |
| 2.5.4 酵母菌生长曲线的绘制方法 | 第23页 |
| 2.5.5 酵母菌培养及固体发酵方法 | 第23页 |
| 2.5.6 棉酚含量的测定方法 | 第23-24页 |
| 2.5.7 高效液相色谱检测棉酚和醋酸棉酚的色谱条件 | 第24页 |
| 2.5.8 棉酚和醋酸棉酚标准曲线的绘制 | 第24-25页 |
| 2.5.9 棉酚降解率的计算方法 | 第25页 |
| 2.5.10 酵母基因组DNA提取方法 | 第25页 |
| 2.5.11 PCR扩增方法 | 第25页 |
| 2.5.12 酵母菌紫外诱变方法 | 第25-26页 |
| 2.5.13 致死率计算方法 | 第26页 |
| 2.5.14 菌种诱变后初筛方法 | 第26页 |
| 2.5.15 醋酸棉酚液体发酵后蛋白质的提取 | 第26-27页 |
| 2.5.16 醋酸棉酚降解速率 | 第27-28页 |
| 3 结果与讨论 | 第28-61页 |
| 3.1 可降解棉酚的酵母菌的分离鉴定结果和分析 | 第28-33页 |
| 3.1.1 可降解棉酚的酵母菌株的分离筛选和分子鉴定结果 | 第28-29页 |
| 3.1.2 酵母菌的PCR扩增结果 | 第29-30页 |
| 3.1.3 筛选分离到的酵母菌株系统进化树的构建 | 第30-32页 |
| 3.1.4 酵母菌SD2A和SH87的形态观察结果 | 第32-33页 |
| 3.1.5 小结与讨论 | 第33页 |
| 3.2 高棉酚降解率酵母菌株的筛选与性质分析 | 第33-43页 |
| 3.2.1 不同酵母菌在以醋酸棉酚为唯一碳源的固体培养基上的生长情况及结果分析 | 第33-36页 |
| 3.2.2 不同的酵母菌在以醋酸棉酚为唯一碳源的液体培养基中总菌数的比较 | 第36-37页 |
| 3.2.3 不同酵母菌在以醋酸棉酚为唯一碳源的液体培养基中的OD_(600)比较及结果分析 | 第37页 |
| 3.2.4 不同酵母菌在不同碳源中总菌数和OD_(600)的比较及结果分析 | 第37-40页 |
| 3.2.5 菌株SH87生长曲线和OD值实验 | 第40-41页 |
| 3.2.6 不同酵母菌对棉酚的降解率比较及分析 | 第41-42页 |
| 3.2.7 小结与讨论 | 第42-43页 |
| 3.3 棉粕固态发酵工艺的优化 | 第43-48页 |
| 3.3.1 不同水分对酵母菌的棉酚降解率的影响 | 第43-44页 |
| 3.3.2 不同温度对酵母菌的棉酚降解率的影响 | 第44页 |
| 3.3.3 不同接种量对酵母菌的棉酚降解率的影响 | 第44-45页 |
| 3.3.4 不同发酵时间对酵母菌的棉酚降解能力的影响 | 第45页 |
| 3.3.5 不同pH对酵母菌的棉酚降解率的影响 | 第45-46页 |
| 3.3.6 混菌发酵对棉酚的降解作用实验 | 第46-47页 |
| 3.3.7 小结 | 第47-48页 |
| 3.4 高棉酚降解率菌株SD2A的诱变育种 | 第48-51页 |
| 3.4.1 菌株SD2A的生长曲线绘制 | 第48-49页 |
| 3.4.2 菌株SD2A的致死率曲线绘制 | 第49页 |
| 3.4.3 菌株SD2A紫外诱变初筛实验 | 第49-50页 |
| 3.4.4 菌株SD2A紫外诱变复筛实验 | 第50页 |
| 3.4.5 小结 | 第50-51页 |
| 3.5 产朊假丝酵母SH87固态菌剂的制备 | 第51-55页 |
| 3.5.1 发酵培养基配方的优化 | 第51-52页 |
| 3.5.2 发酵方式和发酵时间的优化 | 第52页 |
| 3.5.3 固态发酵培养基含水率的优化 | 第52-53页 |
| 3.5.4 烘干温度的优化 | 第53页 |
| 3.5.5 烘干后含水率的优化 | 第53-54页 |
| 3.5.6 酵母菌SH87发酵固态棉粕的放大实验 | 第54-55页 |
| 3.5.7 小结与讨论 | 第55页 |
| 3.6 棉酚降解机理的探究实验 | 第55-61页 |
| 3.6.1 发酵液提取物对醋酸棉酚降解的影响 | 第55-56页 |
| 3.6.2 发酵提取物的水浴时间对醋酸棉酚降解速率的影响 | 第56-57页 |
| 3.6.3 发酵提取物的水浴温度对醋酸棉酚降解的影响 | 第57页 |
| 3.6.4 发酵提取物热处理后对醋酸棉酚降解的影响 | 第57-58页 |
| 3.6.5 对发酵液提取物的性质的摸索 | 第58-59页 |
| 3.6.6 醋酸棉酚降解的中间产物的全波长扫描结果 | 第59页 |
| 3.6.7 小结与讨论 | 第59-61页 |
| 4 全文总结 | 第61-63页 |
| 参考文献 | 第63-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 附录A | 第68-76页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第76页 |
