摘要 | 第9-13页 |
ABSTRACT | 第13-17页 |
英文缩略词 | 第18-20页 |
前言 | 第20-21页 |
第一篇 文献综述 | 第21-63页 |
第一章 巨型艾美耳球虫研究进展和鸡球虫病的防控现状 | 第21-45页 |
1 E.maxima研究进展 | 第21-25页 |
1.1 E.maxima的发现 | 第21页 |
1.2 E.maxima的发育 | 第21-22页 |
1.3 E.maxima卵囊形态 | 第22页 |
1.4 流行病学 | 第22-23页 |
1.5 E.maxima的致病性 | 第23-24页 |
1.6 E.maxima的免疫学特征 | 第24页 |
1.7 同工酶研究 | 第24-25页 |
1.8 E.maxima基因序列研究 | 第25页 |
2 鸡球虫的防控现状 | 第25-34页 |
2.1 抗球虫产品的应用 | 第25-29页 |
2.2 疫苗 | 第29-33页 |
2.3 其他鸡球虫病防控策略 | 第33-34页 |
参考文献 | 第34-45页 |
第二章 鸡艾美耳球虫微线蛋白研究进展 | 第45-63页 |
1 鸡艾美耳球虫微线体蛋白概述 | 第45-48页 |
2 各种鸡艾美耳球虫微线体蛋白的研究进展 | 第48-55页 |
2.1 鸡艾美耳球虫微线蛋白1 | 第48-49页 |
2.2 鸡艾美耳球虫微线蛋白2 | 第49页 |
2.3 鸡艾美耳球虫微线蛋白3 | 第49-50页 |
2.4 鸡艾美耳球虫微线蛋白4 | 第50-52页 |
2.5 鸡艾美耳球虫微线蛋白5 | 第52-53页 |
2.6 鸡艾美耳球虫顶膜抗原1 | 第53-55页 |
参考文献 | 第55-63页 |
第二篇 试验研究 | 第63-217页 |
第三章 巨型艾美耳球虫子孢子空肠上皮细胞结合蛋白的鉴定 | 第63-91页 |
1 材料与方法 | 第64-70页 |
1.1 试验材料 | 第64-66页 |
1.2 试验方法 | 第66-70页 |
2 结果 | 第70-81页 |
2.1 巨型艾美耳球虫子孢子和鸡空肠上皮细胞的分离与纯化 | 第70-71页 |
2.2 巨型艾美耳球虫子孢子可溶性全蛋白及其抗血清的制备 | 第71-73页 |
2.3 Western blot方法分析巨型艾美耳球虫子孢子可溶性蛋白与鸡空肠上皮细胞的结合 | 第73-74页 |
2.4 LC-MS/MS分析和鉴定结合鸡空肠上皮细胞的E.maxima子孢子可溶性蛋白 | 第74-75页 |
2.5 生物信息学分析 | 第75-81页 |
3 讨论 | 第81-86页 |
参考文献 | 第86-91页 |
第四章 巨型艾美耳球虫微线蛋白3基因的克隆、表达及免疫保护性研究 | 第91-131页 |
1 材料与方法 | 第92-107页 |
1.1 试验材料 | 第92-93页 |
1.2 试验方法 | 第93-107页 |
2 结果 | 第107-124页 |
2.1 EmMIC3基因的5'和3'端扩增及序列生物信息学分析 | 第107-111页 |
2.2 重组表达质粒pET-32a(+)-MIC3的构建和鉴定 | 第111-112页 |
2.3 重组MIC3蛋白的诱导表达和纯化 | 第112-114页 |
2.4 大鼠抗MIC3多克隆抗体的效价及特异性检测 | 第114-116页 |
2.5 EmMIC3免疫保护试验结果 | 第116-118页 |
2.6 被动免疫试验结果 | 第118-121页 |
2.7 EmMIC3免疫诱导血清抗体水平检测 | 第121-122页 |
2.8 EmMIC3免疫诱导血清细胞因子水平检测 | 第122-124页 |
2.9 EmMIC3免疫诱导鸡脾脏淋巴细胞增殖水平检测 | 第124页 |
3 讨论 | 第124-127页 |
参考文献 | 第127-131页 |
第五章 巨型艾美耳球虫微线蛋白2基因的克隆、表达及免疫保护性研究 | 第131-155页 |
1 材料与方法 | 第132-136页 |
1.1 试验材料 | 第132-133页 |
1.2 试验方法 | 第133-136页 |
2 结果 | 第136-148页 |
2.1 EmMIC2基因PCR扩增结果 | 第136-137页 |
2.2 重组质粒pMD19-T-MIC2的构建和鉴定 | 第137-138页 |
2.3 重组质粒pET-32a(+)-MIC2的构建和鉴定 | 第138页 |
2.4 重组MIC2蛋白的表达和纯化 | 第138-140页 |
2.5 Western Blot分析 | 第140-141页 |
2.6 真核表达质粒pVAX1-MIC2的构建和鉴定 | 第141-142页 |
2.7 真核表达质粒pVAX1-MIC2在鸡体内表达的检测 | 第142-143页 |
2.8 EmMIC2免疫保护试验结果 | 第143-146页 |
2.9 EmMIC2免疫诱导血清抗体、细胞因子及脾脏淋巴细胞增殖水平 | 第146-148页 |
3 讨论 | 第148-151页 |
参考文献 | 第151-155页 |
第六章 巨型艾美耳球虫微线蛋白7基因的克隆、表达及免疫保护性研究 | 第155-179页 |
1 材料与方法 | 第156-158页 |
1.1 试验材料 | 第156页 |
1.2 试验方法 | 第156-158页 |
2 结果 | 第158-170页 |
2.1 EmMIC7基因PCR扩增结果 | 第158页 |
2.2 重组质粒pMD19-T-MIC7的构建和鉴定 | 第158-159页 |
2.3 重组质粒pET-32a(+)-MIC7的构建和鉴定 | 第159-160页 |
2.4 重组MIC7蛋白的表达和纯化 | 第160-162页 |
2.5 Western Blot分析 | 第162-163页 |
2.6 真核表达质粒pVAX1-MIC7的构建和鉴定 | 第163页 |
2.7 真核表达质粒pVAX1-MIC7在鸡体内表达的检测 | 第163-165页 |
2.8 EmMIC7免疫保护试验结果 | 第165-167页 |
2.9 EmMIC7免疫诱导血清抗体、细胞因子及脾脏淋巴细胞增殖水平 | 第167-170页 |
3 讨论 | 第170-174页 |
参考文献 | 第174-179页 |
第七章 巨型艾美耳球虫顶膜抗原1基因的克隆、表达及免疫保护性研究 | 第179-206页 |
1 材料与方法 | 第180-182页 |
1.1 试验材料 | 第180-181页 |
1.2 试验方法 | 第181-182页 |
2 结果 | 第182-199页 |
2.1 EmAMA1基因的克隆和序列分析 | 第182-185页 |
2.2 AMA1功能域的PCR扩增和克隆 | 第185-187页 |
2.3 重组质粒pET-32a(+)-AMA1FD的构建 | 第187页 |
2.4 重组AMA1FD蛋白的表达和纯化 | 第187-189页 |
2.5 Western Blot分析 | 第189-191页 |
2.6 DNA疫苗pVAX1-AMA1FD的构建和鉴定 | 第191-192页 |
2.7 DNA疫苗pVAX1-AMA1FD在鸡体内表达的检测 | 第192-193页 |
2.8 AMA1FD的免疫保护试验结果 | 第193-196页 |
2.9 AMA1FD免疫诱导血清抗体水平检测 | 第196-197页 |
2.10 EmAMA1FD免疫诱导血清细胞因子水平检测 | 第197-198页 |
2.11 EmAMA1FD免疫诱导鸡脾脏淋巴细胞增殖水平检测 | 第198-199页 |
3 讨论 | 第199-202页 |
参考文献 | 第202-206页 |
第八章 重组MIC蛋白与鸡肠上皮细胞的结合能力 | 第206-217页 |
1 材料与方法 | 第206-208页 |
1.1 试验材料 | 第206-207页 |
1.2 试验方法 | 第207-208页 |
2 结果 | 第208-212页 |
2.1 rEmMIC3与不同鸡肠段结合试验结果 | 第208-209页 |
2.2 rEmMIC2与不同鸡肠段结合试验结果 | 第209-210页 |
2.3 rEmMIC7蛋与不同鸡肠段结合试验结果 | 第210-211页 |
2.4 rEmAMA1FD蛋白与不同鸡肠段结合试验结果 | 第211-212页 |
3 讨论 | 第212-214页 |
参考文献 | 第214-217页 |
全文总结 | 第217-219页 |
致谢 | 第219-221页 |
博士期间论文发表情况 | 第221页 |