摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-10页 |
1 引言 | 第10-21页 |
·链霉菌及其抗生素在植物保护上的作用 | 第10-11页 |
·链霉菌遗传育种方法 | 第11-12页 |
·原生质体融合技术及其发展 | 第12-14页 |
·细胞融合仙台病毒(HVJ)诱导法 | 第13页 |
·细胞融合PEG(聚乙二醇)诱导法 | 第13页 |
·细胞融合电场诱导法 | 第13-14页 |
·细胞融合激光诱导法 | 第14页 |
·亲本菌株的选择性遗传标记 | 第14-17页 |
·营养缺陷型标记 | 第14-15页 |
·抗药性标记 | 第15页 |
·灭活标记 | 第15-16页 |
·荧光染色标记 | 第16页 |
·碳源利用标记 | 第16页 |
·特殊生理特征标记 | 第16-17页 |
·分子标记 | 第17页 |
·其他遗传标记 | 第17页 |
·融合子的鉴定 | 第17-18页 |
·原生质体融合技术在遗传育种中的应用 | 第18-19页 |
·优良菌种的选育 | 第18页 |
·提高菌株的代谢产物 | 第18页 |
·获得新代谢产物的菌株 | 第18-19页 |
·优化菌发酵特性 | 第19页 |
·改良菌种的遗传特性 | 第19页 |
·玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63 的研究进展和目的意义 | 第19-21页 |
2 材料和方法 | 第21-30页 |
·试验材料 | 第21-24页 |
·供试菌种 | 第21页 |
·培养基 | 第21-22页 |
·氨基酸 | 第22页 |
·工具酶 | 第22页 |
·缓冲液 | 第22-23页 |
·其它试剂 | 第23页 |
·仪器设备 | 第23-24页 |
·方法 | 第24-30页 |
·链霉菌孢子悬浮液的制备 | 第24页 |
·原生质体的制备 | 第24-25页 |
·原生质体的再生及去壁情况 | 第25页 |
·双亲原生质体灭活 | 第25页 |
·原生质体融合 | 第25-26页 |
·融合子抑菌活性的测定 | 第26页 |
·融合子的遗传稳定性试验 | 第26页 |
·包埋块的制备及包埋块DNA 的酶切 | 第26-27页 |
·CTAB 法提取基因组DNA | 第27-28页 |
·限制性内切酶酶切基因组DNA | 第28页 |
·融合子及双亲可溶性总蛋白 SDS-PAGE 电泳 | 第28页 |
·融合子的形态特征观察 | 第28页 |
·摇瓶发酵及粗提抗生素的抑菌活性测定 | 第28-29页 |
·抑菌活性物质的制备及 TLC 分析 | 第29页 |
·融合子抗生素粗提物的 HPLC 分析 | 第29-30页 |
3 结果与分析 | 第30-42页 |
·原生质体制备质量 | 第30-31页 |
·原生质体紫外灭活和热灭活 | 第31页 |
·PEG 介导的原生质体融合 | 第31-33页 |
·PEG 的浓度及分子量的优化 | 第31-32页 |
·产抗生素融合子的筛选 | 第32页 |
·抗生素高产融合子的复筛 | 第32-33页 |
·电击融合 | 第33-34页 |
·融合子的培养特征 | 第34-35页 |
·融合子的遗传稳定性试验 | 第35-37页 |
·融合子包埋块DNA 的制备及酶切验证 | 第37页 |
·融合子基因组DNA 的酶切验证 | 第37-38页 |
·融合子及双亲DNA 的提取 | 第37-38页 |
·融合子及双亲DNA 的酶切验证 | 第38页 |
·融合子及双亲可溶性总蛋白的SDS-PAGE 图谱 | 第38-39页 |
·摇瓶发酵及粗提抗生素的抑菌活性测定 | 第39-40页 |
·粗提抗生素的TLC 分析 | 第40页 |
·粗提抗生素的HPLC 分析 | 第40-42页 |
4 讨论 | 第42-45页 |
·灭活原生质体融合技术 | 第42页 |
·PEG 介导的原生质体融合 | 第42-43页 |
·电击融合的应用 | 第43-44页 |
·下一步工作 | 第44-45页 |
5 结论 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-50页 |
在读期间发表的论文 | 第50-51页 |
作者简介 | 第51-53页 |
致谢 | 第53-54页 |