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苏云金杆菌cry7Ab8基因的克隆表达及工程菌构建

摘要第1-5页
Abstract第5-9页
1 前言第9-17页
   ·苏云金杆菌概述第9-10页
   ·杀虫晶体蛋白(Insecticidal Crystal Proteins, ICPs)第10-16页
     ·苏云金杆菌的杀虫毒素第10页
     ·苏云金杆菌cry 基因的分类第10-12页
     ·苏云金杆菌cry 基因的鉴定第12页
     ·苏云金杆菌cry 基因的定位第12-13页
     ·苏云金杆菌cry 基因的克隆第13页
     ·杀虫晶体蛋白的结构功能第13-15页
     ·杀虫晶体蛋白的作用机理第15-16页
   ·本研究的目的与意义第16-17页
2 材料与方法第17-29页
   ·材料第17-20页
     ·菌株与质粒第17页
     ·供试昆虫第17页
     ·培养基第17-18页
     ·溶液的配制第18-19页
     ·常用的仪器设备第19-20页
   ·方法第20-29页
     ·改进的温度筛选法分离土壤中 Bt 菌株第20页
     ·光学显微镜观察伴胞晶体第20页
     ·大肠杆菌质粒DNA 的提取第20-21页
     ·苏云金杆菌质粒DNA 的提取第21页
     ·cry7 基因的鉴定第21-22页
     ·cry7Ab 基因的克隆第22-24页
     ·cry7Ab8 序列测定与分析第24页
     ·Cry7Ab8 蛋白序列分析第24-25页
     ·cry7Ab8 基因的诱导表达第25页
     ·Bt 工程菌的构建第25-27页
     ·工程菌晶体观察及晶体蛋白提取第27页
     ·晶体蛋白生物活性测定第27-28页
     ·Cry7Ab8 蛋白缺失DominⅢ的研究第28-29页
3 结果与分析第29-40页
   ·菌株的分离与基因型的鉴定第29页
     ·改进的温度筛选法分离结果第29页
     ·Bt 分离株cry 基因的鉴定第29页
   ·cry7Ab 全长基因的扩增与克隆第29-30页
   ·cry7Ab8 基因的序列测定与分析第30页
   ·Cry7Ab8 氨基酸序列特性分析第30-33页
   ·cry7Ab8 基因的诱导表达第33-34页
   ·Bt 工程菌的分子检测第34页
   ·Bt 工程菌的晶体观察第34-35页
   ·cry7Ab8 基因在 HD73-(cry-)中的表达第35页
   ·工程菌BioHD7Ab8 的生长特征第35页
   ·Cry7Ab8 蛋白生物活性测定第35-36页
   ·Cry7Ab8 蛋白缺失DominⅢ的研究第36-40页
     ·Δcry7Ab8 基因鉴定与克隆第36页
     ·Δcry7Ab8 基因的序列分析第36-38页
     ·Δcry7Ab8 基因的诱导表达第38-39页
     ·Bt 工程菌的构建及SDS-PAGE 分析第39页
     ·ΔCry7Ab8 蛋白生物活性测定第39-40页
4 讨论第40-42页
5 结论第42-43页
参考文献第43-48页
附录1 缩略词第48-50页
附录2 GenBank 登记资料第50-54页
在读期间发表的论文第54-55页
作者简介第55-56页
致谢第56-57页

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