中文摘要 | 第6-8页 |
英文摘要 | 第8页 |
第一章 文献综述 | 第10-49页 |
1 大麦黄矮病毒概述 | 第10-12页 |
1.1 BYDV的传播 | 第11页 |
1.2 BYDV的性质与形态结构 | 第11-12页 |
1.3 我国BYDV主要株系及其与国外株系的相关性 | 第12页 |
2 BYDV的分子生物学研究 | 第12-28页 |
2.1 大麦矮病毒基因组结构 | 第12-14页 |
2.2 卫星RNA | 第14-15页 |
2.3 大麦黄矮病毒基因产物及功能 | 第15-21页 |
2.4 BYDV基因表达的机制 | 第21-28页 |
3 小麦抗黄症病毒基因工程研究进展 | 第28-34页 |
3.1 小麦抗黄症病毒人工抗性基因的运用 | 第29-33页 |
3.2 植物源基因介导的抗性 | 第33-34页 |
4 小麦基因转化技术研究进展 | 第34-39页 |
4.1 基因枪法 | 第36-37页 |
4.2 花粉管道法 | 第37页 |
4.3 农杆菌法 | 第37-38页 |
4.4 其它转化方法 | 第38-39页 |
5 小麦抗病毒转基因研究策略的展望 | 第39-43页 |
6 本研究的目的意义和可行性分析 | 第43-47页 |
7 主要研究内容 | 第47-49页 |
第二章 大麦黄矮病毒GPV株系ORF5基因的克隆及序列分析 | 第49-88页 |
1 材料与方法 | 第50-57页 |
2 结果与分析 | 第57-84页 |
2.1 RT-PCR扩增ORF5 | 第57-58页 |
2.2 基因序列的测定 | 第58-64页 |
2.3 ORF5基因片段的验证 | 第64-66页 |
2.4 ORF5基因的比较分析 | 第66-74页 |
2.5 ORF5基因产物的比较分析 | 第74-84页 |
3 小结与讨论 | 第84-88页 |
第三章 GPV ORF5基因原核表达载体的构建及诱导表达 | 第88-103页 |
1 材料与方法 | 第88-97页 |
2 结果与分析 | 第97-100页 |
2.1 重组pGEM-3Z质粒的构建 | 第97-98页 |
2.2 重组原核表达载体的构建 | 第98-99页 |
2.3 GPV ORF5基因的非融合表达 | 第99-100页 |
2.4 Western blotting | 第100页 |
3 小结与讨论 | 第100-103页 |
第四章 GPV ORF5基因的植物表达载体构建及转化 | 第103-110页 |
1 材料与方法 | 第103-107页 |
2 结果分析 | 第107-109页 |
2.1 pPPI16质粒的构建 | 第107-108页 |
2.2 花粉管转化小麦 | 第108-109页 |
3 小结与讨论 | 第109-110页 |
第五章 转基因小麦的检测 | 第110-119页 |
1 材料与方法 | 第110-115页 |
2 结果分析 | 第115-117页 |
2.1 转化材料的播种及发芽 | 第115页 |
2.2 转化小麦的PCR检测 | 第115-116页 |
2.3 转化小麦的PCR-Southern检测 | 第116页 |
2.4 转化小麦的Southern检测 | 第116-117页 |
3 小结讨论 | 第117-119页 |
第六章 结论 | 第119-122页 |
参考文献 | 第122-135页 |
致谢 | 第135页 |