第一篇 文献综述 | 第13-65页 |
第一章 软骨组织工程研究 | 第13-39页 |
一、组织工程学的概念 | 第13-20页 |
(一)、组织工程学基本原理 | 第16页 |
(二)、组织再生 | 第16-18页 |
(三)、器官替代物 | 第18-20页 |
二、软骨组织工程 | 第20-35页 |
(一)、软骨组织工程的种子细胞 | 第21-28页 |
1. 自体细胞 | 第21-22页 |
2. 同种异体细胞 | 第22-26页 |
3. 骨随间质干细胞(MSCs) | 第26-27页 |
4. 胚胎干细胞(ES) | 第27-28页 |
(二)、生物材料载体 | 第28-31页 |
1. 人工化学合成降解材料 | 第28-29页 |
2. 天然生物材料 | 第29-31页 |
(三)、细胞因子的作用 | 第31-33页 |
(四)、组织工程人工软骨的构建与细胞培养 | 第33-34页 |
(五)、组织工程软骨的生物学评价 | 第34-35页 |
三、关节软骨损伤的修复 | 第35-37页 |
(一)、软骨移植修复 | 第35-36页 |
(二)、软骨细胞移植修复 | 第36页 |
1. 自体软骨细胞移植修复 | 第36页 |
2. 异体软骨细胞移植修复 | 第36页 |
(三)、组织工程技术修复软骨缺损 | 第36-37页 |
(四)、基因治疗与软骨缺损修复 | 第37页 |
四、组织工程软骨的临床应用 | 第37-39页 |
(一)、自体软骨细胞移植加上骨膜或筋膜覆盖 | 第37-38页 |
(二)、胶原复合自体软骨细胞移植(MCI) | 第38页 |
(三)、透明脂酸钠复合自体软骨细胞移植(Hyalograft C) | 第38-39页 |
第二章 BMP 在软骨损伤愈合中的应用 | 第39-65页 |
一、基因治疗的概念 | 第39-41页 |
二、基因治疗的策略 | 第41-49页 |
(一)、部位和时间 | 第41-42页 |
(二)、基因转移方法 | 第42页 |
(三)、载体 | 第42-49页 |
1. 病毒载体 | 第43-48页 |
2. 非病毒载体 | 第48-49页 |
三、BMP 的骨及软骨诱导作用 | 第49-59页 |
(一)、BMPs 的种类和结构特征 | 第49-50页 |
1.B MPs 的种类 | 第49-50页 |
2.B MPs 的结构特征 | 第50页 |
(二)、BMPs 的生物活性及其骨形成的生理作用 | 第50-54页 |
(三)、BMPs 的作用机制 | 第54-55页 |
(四)、BMPs 受体和信号转导机制 | 第55-57页 |
1.B MPsⅠ、Ⅱ型受体的种类 | 第55-56页 |
2.B MPs 受体的生物学特征 | 第56页 |
3.B MPs 受体的信号传导机制 | 第56-57页 |
(五) 、BMPs 生物活性的影响因素 | 第57-59页 |
1.B MPs 的浓度 | 第57-58页 |
2. 细胞外基质 | 第58页 |
3. 激素和生长因子 | 第58-59页 |
四、BMPs 的分离与提纯 | 第59-60页 |
五、BMPs 基因治疗的技术路线和研究进展 | 第60-62页 |
(一) 、BMPs 基因治疗的技术路线 | 第60-61页 |
(二) 、BMPs 基因治疗的研究进展 | 第61-62页 |
1. Ex vivo 基因治疗 | 第61-62页 |
2. In vivo 基因治疗 | 第62页 |
六、BMPs 的临床应用 | 第62-63页 |
七、BMPs 基因治疗展望 | 第63-65页 |
第二篇 重组pcDNA3.1-BMP7质粒的构建及其在软骨细胞中的表达 | 第65-140页 |
第一章 重组pcDNA3.1-BMP7 真核表达载体质粒的构建与鉴定 | 第66-105页 |
材料与方法 | 第67-80页 |
1. 材料 | 第67-69页 |
2. 实验方法 | 第69-80页 |
实验结果 | 第80-86页 |
1. 家兔关节软骨细胞的分离与培养 | 第80-81页 |
2. 总 RNA 的提取及 RT-PCR | 第81页 |
3. T-BMP7 克隆载体的构建及鉴定 | 第81-83页 |
4. pBlue-BMP7 载体质粒的构建及鉴定 | 第83-84页 |
5. pcDNA3.1-BMP7 载体质粒的构建与鉴定 | 第84-86页 |
讨论 | 第86-105页 |
1. 家兔膝关节软骨细胞的分离与培养 | 第86-87页 |
2. 软骨细胞中 BMP-7 基因全长序列的克隆 | 第87-89页 |
3. 重组pcDNA3.1-BMP7 真核表达载体质粒的构建与鉴定 | 第89-105页 |
第二章 重组pcDNA3.1-BMP7质粒转染兔关节软骨细胞及其在该细胞中的表达 | 第105-123页 |
材料与方法 | 第106-113页 |
1. 材料 | 第106-108页 |
2. 实验方法 | 第108-113页 |
实验结果 | 第113-116页 |
1. 脂质体介导pcDNA3.1-BMP7 质粒转染家兔关节软骨细胞 | 第113-115页 |
2. 重组pcDNA3.1-BMP7 质粒在软骨细胞中的表达 | 第115-116页 |
讨论 | 第116-123页 |
1. 目的基因 | 第117-118页 |
2. 载体 | 第118-120页 |
3. 受体细胞 | 第120页 |
4. 软骨细胞的转染与表达 | 第120-123页 |
结论 | 第123-140页 |
第三编 应用转 BMP7 基因软骨细胞构建组织工程软骨及其对兔膝关节软骨缺损的修复 | 第140-193页 |
第一章 应用转BMP7基因软骨细胞构建组织工程软骨 | 第140-173页 |
材料与方法 | 第141-148页 |
1. 材料 | 第141-143页 |
2. 实验方法 | 第143-148页 |
实验结果 | 第148-151页 |
1. 组织工程软骨培养物倒置显微镜观察 | 第148-149页 |
2. 组织工程软骨培养物组织学观察 | 第149页 |
3. 组织工程软骨培养物超微结构观察 | 第149-150页 |
4. 生物化学分析 | 第150-151页 |
5. 转基因组织工程软骨培养物 BMP7 的表达 | 第151页 |
讨论 | 第151-173页 |
1. 转基因组织工程软骨 | 第151-155页 |
2. 组织工程软骨的组织学、生物化学及超微结构 | 第155页 |
3. 组织工程软骨培养物 BMP7 基因的表达 | 第155-173页 |
第二章 转BMP7基因组织工程软骨修复兔膝关节软骨缺损 | 第173-183页 |
材料与方法 | 第174-177页 |
1. 材料 | 第174页 |
2. 实验方法 | 第174-177页 |
实验结果 | 第177-179页 |
1. 转BMP7 基因组织工程软骨对家兔膝关节缺损移植修复 | 第177-178页 |
2. BMP7 基因在兔膝关节软骨缺损移植修复中的表达 | 第178-179页 |
讨论 | 第179-183页 |
1. 组织工程软骨的移植时期 | 第179-181页 |
2. 转BMP7 基因组织工程软骨的移植部位及缺损大小的选择 | 第181页 |
3. 转BMP7 基因组织工程软骨对关节软骨缺损的移植修复 | 第181-183页 |
结论 | 第183-193页 |
参考文献 | 第193-206页 |
发表论文 | 第206-208页 |
致谢 | 第208-209页 |
中文摘要 | 第209-216页 |
英文摘要 | 第216页 |