摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
1. 引言 | 第11-17页 |
1.1 棉花黄萎病的危害及防治 | 第11页 |
1.2 植物抗性与相关生理指标的关系 | 第11-12页 |
1.3 植物抗病的分子机制 | 第12-13页 |
1.4 PR蛋白的分类和研究进展 | 第13-14页 |
1.5 PR-10家族的特性 | 第14-15页 |
1.6 病毒诱导的基因沉默技术(VIGS)及其在棉花上的应用 | 第15-16页 |
1.7 本研究的目的和意义 | 第16-17页 |
2 材料与方法 | 第17-26页 |
2.1 试验材料 | 第17-18页 |
2.1.1 植物材料 | 第17页 |
2.1.2 菌株和载体 | 第17页 |
2.1.3 酶和各种生化试剂 | 第17页 |
2.1.4 引物 | 第17-18页 |
2.2 试验方法 | 第18-26页 |
2.2.1 基因序列的获取 | 第18页 |
2.2.2 棉苗种植与处理 | 第18-19页 |
2.2.3 RNA的提取和c DNA的合成 | 第19页 |
2.2.4 实时荧光定量PCR | 第19-20页 |
2.2.5 VIGS载体构建 | 第20-22页 |
2.2.6 棉花幼苗的种植 | 第22页 |
2.2.7 VIGS注射 | 第22-23页 |
2.2.8 干涉植株抗病性鉴定和相关生理生化指标测定 | 第23-26页 |
3 结果与分析 | 第26-43页 |
3.1 序列比对与筛选 | 第26-29页 |
3.1.1 EST序列的筛选与比对 | 第26-27页 |
3.1.2 PR蛋白序列分析 | 第27-29页 |
3.2 棉花RNA提取 | 第29页 |
3.3 基于转录组测序结果分析PR蛋白的表达 | 第29-31页 |
3.4 利用Real-time PCR分析PR蛋白的表达 | 第31-35页 |
3.4.1 黄萎病菌侵染下的PR蛋白表达 | 第31-32页 |
3.4.2 激素处理后PR蛋白的表达特性分析 | 第32页 |
3.4.3 PR蛋白的组织特异性表达 | 第32-35页 |
3.5 利用VIGS技术对PR蛋白基因进行抗病功能研究 | 第35-43页 |
3.5.1 VIGS载体构建 | 第35-36页 |
3.5.2 PR10沉默效率检测和抗病性鉴定 | 第36-40页 |
3.5.3 PR17沉默效率检测和抗病性鉴定 | 第40-43页 |
4 讨论 | 第43-46页 |
4.1 关于信号分子对PR蛋白基因的诱导 | 第43-44页 |
4.2 关于PR10沉默对棉花抗性的影响 | 第44页 |
4.3 PR17功能预测 | 第44-46页 |
5 结论 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-55页 |
附录A 试验中所用载体结构示意图 | 第55-56页 |
在读期间发表的学术论文 | 第56-58页 |
作者简历 | 第58-59页 |
致谢 | 第59-60页 |