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牛乳中β-酪蛋白构象性表位定位研究

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-9页
目录第9-14页
第1章 引言第14-26页
   ·牛乳过敏第14-17页
     ·牛乳过敏机理第15-16页
     ·牛乳中的主要过敏原第16页
     ·牛乳过敏的危害第16-17页
   ·牛乳过敏原的安全管理第17-20页
     ·牛乳过敏的检测第17-19页
       ·血液检测第17-18页
       ·血液检测第18页
       ·食物激发试验第18-19页
     ·牛乳过敏原的管理第19-20页
       ·IgE介导的牛乳过敏的管理第19页
       ·非IgE介导的牛乳过敏的管理第19页
       ·针对不同过敏症状的牛乳过敏的管理第19页
       ·食物避免与营养的管理第19-20页
       ·食物过敏原标签管理第20页
   ·牛乳中的酪蛋白第20-23页
     ·酪蛋白胶束第20-21页
     ·牛奶酪蛋白的结构与理化性质第21-23页
       ·αs1-酪蛋白第21-22页
       ·α_(s2)-酪蛋白第22页
       ·β-酪蛋白第22-23页
       ·κ-酪蛋白第23页
   ·β-酪蛋白的构象性表位第23-24页
   ·研究内容及意义第24-26页
第2章 牛乳中β-酪蛋白的分离纯化第26-35页
   ·材料与设备第26-27页
     ·试剂与材料第26页
     ·设备第26-27页
     ·溶液配制第27页
   ·实验方法第27-30页
     ·鲜牛奶脱脂第27页
     ·等电点沉淀酪蛋白第27页
     ·β-酪蛋白预处理第27-28页
     ·β-酪蛋白分离纯化第28页
     ·蛋白质及其纯度鉴定第28-29页
       ·SDS-PAGE鉴定第28-29页
       ·IEF-PAGE鉴定第29页
     ·蛋白质浓度鉴定第29-30页
   ·实验结果第30-33页
     ·β-酪蛋白的分离纯化第30-31页
     ·蛋白质及其纯度鉴定第31-32页
     ·浓度鉴定第32-33页
   ·讨论第33-34页
     ·β-酪蛋白的离子交换层析条件选择第33页
     ·蛋白质鉴定和浓度鉴定第33-34页
   ·小结第34-35页
第3章 抗牛乳β-酪蛋白多克隆抗体的制备及亲和纯化第35-48页
   ·材料与设备第35-37页
     ·试剂第35页
     ·仪器与耗材第35-36页
     ·溶液配制第36-37页
   ·实验方法第37-40页
     ·多克隆抗体的制备第37页
     ·抗体滴度测定的方正滴定第37页
     ·间接ELISA测定抗体效价第37-38页
     ·抗血清的制备第38页
     ·亲和层析纯化特异性兔IgG第38-40页
       ·血清的预处理第38页
       ·亲和层析柱的制备第38-39页
       ·亲和纯化第39页
       ·抗体SDS-PAGE纯度鉴定第39页
       ·间接ELISA测定抗体效价第39-40页
   ·实验结果第40-44页
     ·ELISA方法的条件确立及其对效价变化的监测第40-41页
     ·亲和层析纯化特异性IgG第41-44页
       ·血清的获取第41页
       ·偶联效果的检测第41页
       ·非特异性洗脱过程中蛋白质含量监测第41-42页
       ·特异性洗脱过程中蛋白质含量监测第42-43页
       ·浓缩除盐第43页
       ·纯化前后抗体效价的比较第43页
       ·纯化后样品的SDS-PAGE电泳图第43-44页
   ·讨论第44-47页
     ·佐剂的选择第44-45页
     ·试验动物的选择第45页
     ·多克隆抗体的制备和储存第45-46页
     ·多克隆抗体的亲和纯化第46-47页
       ·配基及载体的选择第46页
       ·层析条件的选择第46-47页
   ·本章小结第47-48页
第4章 β-酪蛋白结构模型的构建第48-58页
   ·实验材料第48页
   ·实验原理和方法第48-52页
     ·蛋白质结构建模第48-51页
       ·同源建模第48-49页
       ·折叠识别法第49-50页
       ·从头预测法第50-51页
     ·模型优化与选择第51页
     ·模型检验第51-52页
   ·结果第52-56页
     ·同源建模结果第52-54页
     ·折叠识别法建模结果第54页
     ·从头预测法建模结果第54-55页
     ·模型评估及β-酪蛋白最优模型的确立第55-56页
   ·讨论第56-57页
   ·本章小结第57-58页
第5章 β-酪蛋白构象性表位的定位第58-75页
   ·材料与设备第58-60页
     ·试剂与材料第58页
     ·仪器第58-59页
     ·试剂配方第59-60页
   ·实验方法第60-63页
     ·噬菌体展示技术对IgG表位的筛选第60-61页
     ·构象性表位参数的确立第61-62页
       ·表位数据集的获取第61-62页
       ·表位性质的统计学分析第62页
     ·构象性表位的定位第62-63页
   ·实验结果第63-72页
     ·噬菌体展示技术筛选表位模拟肽第63页
     ·表位信息数据库的获取第63-65页
     ·表位性质的统计学分析结果第65-69页
       ·表位氨基酸数目第65-66页
       ·表位氨基酸类型第66-67页
       ·表位大小第67页
       ·表位间隔氨基酸第67-68页
       ·表位氨基酸所在二级结构第68-69页
     ·β-酪蛋白IgG表位的定位第69-72页
   ·讨论第72-73页
   ·本章小结第73-75页
第6章 研究结论与展望第75-77页
   ·结论第75-76页
   ·展望第76-77页
致谢第77-78页
参考文献第78-81页

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