| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 第1章 绪论 | 第10-19页 |
| ·志贺氏菌属的概述 | 第10页 |
| ·志贺氏菌属与大肠杆菌的进化关系 | 第10-11页 |
| ·志贺氏菌感染细胞的过程 | 第11-12页 |
| ·志贺氏菌疫苗的研究进展 | 第12-14页 |
| ·灭活的完整病原体 | 第12页 |
| ·减毒活疫苗 | 第12-13页 |
| ·亚单位疫苗 | 第13-14页 |
| ·膜蛋白的治疗靶点的研究进展 | 第14-15页 |
| ·研究膜蛋白的几种双向电泳技术的比较 | 第15-16页 |
| ·本课题的研究意义及研究现状 | 第16-17页 |
| ·本研究的目的和技术路线 | 第17-19页 |
| 第2章 利用BN-PAGE/SDS-PAGE分离和鉴定志贺氏菌5a M90T毒力相关膜复合物 | 第19-28页 |
| ·材料与方法 | 第19-24页 |
| ·材料 | 第19-21页 |
| ·方法 | 第21-24页 |
| ·结果 | 第24-26页 |
| ·样品的制备 | 第24页 |
| ·BN-PAGE分离膜复合物 | 第24-25页 |
| ·SDS PAGE分离M90T-290膜复合物和质谱检测结果 | 第25-26页 |
| ·讨论 | 第26-28页 |
| 第3章 利用GST标签亲和纯化技术验证M90T-290复合物的亚基组成 | 第28-39页 |
| ·材料与方法 | 第28-33页 |
| ·材料 | 第28-30页 |
| ·方法 | 第30-33页 |
| ·结果 | 第33-38页 |
| ·基因phoN2片段的扩增 | 第33-34页 |
| ·DH-PGEX-apy的菌落PCR鉴定 | 第34-35页 |
| ·M90T-PGEX-apy的菌落PCR鉴定结果 | 第35页 |
| ·BN-PAGE电泳分离GST磁珠结合M90T-PGEX-apy诱导菌膜复合物 | 第35-36页 |
| ·利用Western blot检验GST-apyrase融合蛋白 | 第36-37页 |
| ·利用SDS-PAGE分离M90T-PGEX-apy诱导菌蛋白 | 第37-38页 |
| ·讨论 | 第38-39页 |
| 第4章 M90T膜蛋白apyrase的基因克隆、原核表达及纯化 | 第39-48页 |
| ·材料与方法 | 第39-42页 |
| ·材料 | 第39-41页 |
| ·方法 | 第41-42页 |
| ·结果 | 第42-46页 |
| ·phoN2基因片段的扩增 | 第42-43页 |
| ·DH-PET-apy菌落PCR鉴定 | 第43页 |
| ·利用SDS-PAGE和Western blot检测融合蛋白在BL-PET-apy中的表达量 | 第43-44页 |
| ·纯化His-apyrase和Western blot检测纯化产物 | 第44-46页 |
| ·讨论 | 第46-48页 |
| 第5章 福氏5a M90T的phoN2基因缺失突变体的构建 | 第48-55页 |
| ·材料与方法 | 第49-52页 |
| ·材料 | 第49-50页 |
| ·方法 | 第50-52页 |
| ·结果 | 第52-54页 |
| ·phoN2上下游伺源臂的扩增 | 第52页 |
| ·phoN2上游同源臂菌落PCR鉴定 | 第52-53页 |
| ·phoN2上下游同源臂菌落PCR鉴定 | 第53页 |
| ·将打靶片段电转入PKOBEG菌感受态 | 第53-54页 |
| ·讨论 | 第54-55页 |
| 第6章 结论与展望 | 第55-57页 |
| ·结论 | 第55-56页 |
| ·展望 | 第56-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-62页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第62页 |
