摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第一章 文献综述 | 第10-24页 |
1 刺吸电位技术(EPG)的研究与应用 | 第10-17页 |
1.1 EPG技术发展历史 | 第10页 |
1.2 EPG技术原理 | 第10-11页 |
1.3 EPG技术波形认定 | 第11-15页 |
1.4 EPG技术的应用 | 第15-17页 |
1.4.1 昆虫对寄主植物的选择性研究 | 第15-16页 |
1.4.2 植物抗虫性机制研究 | 第16页 |
1.4.3 拒食因子和农药对昆虫取食行为的影响 | 第16页 |
1.4.4 昆虫传播植物病毒的行为机制 | 第16-17页 |
2 介体昆虫的唾液腺与植物病毒的传播 | 第17-20页 |
2.1 介体昆虫传播植物病毒的类型 | 第17-19页 |
2.2 介体昆虫的唾液腺与植物病毒传播 | 第19-20页 |
3 灰飞虱传播水稻条纹病毒研究进展 | 第20-23页 |
3.1 灰飞虱传递水稻条纹病毒方式 | 第20-21页 |
3.2 灰飞虱传播水稻条纹病毒最新研究进展 | 第21-23页 |
3.2.1 RSV水平传播机制 | 第21-22页 |
3.2.2 RSV经卵传递机制 | 第22页 |
3.2.3 灰飞虱与RSV互作蛋白的筛选 | 第22-23页 |
4 本研究的目的及意义 | 第23-24页 |
第二章 带毒与不带毒灰飞虱唾液腺差异表达蛋白VDAC的克隆与表达 | 第24-40页 |
1 材料与方法 | 第24-34页 |
1.1 材料 | 第24-25页 |
1.1.1 供试昆虫 | 第24页 |
1.1.2 供试植株 | 第24-25页 |
1.1.3 主要试剂 | 第25页 |
1.2 实验方法 | 第25-34页 |
1.2.1 带毒和不带毒灰飞虱种群筛选 | 第25-26页 |
1.2.2 总RNA提取 | 第26页 |
1.2.3 cDNA第一链的合成 | 第26-27页 |
1.2.4 中间片段扩增 | 第27-30页 |
1.2.4.1 中间片段PCR扩增 | 第27-28页 |
1.2.4.2 目的基因片段的回收纯化 | 第28页 |
1.2.4.3 目的片段与载体的连接 | 第28-29页 |
1.2.4.4 连接产物的转化 | 第29页 |
1.2.4.5 菌落PCR鉴定阳性克隆 | 第29-30页 |
1.2.4.6 测序 | 第30页 |
1.2.5 cDNA 5’端快速扩增 | 第30-32页 |
1.2.5.1 反应原理 | 第30-31页 |
1.2.5.2 反转录反应 | 第31页 |
1.2.5.3 PCR扩增 | 第31页 |
1.2.5.4 5 ’RACE产物克隆测序 | 第31-32页 |
1.2.6 cDNA3’端快速扩增 | 第32-33页 |
1.2.6.1 反应原理 | 第32页 |
1.2.6.2 反转录反应 | 第32-33页 |
1.2.6.3 PCR扩增 | 第33页 |
1.2.6.4 3’RACE产物克隆测序 | 第33页 |
1.2.7 生物信息学分析 | 第33页 |
1.2.8 LsVDAC实时定量分析 | 第33-34页 |
1.2.9 数据处理 | 第34页 |
2 结果与分析 | 第34-39页 |
2.1 灰飞虱电压依赖型阴离子通道蛋白基因LsVDAC | 第34-39页 |
2.1.1 LsVDAC中间片段克隆 | 第34-35页 |
2.1.2 LsVDAC基因RACE | 第35-38页 |
2.1.3 LsVDAC基因序列分析与系统发育分析 | 第38页 |
2.1.4 LsVDAC的相对表达量 | 第38-39页 |
3 讨论 | 第39-40页 |
第三章 带毒与不带毒灰飞虱唾液腺差异表达蛋白对介体取食行为和传毒率的影响 | 第40-54页 |
1 材料与方法 | 第41-47页 |
1.1 材料 | 第41页 |
1.1.1 供试昆虫 | 第41页 |
1.1.2 供试植株 | 第41页 |
1.1.3 主要试剂 | 第41页 |
1.2 实验方法 | 第41-47页 |
1.2.1 dsRNA的合成 | 第41-45页 |
1.2.1.1 总RNA提取 | 第41页 |
1.2.1.2 cDNA第一链的合成 | 第41页 |
1.2.1.3 获取带目标片段的菌液 | 第41-43页 |
1.2.1.4 质粒的提取 | 第43-44页 |
1.2.1.5 正义链、反义链ssRNA的合成 | 第44页 |
1.2.1.6 合成dsRNA | 第44-45页 |
1.2.2 对灰飞虱的RNA干扰实验 | 第45-47页 |
1.2.2.1 饲喂法干扰灰飞虱 | 第45页 |
1.2.2.2 沉默效应检测 | 第45-47页 |
1.2.3 干扰后灰飞虱的取食行为和传毒率研究 | 第47页 |
1.2.3.1 取食行为研究方法 | 第47页 |
1.2.3.2 传毒率测定 | 第47页 |
2 结果与分析 | 第47-53页 |
2.1 喂食dsRNA对灰飞虱取食行为的影响 | 第47-51页 |
2.2 喂食dsRNA对灰飞虱传毒率的影响 | 第51-53页 |
3 讨论 | 第53-54页 |
第四章 全文小结 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-61页 |
致谢 | 第61页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第61-62页 |