中文摘要 | 第8-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
1 前言 | 第11-19页 |
1.1 果蝇翅发育的研究进展 | 第11-14页 |
1.1.1 果蝇翅原基模型简述 | 第11页 |
1.1.2 果蝇翅原基形态发生的调控机制 | 第11-13页 |
1.1.2.1 Wg信号对翅原基发育的调控 | 第11-12页 |
1.1.2.2 Hh信号对翅原基发育的调控 | 第12-13页 |
1.1.3 调控因子在翅原基发育过程中的作用 | 第13-14页 |
1.2 mid基因的功能研究 | 第14-16页 |
1.2.1 T-box家族简介 | 第14页 |
1.2.2 mid基因的鉴定 | 第14-15页 |
1.2.3 mid基因的功能研究 | 第15-16页 |
1.2.3.1 mid基因在心脏发育中的功能研究 | 第15页 |
1.2.3.2 mid基因在眼发育中的功能研究 | 第15页 |
1.2.3.3 mid基因在腿原基发育中的功能研究 | 第15-16页 |
1.2.3.4 mid基因在神经系统发育中的功能研究 | 第16页 |
1.3 本课题研究的目的与意义 | 第16-17页 |
1.4 本课题的研究思路 | 第17-19页 |
2 材料与方法 | 第19-33页 |
2.1 实验材料 | 第19-22页 |
2.1.1 果蝇种系及培养条件 | 第19页 |
2.1.2 抗体 | 第19-20页 |
2.1.3 生化试剂及试剂盒 | 第20-21页 |
2.1.4 主要仪器设备 | 第21页 |
2.1.5 信息检索网站及相关分析软件 | 第21-22页 |
2.1.6 qRT-PCR引物 | 第22页 |
2.2 实验方法 | 第22-33页 |
2.2.1 相关试剂的配制 | 第22-23页 |
2.2.2 果蝇培养基的制备 | 第23-24页 |
2.2.3 果蝇基因重组和染色体置换 | 第24-25页 |
2.2.4 利用UAS/GAL4系统进行果蝇杂交 | 第25-26页 |
2.2.5 突变体克隆及Flp-out克隆的诱导 | 第26页 |
2.2.6 果蝇翅原基抗体染色 | 第26-27页 |
2.2.7 利用TSA试剂盒进行抗体染色 | 第27-28页 |
2.2.8 荧光显微镜及激光共聚焦显微镜观察 | 第28页 |
2.2.9 Microarray 实验 | 第28页 |
2.2.10 果蝇翅原基总RNA的提取 | 第28-30页 |
2.2.11 检测提取的RNA溶液的质量 | 第30-31页 |
2.2.11.1 紫外分光光度法测定 | 第30-31页 |
2.2.11.2 琼脂糖凝胶电泳测定 | 第31页 |
2.2.12 反转录合成c DNA | 第31-32页 |
2.2.13 qRT-PCR反应体系及条件 | 第32-33页 |
3 结果与分析 | 第33-49页 |
3.1 Mid在翅原基的表达模式 | 第33-34页 |
3.2 Mid在翅发育过程中起到重要的作用 | 第34-36页 |
3.3 Mid下游潜在靶基因的鉴定 | 第36-37页 |
3.4 Mid抑制wg基因的表达 | 第37-42页 |
3.4.1 Mid与Wg在DP层共表达 | 第37页 |
3.4.2 Mid功能缺失激活wg的表达 | 第37-40页 |
3.4.3 Mid功能获得会抑制wg的表达 | 第40页 |
3.4.4 mid和wg基因的遗传学相互作用 | 第40-42页 |
3.5 Mid负调控wg下游基因arm的表达 | 第42-44页 |
3.6 Mid负调控wg下游基因DE-Cad的表达 | 第44页 |
3.7 Mid抑制hh基因的表达 | 第44-46页 |
3.7.1 mid和hh基因的遗传学相互作用 | 第44-46页 |
3.7.2 Mid功能获得会抑制hh的表达 | 第46页 |
3.8 翅原基中Wg不激活mid的表达 | 第46-49页 |
4 讨论 | 第49-51页 |
5 结论 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-59页 |
致谢 | 第59-60页 |
攻读学位期间发表的论文及成果 | 第60页 |