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囊泡运输介导的响应外界刺激的气孔运动

中文摘要第8-10页
Abstract第10-11页
1 前言第12-22页
    1.1 气孔第12-15页
        1.1.1 ABA与气孔运动第12-13页
        1.1.2 光与气孔运动第13-14页
        1.1.3 气孔运动中的关键膜蛋白第14-15页
            1.1.3.1 K+通道第14页
            1.1.3.2 阴离子通道第14-15页
            1.1.3.3 H+-ATPase第15页
    1.2 囊泡运输第15-18页
        1.2.1 植物细胞中的囊泡运输第16-17页
        1.2.2 TGN/EE —囊泡分拣中心第17页
        1.2.3 ARF介导的囊泡运输途径第17-18页
        1.2.4 RAB5介导的囊泡运输途径第18页
    1.3 囊泡运输与气孔运动第18-20页
        1.3.1 KAT1与囊泡运输第18-19页
        1.3.2 AHA1与囊泡运输第19-20页
    1.4 本研究的目的及意义第20-22页
2 材料与方法第22-33页
    2.1 材料第22页
        2.1.1 植物材料及生长条件第22页
        2.1.2 菌株和质粒第22页
        2.1.3 酶与各种生化试剂第22页
    2.2 方法第22-33页
        2.2.1 植物基因组DNA与总RNA的提取第22-24页
            2.2.1.1 植物基因组DNA的提取第22-23页
            2.2.1.2 植物总RNA的提取(试剂盒法)第23-24页
            2.2.1.3 反转录第24页
        2.2.2 构建表达载体第24-28页
            2.2.2.1 设计PCR引物第24-25页
            2.2.2.2 Phusion PCR扩增第25页
            2.2.2.3 回收PCR产物(试剂盒法)第25-26页
            2.2.2.4 构建克隆载体第26页
            2.2.2.5 大肠杆菌转化及质粒提取(试剂盒法)第26-28页
            2.2.2.6 DNA序列测定第28页
            2.2.2.7 LR反应第28页
            2.2.2.8 质粒DNA的酶切鉴定第28页
        2.2.3 拟南芥的遗传转化和转基因植物的筛选第28-30页
            2.2.3.1 农杆菌转化及鉴定第28-29页
            2.2.3.2 拟南芥的栽培及遗传转化第29-30页
            2.2.3.3 转基因植物的筛选第30页
        2.2.4 气孔开度实验第30-31页
            2.2.4.1 ABA诱导的气孔关闭实验第30-31页
            2.2.4.2 光诱导的气孔开放实验第31页
        2.2.5 气孔药剂处理实验第31-32页
            2.2.5.1 FM4-64染色第31页
            2.2.5.2 BFA处理第31页
            2.2.5.3 Wortmannin处理第31-32页
        2.2.6 显微镜观察及图像处理第32-33页
3 结果与分析第33-44页
    3.1 ARF1介导的囊泡运输途径参与气孔运动第33-36页
        3.1.1 在保卫细胞中阻断ARF1介导的囊泡运输途径影响了植物生长第34-35页
        3.1.2 在保卫细胞中阻断ARF1介导的囊泡运输途径导致气孔对光刺激不敏感第35-36页
    3.2 RAB5介导的液泡降解途径不直接参与气孔运动第36-39页
        3.2.1 在保卫细胞中阻断RAB5介导的液泡降解途径不影响植物生长第37-38页
        3.2.2 阻断RAB5介导的液泡降解途径不影响气孔对ABA和光刺激的敏感性第38-39页
    3.3 ARF1介导的囊泡运输途径调控AHA1的动态运输第39-40页
    3.4 利用药剂学阻断囊泡运输途径第40-44页
        3.4.1 AHA1对囊泡运输抑制剂BFA和Wortminnin是敏感的第40-42页
        3.4.2. BFA敏感的囊泡运输途径调控AHA1的动态运输第42-44页
4 讨论第44-46页
5 结论第46-47页
参考文献第47-54页
致谢第54-55页
攻读学位期间发表论文情况第55页

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