中文摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
1 前言 | 第12-22页 |
1.1 气孔 | 第12-15页 |
1.1.1 ABA与气孔运动 | 第12-13页 |
1.1.2 光与气孔运动 | 第13-14页 |
1.1.3 气孔运动中的关键膜蛋白 | 第14-15页 |
1.1.3.1 K+通道 | 第14页 |
1.1.3.2 阴离子通道 | 第14-15页 |
1.1.3.3 H+-ATPase | 第15页 |
1.2 囊泡运输 | 第15-18页 |
1.2.1 植物细胞中的囊泡运输 | 第16-17页 |
1.2.2 TGN/EE —囊泡分拣中心 | 第17页 |
1.2.3 ARF介导的囊泡运输途径 | 第17-18页 |
1.2.4 RAB5介导的囊泡运输途径 | 第18页 |
1.3 囊泡运输与气孔运动 | 第18-20页 |
1.3.1 KAT1与囊泡运输 | 第18-19页 |
1.3.2 AHA1与囊泡运输 | 第19-20页 |
1.4 本研究的目的及意义 | 第20-22页 |
2 材料与方法 | 第22-33页 |
2.1 材料 | 第22页 |
2.1.1 植物材料及生长条件 | 第22页 |
2.1.2 菌株和质粒 | 第22页 |
2.1.3 酶与各种生化试剂 | 第22页 |
2.2 方法 | 第22-33页 |
2.2.1 植物基因组DNA与总RNA的提取 | 第22-24页 |
2.2.1.1 植物基因组DNA的提取 | 第22-23页 |
2.2.1.2 植物总RNA的提取(试剂盒法) | 第23-24页 |
2.2.1.3 反转录 | 第24页 |
2.2.2 构建表达载体 | 第24-28页 |
2.2.2.1 设计PCR引物 | 第24-25页 |
2.2.2.2 Phusion PCR扩增 | 第25页 |
2.2.2.3 回收PCR产物(试剂盒法) | 第25-26页 |
2.2.2.4 构建克隆载体 | 第26页 |
2.2.2.5 大肠杆菌转化及质粒提取(试剂盒法) | 第26-28页 |
2.2.2.6 DNA序列测定 | 第28页 |
2.2.2.7 LR反应 | 第28页 |
2.2.2.8 质粒DNA的酶切鉴定 | 第28页 |
2.2.3 拟南芥的遗传转化和转基因植物的筛选 | 第28-30页 |
2.2.3.1 农杆菌转化及鉴定 | 第28-29页 |
2.2.3.2 拟南芥的栽培及遗传转化 | 第29-30页 |
2.2.3.3 转基因植物的筛选 | 第30页 |
2.2.4 气孔开度实验 | 第30-31页 |
2.2.4.1 ABA诱导的气孔关闭实验 | 第30-31页 |
2.2.4.2 光诱导的气孔开放实验 | 第31页 |
2.2.5 气孔药剂处理实验 | 第31-32页 |
2.2.5.1 FM4-64染色 | 第31页 |
2.2.5.2 BFA处理 | 第31页 |
2.2.5.3 Wortmannin处理 | 第31-32页 |
2.2.6 显微镜观察及图像处理 | 第32-33页 |
3 结果与分析 | 第33-44页 |
3.1 ARF1介导的囊泡运输途径参与气孔运动 | 第33-36页 |
3.1.1 在保卫细胞中阻断ARF1介导的囊泡运输途径影响了植物生长 | 第34-35页 |
3.1.2 在保卫细胞中阻断ARF1介导的囊泡运输途径导致气孔对光刺激不敏感 | 第35-36页 |
3.2 RAB5介导的液泡降解途径不直接参与气孔运动 | 第36-39页 |
3.2.1 在保卫细胞中阻断RAB5介导的液泡降解途径不影响植物生长 | 第37-38页 |
3.2.2 阻断RAB5介导的液泡降解途径不影响气孔对ABA和光刺激的敏感性 | 第38-39页 |
3.3 ARF1介导的囊泡运输途径调控AHA1的动态运输 | 第39-40页 |
3.4 利用药剂学阻断囊泡运输途径 | 第40-44页 |
3.4.1 AHA1对囊泡运输抑制剂BFA和Wortminnin是敏感的 | 第40-42页 |
3.4.2. BFA敏感的囊泡运输途径调控AHA1的动态运输 | 第42-44页 |
4 讨论 | 第44-46页 |
5 结论 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-54页 |
致谢 | 第54-55页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第55页 |