摘要 | 第8-9页 |
Abstract | 第9页 |
第一章 绪论 | 第11-33页 |
1.1 哺乳动物卵子发生 | 第11-19页 |
1.1.1 原始生殖细胞形成、增殖和迁移 | 第12-14页 |
1.1.2 减数分裂启动、停滞和原始卵泡形成 | 第14-15页 |
1.1.3 原始卵泡激活和窦卵泡形成 | 第15-18页 |
1.1.4 卵母细胞成熟和排卵 | 第18-19页 |
1.2 母源基因与卵母细胞和早期胚胎发育 | 第19-30页 |
1.2.1 母源基因的概念和作用 | 第19-28页 |
1.2.1.1 表观遗传重编程 | 第20-22页 |
1.2.1.2 母源mRNA和蛋白降解 | 第22-24页 |
1.2.1.3 胚胎基因组激活 | 第24-25页 |
1.2.1.4 基因组印记 | 第25-27页 |
1.2.1.5 细胞分化 | 第27-28页 |
1.2.2 皮质外母源效应复合体的成分和作用 | 第28-30页 |
1.2.2.1 FILIA/ECAT1在小鼠和人胚胎发育中的作用 | 第28-29页 |
1.2.2.2 MATER在小鼠和人胚胎发育中的作用 | 第29页 |
1.2.2.3 FLOPED在小鼠和人胚胎发育中的作用 | 第29-30页 |
1.2.2.4 TLE6在小鼠和人胚胎发育中的作用 | 第30页 |
1.3 颗粒细胞与卵母细胞发育 | 第30-33页 |
1.3.1 颗粒细胞增殖和分化 | 第31-32页 |
1.3.2 颗粒细胞与卵母细胞间隙连接 | 第32-33页 |
第二章 ECAT1在人卵母细胞和早期胚胎发育中的作用 | 第33-58页 |
2.1 引言 | 第33-34页 |
2.2 实验材料 | 第34-37页 |
2.2.1 人细胞和组织标本收集 | 第34页 |
2.2.2 实验试剂 | 第34-35页 |
2.2.3 实验耗材与仪器 | 第35-37页 |
2.2.4 溶液配制 | 第37页 |
2.3 实验方法 | 第37-45页 |
2.3.1 RNA抽提和反转录 | 第37-38页 |
2.3.2 单个卵母细胞RNA反转录、扩增和纯化 | 第38-40页 |
2.3.3 荧光定量PCR检测 | 第40页 |
2.3.4 人卵巢组织石蜡包埋和切片 | 第40-41页 |
2.3.5 免疫组织化学 | 第41-42页 |
2.3.6 免疫荧光染色 | 第42页 |
2.3.7 卵母细胞siRNA显微注射 | 第42-43页 |
2.3.8 卵母细胞体外成熟 | 第43页 |
2.3.9 卵母细胞斑点印记分析 | 第43-44页 |
2.3.10 卵胞浆内单精子注射和胚胎培养 | 第44-45页 |
2.3.11 统计分析 | 第45页 |
2.4 实验结果 | 第45-54页 |
2.4.1 ECAT1在人类各组织中表达 | 第45-46页 |
2.4.2 ECAT1在人卵巢和卵母细胞中的表达和定位 | 第46-48页 |
2.4.3 ECAT1蛋白在人不同发育阶段卵母细胞和胚胎中的表达 | 第48-50页 |
2.4.4 人卵母细胞siRNA注射降低ECAT1 mRNA和蛋白水平 | 第50-51页 |
2.4.5 ECAT1 RNA干扰影响人卵母细胞体外成熟 | 第51-52页 |
2.4.6 ECAT1 RNA干扰影响受精和卵裂 | 第52-53页 |
2.4.7 ECAT1 RNA干扰导致人MII卵母细胞纺锤体组装异常 | 第53-54页 |
2.5 小结和讨论 | 第54-58页 |
第三章 颗粒细胞对小鼠体外成熟卵母细胞转录组的影响 | 第58-73页 |
3.1 引言 | 第58-59页 |
3.2 实验材料 | 第59页 |
3.2.1 实验动物 | 第59页 |
3.2.2 实验试剂和器材 | 第59页 |
3.3 实验方法 | 第59-61页 |
3.3.1 卵母细胞的采集 | 第59-60页 |
3.3.2 文库构建和测序 | 第60-61页 |
3.3.3 测序数据分析 | 第61页 |
3.3.4 基因差异表达分析 | 第61页 |
3.4 实验结果 | 第61-71页 |
3.4.1 测序数据分析 | 第61-62页 |
3.4.2 与颗粒细胞共培养减少体内外成熟卵母细胞间转录组的差异 | 第62-64页 |
3.4.3 与颗粒细胞共培养减少体外成熟培养造成的细胞信号通路异常 | 第64-70页 |
3.4.4 与颗粒细胞共培养降低自噬相关基因的表达 | 第70-71页 |
3.5 小结和讨论 | 第71-73页 |
参考文献 | 第73-96页 |
附录1 参加会议情况 | 第96-97页 |
附录2 中英文对照表 | 第97-98页 |
致谢 | 第98-99页 |
在读期间发表的学术论文与取得的其它研究成果 | 第99页 |