| 摘要 | 第9-11页 |
| ABSTRACT | 第11-12页 |
| 缩略词表 | 第13-14页 |
| 引言 | 第14-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-38页 |
| 1 猪链球菌耐药现状 | 第16-17页 |
| 1.1 猪链球菌简介 | 第16页 |
| 1.2 猪链球菌耐药现状 | 第16-17页 |
| 2 大环内酯类药物抗菌作用机制 | 第17-19页 |
| 2.1 大环内酯类药物简介 | 第18页 |
| 2.2 大环内酯类药物抗菌作用机制 | 第18-19页 |
| 3 针对大环内酯类药物的耐药机制 | 第19-22页 |
| 3.1 药物作用靶位突变 | 第19-20页 |
| 3.1.1 23S rRNA的位点突变 | 第19-20页 |
| 3.1.2 核糖体蛋白的变异 | 第20页 |
| 3.2 产生甲基化酶修饰药物作用靶位 | 第20-21页 |
| 3.3 主动外排系统引起的耐药 | 第21页 |
| 3.4 灭活酶引起的耐药 | 第21-22页 |
| 4 细菌耐药性与适应性研究进展 | 第22-29页 |
| 4.1 细菌耐药性的发展及消除 | 第22-24页 |
| 4.1.1 细菌耐药性的发展过程 | 第22页 |
| 4.1.2 细菌耐药性的消除方式 | 第22-24页 |
| 4.2 适应性代价及代偿性进化 | 第24-29页 |
| 4.2.1 适应性代价产生原因 | 第24-25页 |
| 4.2.2 适应性代价的测定方法 | 第25-26页 |
| 4.2.3 适应性代价的影响因素 | 第26-27页 |
| 4.2.4 适应性代价的代偿方式 | 第27-29页 |
| 参考文献 | 第29-38页 |
| 第二章 大环内酯类耐药基因mefA/msrD的适应性代价研究 | 第38-66页 |
| 1 材料与方法 | 第39-50页 |
| 1.1 材料 | 第39-41页 |
| 1.1.1 菌株 | 第39-40页 |
| 1.1.2 培养基及其配制 | 第40页 |
| 1.1.3 药物及储备液配制 | 第40页 |
| 1.1.4 生化试剂及试剂盒 | 第40页 |
| 1.1.5 主要仪器设备 | 第40-41页 |
| 1.2 方法 | 第41-50页 |
| 1.2.1 大环内酯类耐药相关基因mefA -msrD的检测 | 第41页 |
| 1.2.2 药敏试验 | 第41-42页 |
| 1.2.3 临床分离耐药菌体外适应性分析 | 第42-44页 |
| 1.2.4 评价耐药基因mefA对大肠杆菌耐药性及适应性的影响 | 第44-47页 |
| 1.2.5 msrD基因缺失突变株的构建和鉴定 | 第47-50页 |
| 2 结果 | 第50-60页 |
| 2.1 耐药基因mefA-msrD的检验 | 第50页 |
| 2.2 受试猪链球菌对常用大环内酯类药物的敏感性 | 第50页 |
| 2.3 临床分离携带耐药菌体外适应性分析 | 第50-55页 |
| 2.3.1 各试验菌株生长曲线的拟合 | 第50-52页 |
| 2.3.2 各试验菌株各生长动力学参数计算 | 第52-53页 |
| 2.3.3 临床分离耐药菌株与相关敏感菌株体外竞争试验 | 第53-54页 |
| 2.3.4 临床分离耐药菌株与相关敏感菌株中Nisin基因检测 | 第54-55页 |
| 2.4 评价耐药基因mefA对大肠杆菌耐药性及适应性的影响 | 第55-58页 |
| 2.4.1 重组质粒pMD19-T::mefA构建结果 | 第55页 |
| 2.4.2 携带不同重组质粒DH5α的最小抑菌浓度 | 第55-56页 |
| 2.4.3 各试验菌株生长曲线的拟合 | 第56-57页 |
| 2.4.4 耐药菌株与相关敏感菌株体外竞争试验 | 第57-58页 |
| 2.5 msrD基因缺失突变株的构建和鉴定 | 第58-60页 |
| 2.5.1 msrD基因上下游序列扩增结果 | 第58页 |
| 2.5.2 融合PCR扩增msrDL-msrDR基因结果 | 第58页 |
| 2.5.3 重组质粒pMD19-T:: msrDL::msrDR构建结果 | 第58-59页 |
| 2.5.4 重组质粒pSET4s::msrDL::msrDR构建结果 | 第59-60页 |
| 3 讨论 | 第60-62页 |
| 3.1 猪链球菌中mefA-msrD的检测 | 第60页 |
| 3.2 临床分离携带mefA-msrD耐药菌株的体外适应性 | 第60-61页 |
| 3.3 评价耐药基因mefA-msrD对宿主菌耐药性及适应性的影响 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-66页 |
| 第三章 大环内酯类耐药基因ermB的适应性代价研究 | 第66-84页 |
| 1 材料与方法 | 第67-73页 |
| 1.1 材料 | 第67-68页 |
| 1.1.1 菌株及质粒 | 第67-68页 |
| 1.1.2 主要试剂和仪器 | 第68页 |
| 1.2 方法 | 第68-73页 |
| 1.2.1 大环内酯类耐药基因ermB的检测 | 第68-69页 |
| 1.2.2 药敏试验 | 第69页 |
| 1.2.3 临床分离耐药菌体外适应性分析 | 第69-70页 |
| 1.2.4 评价耐药基因ermB对大肠杆菌耐药性及适应性的影响 | 第70-73页 |
| 2 结果 | 第73-80页 |
| 2.1 耐药基因ermB的检验 | 第73页 |
| 2.2 受试猪链球菌对常用大环内酯类药物的敏感性 | 第73页 |
| 2.3 临床分离耐药菌体外适应性分析 | 第73-77页 |
| 2.3.1 各试验菌株生长曲线的拟合 | 第73-75页 |
| 2.3.2 各试验菌株各生长动力学参数计算 | 第75-76页 |
| 2.3.3 临床分离耐药菌株与相关敏感菌株体外竞争试验 | 第76-77页 |
| 2.4 评价耐药基因ermB对大肠杆菌耐药性及适应性的影响 | 第77-80页 |
| 2.4.1 重组质粒pMD19-T::ermB构建结果 | 第77页 |
| 2.4.2 携带不同重组质粒DH5α的最小抑菌浓度 | 第77-78页 |
| 2.4.3 各试验菌株生长曲线的拟合 | 第78-79页 |
| 2.2.4 耐药菌株与相关敏感菌株体外竞争试验 | 第79-80页 |
| 3 讨论 | 第80-82页 |
| 3.1 猪链球菌中ermB的检测 | 第80页 |
| 3.2 初步评价临床分离携带ermB耐药菌株体外适应性 | 第80-81页 |
| 3.3 评价耐药基因ermB对宿主菌耐药性及适应性的影响 | 第81-82页 |
| 参考文献 | 第82-84页 |
| 第四章 23S rRNA突变对猪链球菌适应性的影响 | 第84-112页 |
| 1 材料与方法 | 第85-90页 |
| 1.1 材料 | 第85-86页 |
| 1.1.1 菌株 | 第85页 |
| 1.1.2 实验动物 | 第85页 |
| 1.1.3 培养基及其配制 | 第85页 |
| 1.1.4 药物及储备液配制 | 第85-86页 |
| 1.1.5 生化试剂及试剂盒 | 第86页 |
| 1.1.6 主要仪器设备 | 第86页 |
| 1.2 方法 | 第86-90页 |
| 1.2.1 体外诱导耐药试验 | 第86页 |
| 1.2.2 体外最小抑菌浓度(MIC)测定 | 第86-87页 |
| 1.2.3 大环内酯类耐药基因及相关突变位点分析 | 第87-88页 |
| 1.2.4 大环内酯类药物诱导耐药菌体外适应性分析 | 第88-89页 |
| 1.2.5 大环内酯类药物诱导耐药菌体内适应性分析 | 第89-90页 |
| 1.2.6 数据统计及分析 | 第90页 |
| 2 结果 | 第90-107页 |
| 2.1 大环内酯类药物体外诱导耐药菌的表型和基因突变类型 | 第90-92页 |
| 2.2 诱导耐药菌体外适应性分析 | 第92-101页 |
| 2.2.1 各试验菌株生长曲线的拟合 | 第92-95页 |
| 2.2.2 各试验菌株各生长动力学参数计算 | 第95-98页 |
| 2.2.3 诱导耐药菌株与敏感菌株体外竞争试验 | 第98-101页 |
| 2.3 诱导耐药菌体内适应性分析 | 第101-107页 |
| 3 讨论 | 第107-109页 |
| 3.1 人工诱导大环内酯类耐药猪链球菌突变形式 | 第107页 |
| 3.2 大环内酯类耐药突变对宿主猪链球菌适应性的影响 | 第107-109页 |
| 参考文献 | 第109-112页 |
| 全文结论 | 第112-114页 |
| 致谢 | 第114-116页 |
| 攻读硕士期间发表的论文 | 第116页 |
