| 摘要 | 第9-11页 |
| ABSTRACT | 第11-13页 |
| 符号及缩略语 | 第14-16页 |
| 引言 | 第16-17页 |
| 第一章 文献综述 | 第17-39页 |
| 1 P-gp概述 | 第17-18页 |
| 1.1 P-gp的结构 | 第17页 |
| 1.2 猪组织内P-gp的分布和功能 | 第17-18页 |
| 2 影响P-gp表达和活性的因素 | 第18-21页 |
| 2.1 疾病对P-gp表达影响的研究 | 第19页 |
| 2.2 药物对P-gp表达影响的研究 | 第19-20页 |
| 2.2.1 P-gp的底物 | 第19-20页 |
| 2.2.2 P-gp的诱导剂 | 第20页 |
| 2.2.3 P-gp的抑制剂 | 第20页 |
| 2.3 其他因素对P-gp表达影响的研究 | 第20-21页 |
| 3 LPS处理对P-gp表达影响的研究进展 | 第21-23页 |
| 3.1 LPS引起机体的变化 | 第21-22页 |
| 3.2 LPS对动物体内和体外P-gp表达影响的研究 | 第22-23页 |
| 4 LPS影响P-gp表达机制的研究进展 | 第23-28页 |
| 4.1 LPS促使细胞因子对P-gp表达的调控 | 第23-26页 |
| 4.1.1 IL-1β单独处理对P-gp表达的影响 | 第23-24页 |
| 4.1.2 IL-6单独处理对P-gp表达的影响 | 第24页 |
| 4.1.3 TNF-α单独处理对P-gp表达的影响 | 第24-25页 |
| 4.1.4 IFN-γ单独处理对P-gp表达的影响 | 第25页 |
| 4.1.5 IL-2单独处理对P-gp表达的影响 | 第25页 |
| 4.1.6 不同细胞因子对P-gp表达影响对比的研究 | 第25-26页 |
| 4.2 LPS促使核受体对P-gp表达的调控 | 第26-27页 |
| 4.3 LPS促使NO对P-gp表达的调控 | 第27-28页 |
| 5 小结 | 第28-29页 |
| 参考文献 | 第29-39页 |
| 第二章 LPS处理对猪肝脏、肾脏和小肠P-gp表达的影响 | 第39-59页 |
| 1 材料和方法 | 第40-45页 |
| 1.1 动物及处理 | 第40页 |
| 1.2 试剂 | 第40-41页 |
| 1.3 试验仪器 | 第41-42页 |
| 1.4 试验方法 | 第42-45页 |
| 1.4.1 炎症模型的建立 | 第42页 |
| 1.4.2 荧光定量PCR的方法检测LPS处理后各组织中Abcb1 mRNA表达水平 | 第42-44页 |
| 1.4.3 LPS处理后猪各组织细胞膜上P-gp表达变化 | 第44-45页 |
| 2 结果 | 第45-52页 |
| 2.1 LPS处理炎症模型的建立 | 第45-46页 |
| 2.2 LPS处理后猪各组织中Abcb1 mRNA表达水平的变化 | 第46-48页 |
| 2.2.1 RNA完整性鉴定及纯度的检测 | 第46页 |
| 2.2.2 RNA中基因组污染检测及反转成功检测 | 第46-47页 |
| 2.2.3 荧光定量PCR动力扩增曲线、产物融解曲线 | 第47-48页 |
| 2.2.4 LPS处理对猪各组织中Abcb1 mRNA表达的影响 | 第48页 |
| 2.3 LPS处理后猪各组织中P-gp定位及相对表达变化 | 第48-52页 |
| 2.3.1 LPS处理对猪肝脏中P-gp表达量的影响 | 第49-50页 |
| 2.3.2 LPS处理后对猪肾脏中P-gp表达量的影响 | 第50页 |
| 2.3.3 LPS对猪空肠中P-gp表达量的影响 | 第50-51页 |
| 2.3.4 LPS对猪回肠中P-gp表达量的影响 | 第51-52页 |
| 3 讨论 | 第52-55页 |
| 参考文献 | 第55-59页 |
| 第三章 LPS处理对IPEC-J2细胞内P-gp表达的影响 | 第59-77页 |
| 1 材料与仪器 | 第60-61页 |
| 1.1 材料 | 第60页 |
| 1.2 仪器 | 第60-61页 |
| 2 方法 | 第61-65页 |
| 2.1 IPEC-J2细胞培养 | 第61页 |
| 2.2 IPEC-J2细胞生长曲线绘制 | 第61页 |
| 2.3 IPEC-J2细胞增殖试验 | 第61-62页 |
| 2.3.1 MTT溶液的配制 | 第61页 |
| 2.3.2 不同浓度LPS溶液的配制 | 第61页 |
| 2.3.3 MTT法检测LPS对IPEC-J2细胞的增殖毒性 | 第61-62页 |
| 2.4 LPS对IPEC-J2细胞Abcb1 mRNA表达的影响 | 第62页 |
| 2.4.1 IPEC-J2细胞处理 | 第62页 |
| 2.4.2 IPEC-J2细胞总RNA的提取 | 第62页 |
| 2.4.3 荧光定量PCR检测IPEC-J2细胞中Abcb1 mRNA表达变化 | 第62页 |
| 2.5 免疫荧光检测LPS对IPEC-J2细胞膜上P-gp定位及表达的影响 | 第62-63页 |
| 2.6 Western Blot检测LPS对IPEC-J2细胞内P-gp表达的影响 | 第63-65页 |
| 2.6.1 细胞处理及总蛋白的提取 | 第63页 |
| 2.6.2 BCA法测定蛋白浓度 | 第63页 |
| 2.6.3 SDS-PAGE | 第63-64页 |
| 2.6.4 SDS-PAGE胶的转印 | 第64页 |
| 2.6.5 封闭 | 第64页 |
| 2.6.6 一抗孵育 | 第64-65页 |
| 2.6.7 二抗孵育 | 第65页 |
| 2.6.8 显色 | 第65页 |
| 2.6.9 统计学处理 | 第65页 |
| 3 结果 | 第65-71页 |
| 3.1 细胞形态 | 第65-66页 |
| 3.2 IPEC-J2细胞生长曲线 | 第66页 |
| 3.3 MTT法检测细胞增殖毒性 | 第66页 |
| 3.4 LPS对IPEC-J2细胞膜上P-gp定位和表达的影响 | 第66-68页 |
| 3.5 LPS对IPEC-J2细胞中P-gp表达的影响 | 第68-71页 |
| 4 讨论 | 第71-73页 |
| 参考文献 | 第73-77页 |
| 第四章 LPS处理对恩诺沙星在猪体内药动学的影响 | 第77-95页 |
| 1 材料与方法 | 第78-80页 |
| 1.1 试验动物 | 第78页 |
| 1.2 试剂 | 第78页 |
| 1.3 试验仪器 | 第78页 |
| 1.4 试验方法 | 第78-80页 |
| 1.4.1 主要工作液的配制 | 第78-79页 |
| 1.4.2 色谱条件建立 | 第79页 |
| 1.4.3 试验动物处理 | 第79页 |
| 1.4.4 样品的前处理 | 第79页 |
| 1.4.5 HPLC检测血浆中恩诺沙星方法学的建立 | 第79-80页 |
| 1.4.6 数据的处理 | 第80页 |
| 2 结果 | 第80-88页 |
| 2.1 恩诺沙星检测方法的建立 | 第80-82页 |
| 2.1.1 紫外波长的选择 | 第80页 |
| 2.1.2 专属性考察 | 第80-82页 |
| 2.1.3 标准曲线的制备 | 第82页 |
| 2.2 药时曲线与药动学参数 | 第82-88页 |
| 2.2.1 对照组和维拉帕米处理组猪体内恩诺沙星的药时曲线 | 第82-84页 |
| 2.2.2 对照组和维拉帕米组猪体内恩诺沙星的药动学参数 | 第84-85页 |
| 2.2.3 对照组和LPS处理组猪体内恩诺沙星的药时曲线 | 第85-87页 |
| 2.2.4 对照组和LPS处理组猪体内恩诺沙星的药动学参数 | 第87-88页 |
| 3 讨论 | 第88-91页 |
| 参考文献 | 第91-95页 |
| 全文总结 | 第95-97页 |
| 致谢 | 第97-99页 |
| 攻读硕士期间发表的论文 | 第99页 |
