| 缩略词 | 第4-5页 |
| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第一章 绪论 | 第12-24页 |
| 1 猪繁殖与呼吸综合征概述 | 第12-16页 |
| 1.1 猪繁殖与呼吸综合征 | 第12页 |
| 1.2 PRRSV的病原学特征 | 第12页 |
| 1.3 PRRSV的细胞培养与增殖 | 第12-13页 |
| 1.4 PRRSV的基因组特征 | 第13-14页 |
| 1.5 PRRSV基因组编码蛋白及其功能 | 第14-16页 |
| 2 PRRSV的生物学特性 | 第16-20页 |
| 2.1 抗体依赖性增强作用(ADE) | 第16-19页 |
| 2.2 持续性感染 | 第19页 |
| 2.3 基因变异性强 | 第19-20页 |
| 3 单克隆抗体技术 | 第20-21页 |
| 3.1 单克隆抗体技术的基本原理 | 第20页 |
| 3.2 单克隆抗体的特点 | 第20-21页 |
| 3.3 单克隆抗体的应用 | 第21页 |
| 3.4 单克隆抗体的未来前景 | 第21页 |
| 4 多克隆抗体 | 第21-22页 |
| 5 PRRSV的防制 | 第22页 |
| 6 本研究的目的与意义 | 第22-24页 |
| 第二章 PRRSV GP5蛋白合成肽多克隆抗体的制备 | 第24-33页 |
| 1 材料 | 第24-25页 |
| 1.1 实验动物 | 第24页 |
| 1.2 主要试剂 | 第24页 |
| 1.3 主要仪器 | 第24-25页 |
| 2 方法 | 第25-26页 |
| 2.1 GP5蛋白B表位的预测 | 第25页 |
| 2.2 合成肽的制备与耦联 | 第25页 |
| 2.3 兔抗PRRSV GP5蛋白SC、LC多抗的制备 | 第25页 |
| 2.4 多抗血清的纯化 | 第25页 |
| 2.5 多抗的高效液相色谱(HPLC)纯度鉴定 | 第25-26页 |
| 2.6 多克隆抗体的Western blot鉴定 | 第26页 |
| 2.7 多抗的琼脂扩散实验(AGID) | 第26页 |
| 3 结果与分析 | 第26-30页 |
| 3.1 PRRSV SC株GP5蛋白抗原表位分析结果 | 第26-27页 |
| 3.2 多抗血清的纯化结果 | 第27页 |
| 3.3 多抗的高效液相色谱鉴定结果 | 第27-29页 |
| 3.4 多克隆抗体的Western blot鉴定结果 | 第29页 |
| 3.5 多抗的琼脂扩散试验结果 | 第29-30页 |
| 4 讨论 | 第30-31页 |
| 5 小结 | 第31-33页 |
| 第三章 PRRSV GP5蛋白合成肽单克隆抗体的制备 | 第33-50页 |
| 1 材料 | 第33-34页 |
| 1.1 实验动物 | 第33页 |
| 1.2 细胞、毒株及多肽 | 第33页 |
| 1.3 主要试剂 | 第33页 |
| 1.4 主要仪器 | 第33-34页 |
| 2 方法 | 第34-40页 |
| 2.1 GP5蛋白合成肽抗原对小鼠的免疫 | 第34页 |
| 2.2 PRRSV GP5蛋白合成肽抗原包被浓度的确定 | 第34页 |
| 2.3 间接ELISA检测小鼠免疫后抗体效价测定 | 第34-35页 |
| 2.4 单克隆抗体的制备及鉴定 | 第35-40页 |
| 3 结果与分析 | 第40-47页 |
| 3.1 最佳抗原包被量的确定 | 第40-41页 |
| 3.2 Balb/c小鼠免疫后血清效价的测定 | 第41-43页 |
| 3.3 细胞融合结果 | 第43-44页 |
| 3.4 杂交瘤细胞的筛选及IFA鉴定结果 | 第44-46页 |
| 3.5 纯化后腹水抗体效价检测结果 | 第46页 |
| 3.6 单克隆抗体的Western blot验证结果 | 第46-47页 |
| 3.7 单克隆抗体亚型的鉴定 | 第47页 |
| 4 讨论 | 第47-48页 |
| 5 小结 | 第48-50页 |
| 第四章 PRRSV SC株ADE作用初步研究 | 第50-60页 |
| 1 材料 | 第50-51页 |
| 1.1 菌种、细胞、毒株及高免血清 | 第50页 |
| 1.2 工具酶、实验试剂及耗材 | 第50-51页 |
| 1.3 主要设备及仪器 | 第51页 |
| 2 方法 | 第51-53页 |
| 2.1 实时荧光定量方法的建立 | 第51-52页 |
| 2.1.1 引物设计 | 第51页 |
| 2.1.2 PRRSV ORF6基因片段的扩增及克隆 | 第51页 |
| 2.1.3 PRRSV荧光定量PCR标准曲线的建立 | 第51-52页 |
| 2.1.4 PRRSV SC株一步生长曲线的绘制 | 第52页 |
| 2.2 不同稀释度高免血清对PRRSV SC株增殖的影响 | 第52页 |
| 2.3 间接免疫黄光（IFA)试验 | 第52-53页 |
| 3 结果与分析 | 第53-58页 |
| 3.1 PRRSV ORF6基因片段的扩增、克隆及测序结果 | 第53-54页 |
| 3.2 PRRSV荧光定量PCR标准曲线的建立 | 第54页 |
| 3.3 PRRSV黄光定量PCR方法的特异性、重复性评价 | 第54-55页 |
| 3.4 PRRSV SC株一步生长曲线的绘制 | 第55-56页 |
| 3.5 不同稀释度高免血清对PRRSV SC株在Marc-145细胞中增殖的影响 | 第56-57页 |
| 3.6 间接免疫荧光实验结果 | 第57-58页 |
| 4 讨论 | 第58-59页 |
| 5 小结 | 第59-60页 |
| 全文总结 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-69页 |
| 致谢 | 第69页 |
