摘要 | 第1-10页 |
ABSTRACT | 第10-13页 |
缩略语 | 第13-15页 |
前言 | 第15-17页 |
第一部分 文献综述 | 第17-37页 |
第一章 植物抗病基因研究进展 | 第19-25页 |
1 植物抗病的分子机制 | 第19-20页 |
2 植物抗病基因克隆策略 | 第20-21页 |
·图位克隆技术 | 第20页 |
·转座子标签技术 | 第20-21页 |
·基于同源序列的候选基因法 | 第21页 |
3 植物抗病基因的类型及特点 | 第21-23页 |
·NBS-LRR类 | 第22页 |
·细胞外LRR类(LRR-TM) | 第22页 |
·蛋白激酶类(PK) | 第22页 |
·跨膜受体激酶类(LRR-TM-PK) | 第22页 |
·其他 | 第22-23页 |
4 小麦抗白粉病基因和相关基因克隆策略及研究进展 | 第23-25页 |
第二章 Harpin蛋白生物学功能及作用机制 | 第25-31页 |
1 Harpin蛋白在植物上的诱导效应 | 第25-26页 |
·增强植物的抗病性 | 第25-26页 |
·增强植物抗虫性 | 第26页 |
·提高植物抗旱能力 | 第26页 |
·促进植物生长 | 第26页 |
2 Harpin的作用机制 | 第26-31页 |
·Harpin诱导的SAR信号通路 | 第27-28页 |
·Harpin启动的ET信号通路 | 第28页 |
·Harpin启动ABA信号通路 | 第28页 |
·Harpin诱导活性氧产生和过敏性细胞死亡 | 第28-31页 |
第三章 VIGS技术和转基因工程在麦类作物中的应用 | 第31-37页 |
1 VIGS技术在麦类作物中的应用 | 第31-32页 |
2 转基因工程在麦类作物中的应用 | 第32-37页 |
·小麦转化受体系统 | 第32-33页 |
·小麦遗传转化主要方法 | 第33-34页 |
·小麦遗传转化的报告基因和选择标记基因 | 第34-35页 |
·无选择标记基因转化及生物安全标记基因 | 第35页 |
·小麦遗传转化中存在的主要问题 | 第35-36页 |
·转基因小麦的展望 | 第36-37页 |
第二部分 研究报告 | 第37-101页 |
第一章 小麦NBS-LRR类抗病基因同源序列的分离与功能分析 | 第39-71页 |
1 材料与方法 | 第40-49页 |
·材料 | 第40页 |
·方法 | 第40-49页 |
2 结果与分析 | 第49-65页 |
·小麦R基因NBS-LRR同源片段的获得 | 第49-50页 |
·小麦抗病基因同源片段的同源性分析 | 第50-51页 |
·小麦抗病基因同源片段TaRGA的聚类分析 | 第51页 |
·小麦抗病同源基因TaRGA全长cDNA的获得 | 第51-53页 |
·TaRGA基因编码蛋白质产物的结构分析及功能预测 | 第53-56页 |
·小麦TaRGA全长基因的基因组水平分析 | 第56-57页 |
·小麦TaRGA基因表达分析 | 第57页 |
·原核表达分析 | 第57-58页 |
·TaRGA基因在根、茎、叶和穗组织中均有表达 | 第58-59页 |
·TaRGA受激素SA和H_2O_2诱导表达 | 第59页 |
·TaRGA:YFP融合蛋白定位于细胞核 | 第59-60页 |
·VIGS结果与分析 | 第60-63页 |
·TaRGA基因过表达增强了植物的抗病性,促进了PR基因的表达 | 第63-65页 |
3 结论与讨论 | 第65-71页 |
第二章 转Hpa1_(10-42)小麦的分子鉴定及对白粉病的抗性研究 | 第71-87页 |
1 材料与方法 | 第72-75页 |
·植物材料 | 第72-73页 |
·植物生长条件 | 第73页 |
·转基因植株的产生 | 第73页 |
·PCR及PCR-Southern杂交 | 第73-74页 |
·反转录PCR分析 | 第74页 |
·菌种保存 | 第74页 |
·病情分析与植株抗性评价 | 第74-75页 |
·植物组织染色观察 | 第75页 |
·抗氧化酶活性的测定 | 第75页 |
·数据分析 | 第75页 |
2 结果与分析 | 第75-83页 |
·转基因小麦的筛选与分子鉴定 | 第75-78页 |
·转Hpa1_(10-42)基因植株对白粉病的抗性增强 | 第78-80页 |
·转Hpa1_(10-42)基因植株在苗期和成株期的抗性水平稳定 | 第80-81页 |
·Hpa1_(10-42)转基因诱导了小麦的防卫反应 | 第81-83页 |
3 结论与讨论 | 第83-87页 |
第三章 表达Harpin蛋白质Hpa1功能片段的转基因小麦对赤霉病的抗性 | 第87-101页 |
1 材料与方法 | 第89-92页 |
·材料 | 第89-90页 |
·方法 | 第90-92页 |
2 结果与分析 | 第92-98页 |
·Y16:Hpa1_(10-42)转基因品系鉴定 | 第92-93页 |
·Hpa1_(10-42)转基因增强小麦赤霉病抗性 | 第93-95页 |
·Hpa1_(10-42)基因在Y16:Hpa1_(10-42)转基因品系T_3-T_5代中稳定表达 | 第95页 |
·Y16:Hpa1_(10-42)转基因系对赤霉病抗性在T_3-T_5代稳定遗传 | 第95页 |
·Hpa1_(10-42)基因的表达和杀菌剂的应用对小麦赤霉病的综合影响 | 第95-98页 |
3 结论与讨论 | 第98-101页 |
全文总结 | 第101-103页 |
参考文献 | 第103-119页 |
攻读学位期间发表和准备中的论文清单 | 第119-121页 |
致谢 | 第121页 |