| 摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-14页 |
| 上篇 文献综述 | 第14-57页 |
| 第一章 卵菌中无毒效应分子研究进展 | 第15-41页 |
| 1. 卵菌无毒效应分子的鉴定研究进展 | 第17-21页 |
| ·卵菌无毒效应分子的鉴定 | 第17-21页 |
| 2. 卵菌无毒效应分子特征 | 第21-24页 |
| ·无毒效应分子N端特征 | 第21-23页 |
| ·无毒效应分子C端特征 | 第23-24页 |
| ·效应分子的转录特征 | 第24页 |
| 3. 卵菌效应分子的毒性功能研究 | 第24-25页 |
| 4. 无毒效应分子的变异机制 | 第25-27页 |
| ·序列突变 | 第25-26页 |
| ·基因缺失 | 第26-27页 |
| ·基因沉默 | 第27页 |
| 5. 无毒效应分子进入细胞机制 | 第27-28页 |
| 6. 无毒效应分子毒性机理研究 | 第28-31页 |
| ·PiAvr3a稳定E3连接酶CMPG1调控免疫反应 | 第28-29页 |
| ·PiAvrblb2通过抑制蛋白酶C14抑制免疫反应 | 第29页 |
| ·PiAvr2与BSL1互作调控寄主抗性 | 第29页 |
| ·Pi03192抑制NAC转录因子的重定位促进侵染 | 第29-30页 |
| ·PexRD2与MAPKKK互作抑制植物的免疫 | 第30页 |
| ·HaRxL44和Mediator复合体互作减弱SA触发的ETI | 第30-31页 |
| 参考文献 | 第31-41页 |
| 第二章 E3泛素连接酶与植物免疫 | 第41-57页 |
| 1. 泛素-26S蛋白酶体系统 | 第42-47页 |
| ·泛素的级联反应 | 第42-44页 |
| ·泛素蛋白 | 第44页 |
| ·泛素激活酶E1 | 第44-45页 |
| ·泛素结合酶E2 | 第45页 |
| ·泛素连接酶E3 | 第45-47页 |
| ·26S蛋白酶体 | 第47页 |
| ·去泛素化酶 | 第47页 |
| 2. 植物E3泛素连接酶在防卫反应中的作用 | 第47-51页 |
| ·E3泛素连接酶在病原菌识别中的作用 | 第47-49页 |
| ·E3泛素连接酶在防卫信号中的作用 | 第49-50页 |
| ·效应分子对植物E3泛素连接酶的调控作用 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-57页 |
| 下篇 研究内容 | 第57-137页 |
| 第一章 大豆疫霉无毒效应分子Avr1d的鉴定 | 第59-79页 |
| 1 材料与方法 | 第61-65页 |
| ·供试菌株 | 第61页 |
| ·供试大豆 | 第61-62页 |
| ·大豆疫霉菌致病性的测定 | 第62页 |
| ·基因组DNA的提取 | 第62页 |
| ·PCR扩增程序和酶切体系 | 第62页 |
| ·大豆疫霉杂合F1代的获得 | 第62-63页 |
| ·大豆疫霉F2代群体的获得 | 第63页 |
| ·基因片段的克隆及质粒的构建 | 第63页 |
| ·植物基因枪瞬时表达 | 第63-64页 |
| ·转录水平测定 | 第64-65页 |
| ·Real-Time PCR分析Avr1d表达水平 | 第65页 |
| 2 结果与分析 | 第65-72页 |
| ·大豆疫霉亲本菌株在Rps1d大豆上的毒力表型测定 | 第65-66页 |
| ·P6497和P7076杂交群体后代可用于Avr1d的鉴定 | 第66-67页 |
| ·F_2代群体毒性特征的遗传分析 | 第67页 |
| ·F_2群体中Avh6基因型与Avr1d表型共分离 | 第67-70页 |
| ·Avh6在携带Rps1d大豆上引起特异性细胞死亡 | 第70-71页 |
| ·Avr1d的C端是被Rps1d识别的关键区域 | 第71-72页 |
| ·Avr1d转录分析 | 第72页 |
| 3 讨论 | 第72-74页 |
| 参考文献 | 第74-79页 |
| 第二章 无毒效应分子Avr1d的多态性及功能分析 | 第79-103页 |
| 1 材料与方法 | 第81-87页 |
| ·供试菌株和植物 | 第81-82页 |
| ·致病性测定 | 第82页 |
| ·DNA提取 | 第82页 |
| ·Avr1d的扩增和测序 | 第82页 |
| ·目的基因在烟草中瞬时表达 | 第82-83页 |
| ·目的基因的检测 | 第83-86页 |
| ·烟草叶片接种辣椒疫霉 | 第86页 |
| ·辣椒疫霉菌丝生物量测定 | 第86页 |
| ·菌丝台盼蓝染色观察 | 第86-87页 |
| 2 结果与分析 | 第87-98页 |
| ·Avr1d的多态性分析 | 第87-90页 |
| ·Avr1d~(P7064)能够被Rps1d所识别 | 第90-91页 |
| ·Avr1d能够抑制细胞坏死 | 第91-93页 |
| ·Avr1d能够促进侵染 | 第93-95页 |
| ·Avr1d定位于细胞质和细胞核中 | 第95-96页 |
| ·Avr1d融合核定位或核输出信号对Rps1d的识别没有影响 | 第96-97页 |
| ·Avr1d融合核定位或核输出信号不能促进侵染 | 第97-98页 |
| 3 讨论 | 第98-100页 |
| 参考文献 | 第100-103页 |
| 第三章 无毒效应分子Avr1d毒性机理分析 | 第103-123页 |
| 1 材料方法 | 第105-109页 |
| ·筛选用菌株及载体 | 第105页 |
| ·常用培养基 | 第105-106页 |
| ·酵母菌感受态制备和转化 | 第106-107页 |
| ·大豆cDNA文库的筛选 | 第107页 |
| ·蛋白原核表达 | 第107-108页 |
| ·蛋白体外互作验证 | 第108-109页 |
| ·泛素化活性测定 | 第109页 |
| 2 结果与分析 | 第109-118页 |
| ·Avr1d自激活及毒性验证 | 第109-110页 |
| ·酵母双杂交筛选Avr1d互作蛋白 | 第110页 |
| ·Avr1d与阳性克隆片段的互作分析 | 第110-111页 |
| ·Avr1d与Gm06860全长酵母互作验证 | 第111-112页 |
| ·Pull Down蛋白体外互作验证 | 第112-113页 |
| ·Avrld互作蛋白Gm06860序列分析 | 第113-114页 |
| ·大豆具有U-box结构域蛋白与Avr1d互作分析 | 第114-115页 |
| ·Gm06860具有泛素连接酶活性 | 第115-116页 |
| ·Gm06860酶活性关键位点影响与Avr1d的互作 | 第116-118页 |
| 3 讨论 | 第118-120页 |
| 参考文献 | 第120-123页 |
| 第四章 无毒效应分子Avr3b多态性及识别区域分析 | 第123-137页 |
| 1 材料与方法 | 第125-126页 |
| ·供试菌株 | 第125-126页 |
| ·供试大豆寄主品种 | 第126页 |
| ·大豆疫霉菌致病性的测定 | 第126页 |
| ·大豆疫霉基因组DNA的提取 | 第126页 |
| ·Avr3b的扩增和测序 | 第126页 |
| ·植物基因枪瞬时表达 | 第126页 |
| 2 结果与分析 | 第126-131页 |
| ·大豆疫霉菌株在Rps3b大豆上的毒力表型测定 | 第126-127页 |
| ·Avr3b目的片段的扩增 | 第127-128页 |
| ·Avr3b测序结果与多态性分析 | 第128-129页 |
| ·Avr3b正向选择位点分析 | 第129页 |
| ·Avr3b转录分析 | 第129-130页 |
| ·Avr3b识别区域分析 | 第130-131页 |
| 3 讨论 | 第131-133页 |
| 参考文献 | 第133-137页 |
| 附录 | 第137-139页 |
| 全文总结及创新点 | 第139-141页 |
| 攻读博士期间发表的论文 | 第141-143页 |
| 致谢 | 第143页 |
