| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-15页 |
| 英文缩写索引 | 第15-17页 |
| 第一章 绪论 | 第17-47页 |
| ·卵巢癌概述 | 第17-19页 |
| ·卵巢癌一线治疗方案 | 第17-18页 |
| ·卵巢癌耐药机制 | 第18-19页 |
| ·卵巢癌耐药逆转策略 | 第19页 |
| ·上皮间质化 | 第19-24页 |
| ·上皮间质转化与肿瘤转移 | 第21-23页 |
| ·上皮间质化与肿瘤耐药 | 第23-24页 |
| ·Twist1概述 | 第24-29页 |
| ·Twist1与上皮间质化 | 第25-26页 |
| ·Twist1与肿瘤耐药 | 第26-29页 |
| ·miRNA概述 | 第29-46页 |
| ·致癌与抑癌miRNA | 第29-32页 |
| ·miRNA与肿瘤诊断 | 第32-33页 |
| ·miRNA与肿瘤转移 | 第33-35页 |
| ·miRNA与肿瘤耐药 | 第35-37页 |
| ·miRNA与上皮性卵巢癌 | 第37-38页 |
| ·miRNA调节EOC细胞CDDP耐药的可能机制 | 第38-43页 |
| ·miRNA与Twist1的相互调节作用 | 第43-44页 |
| ·miRNA在肿瘤诊治中的应用前景 | 第44-46页 |
| ·本研究的技术路线图 | 第46-47页 |
| 第二部分 CDDP耐药卵巢癌细胞EMT表型鉴定及Twist1的调控作用 | 第47-71页 |
| 前言 | 第47-48页 |
| ·实验材料 | 第48-54页 |
| ·细胞系 | 第48页 |
| ·主要仪器 | 第48-49页 |
| ·实验耗材 | 第49-50页 |
| ·主要试剂 | 第50-51页 |
| ·实验动物 | 第51页 |
| ·主要溶液配制 | 第51-54页 |
| ·实验方法 | 第54-64页 |
| ·细胞培养 | 第54-55页 |
| ·实时荧光定量PCR检测基因表达 | 第55-57页 |
| ·Western blot蛋白印迹实验 | 第57-60页 |
| ·细胞转染 | 第60-61页 |
| ·细胞划痕实验 | 第61页 |
| ·细胞活力与药敏性检测 | 第61-62页 |
| ·细胞周期检测 | 第62页 |
| ·细胞凋亡检测 | 第62页 |
| ·裸鼠体内移植瘤实验 | 第62-64页 |
| ·统计学分析 | 第64页 |
| ·实验结果 | 第64-69页 |
| ·敏感与耐药细胞形态学比较 | 第64-65页 |
| ·EMT标志物在敏感与耐药细胞中差异表达 | 第65页 |
| ·Twist1在CDDP耐药的EOC细胞中高表达 | 第65-66页 |
| ·抑制Twist1可逆转EOC细胞EMT表型并增加CDDP敏感性 | 第66-68页 |
| ·抑制Twist1逆转EMT增加EOC细胞体内药敏性 | 第68-69页 |
| ·讨论 | 第69-71页 |
| 第三部分 miR-186对EOC细胞EMT及CDDP耐药的调节作用 | 第71-86页 |
| 前言 | 第71-72页 |
| ·实验材料 | 第72-73页 |
| ·细胞系 | 第72页 |
| ·主要仪器与耗材 | 第72页 |
| ·主要试剂 | 第72页 |
| ·实验动物 | 第72-73页 |
| ·实验方法 | 第73-77页 |
| ·miRNA表达水平的检测 | 第73-74页 |
| ·miR-186模拟物或抑制物转染EOC细胞 | 第74-76页 |
| ·Western blot实验 | 第76页 |
| ·细胞划痕实验 | 第76页 |
| ·细胞活力与药敏性检测 | 第76页 |
| ·细胞周期检测 | 第76页 |
| ·细胞凋亡检测 | 第76页 |
| ·裸鼠体内移植瘤实验 | 第76-77页 |
| ·统计学分析 | 第77页 |
| ·实验结果 | 第77-83页 |
| ·miR-186在EOC细胞中的表达 | 第77-78页 |
| ·miR-186逆转EMT增加EOC细胞CDDP敏感性 | 第78-82页 |
| ·miR-186对EOC细胞体内生长的影响 | 第82-83页 |
| ·讨论 | 第83-86页 |
| 第四部分 miR-186/Twist1调节EOC细胞EMT及CDDP耐药的机制 | 第86-104页 |
| 前言 | 第86-88页 |
| ·实验材料 | 第88-90页 |
| ·细胞系 | 第88页 |
| ·主要仪器与耗材 | 第88页 |
| ·主要试剂 | 第88-89页 |
| ·实验动物 | 第89页 |
| ·主要溶液配制 | 第89-90页 |
| ·实验方法 | 第90-94页 |
| ·双荧光素酶报告基因 | 第90-92页 |
| ·免疫共沉淀实验 | 第92-93页 |
| ·裸鼠体内移植瘤实验 | 第93-94页 |
| ·统计学分析 | 第94页 |
| ·实验结果 | 第94-101页 |
| ·miR-186对EOC细胞Twist1表达的影响 | 第94-95页 |
| ·Twist1是miR-186的直接靶基因 | 第95-96页 |
| ·miR-186通过Twist1调节EOC细胞EMT表型及对CDDP的敏感性 | 第96-98页 |
| ·miR-186对Twist1下游基因的调控作用 | 第98页 |
| ·miR-186对EMT相关分子及耐药相关蛋白表达的影响 | 第98-99页 |
| ·miR-186通过Twist1调节EOC细胞体内药敏性 | 第99-101页 |
| ·讨论 | 第101-104页 |
| 第五部分 miR-186/Twist1与EOC耐药的关系 | 第104-112页 |
| 前言 | 第104-105页 |
| ·资料 | 第105页 |
| ·一般资料 | 第105页 |
| ·实验仪器和试剂 | 第105页 |
| ·实验方法 | 第105-106页 |
| ·肿瘤组织中miR-186表达水平检测 | 第105-106页 |
| ·肿瘤组织中Twist1 mRNA表达水平检测 | 第106页 |
| ·肿瘤组织中Twist1蛋白水平检测 | 第106页 |
| ·统计学分析 | 第106页 |
| ·实验结果 | 第106-110页 |
| ·EOC组织中上皮及间质蛋白表达水平 | 第106-107页 |
| ·miR-186与EOC患者临床病理特征之间的关系 | 第107页 |
| ·miR-186与EOC患者化疗敏感性的关系 | 第107-108页 |
| ·miR-186与EOC患者无进展生存期的关系 | 第108页 |
| ·Twist1与EOC患者化疗敏感性的关系 | 第108-109页 |
| ·Twist1与EOC患者无进展生存期的关系 | 第109-110页 |
| ·miR-186与Twist1表达的相关性 | 第110页 |
| ·讨论 | 第110-112页 |
| 结论 | 第112-113页 |
| 参考文献 | 第113-137页 |
| 致谢 | 第137-138页 |
| 在学期间发表的论文及其他科研成果 | 第138-139页 |
