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大洋性金枪鱼和三文鱼的分子鉴定技术研究

摘要第1-9页
Abstract第9-11页
缩略词表第11-16页
第一章 绪论第16-35页
 1 主要金枪鱼类的介绍第16-21页
   ·主要金枪鱼类的生物学特征、营养和生产消费状况第16-18页
   ·6种主要经济金枪鱼类的生物学性状和渔业状况第18-21页
     ·蓝鳍金枪鱼(T. maccoyii)第18页
     ·金枪鱼(T. thynnus)第18-19页
     ·大眼金枪鱼(T. obesus)第19-20页
     ·长鳍金枪鱼(T. alalunga)第20页
     ·黄鳍金枪鱼(T. albacares)第20-21页
     ·鲣(K. pelamis)第21页
 2 主要鲑鱼类的介绍第21-25页
   ·主要鲑鱼类的生物学分类、特征、习性与分布第21-23页
   ·4种大洋性主要经济三文鱼类的生物学性状和渔业状况第23-25页
     ·大西洋鲑(S. salar)第23页
     ·虹鳟(O. mykiss)第23-24页
     ·狗鲑(O. keta)第24-25页
     ·红鲑(O. nerka)第25页
 3 鱼类种类鉴定的必要性第25-26页
 4 目前国内外对鱼类种类鉴别的研究现状第26-33页
   ·鱼类种类鉴定方法的研究分析第26-27页
   ·常用的DNA分子标记技术第27-31页
   ·鱼类物种鉴定中特征基因的选择第31-32页
   ·DNA分子标记技术在鱼类种类研究中的研究与应用第32-33页
 5 本论文的研究目的及意义第33-35页
第二章 金枪鱼类的双重荧光定量PCR技术鉴定研究第35-55页
 1 材料与仪器第36-37页
   ·实验材料第36页
     ·生鲜金枪鱼样品第36页
     ·金枪鱼深加工样品第36页
   ·实验仪器与试剂第36-37页
     ·主要实验仪器第36页
     ·主要试剂第36-37页
 2 实验方法第37-41页
   ·样品保存与样品DNA的提取第37页
   ·常规PCR扩增与特征基因的选择第37-38页
   ·荧光定量PCR的引物与探针设计第38页
   ·荧光定量PCR检测第38-39页
   ·标准曲线的制定第39页
   ·克隆验证第39-41页
     ·PCR扩增第39页
     ·PCR产物割胶回收第39页
     ·连接转化与培养第39-40页
     ·重组质粒的提取与酶切鉴定第40页
     ·测序分析第40-41页
   ·混合样品的检测第41页
   ·深加工样品的检测第41页
 3 结果与分析第41-53页
   ·样品DNA提取第41-42页
   ·PCR扩增结果与特征基因的选择第42-43页
   ·荧光定量PCR引物和探针第43-44页
   ·双重荧光定量PCR体系的建立第44-48页
     ·荧光定量PCR体系的引物与探针的验证第44-46页
     ·双重荧光定量PCR体系的验证第46-48页
   ·荧光定量PCR体系的标准曲线第48-49页
   ·混合样品的检测第49-52页
   ·深加工产品的双重荧光定量PCR检测第52-53页
 4 讨论第53-55页
第三章 鲑科鱼类的双重荧光定量PCR技术鉴定研究第55-71页
 1 材料与仪器第55-56页
   ·实验材料第55页
     ·生鲜三文鱼样品第55页
     ·三文鱼深加工样品第55页
   ·实验仪器与试剂第55-56页
     ·主要实验仪器第55-56页
     ·主要试剂第56页
 2 实验方法第56-58页
   ·样品保存与样品DNA的提取第56页
   ·荧光定量PCR的引物与探针设计第56-57页
   ·荧光定量PCR引物和探针的特异性验证第57-58页
   ·制定标准曲线第58页
   ·混合样品的检测第58页
   ·深加工样品的检测第58页
 3 结果与分析第58-69页
   ·三文鱼样品DNA提取第58页
   ·特征基因的选择与体系设计第58-60页
   ·荧光定量PCR引物和探针第60-61页
   ·双重荧光定量PCR体系的建立第61-65页
     ·荧光定量PCR体系的引物与探针的验证第61-62页
     ·双重荧光定量PCR体系的建立第62-65页
   ·荧光定量PCR体系的标准曲线第65-66页
   ·混合样品的检测第66-68页
   ·三文鱼加工产品的双重荧光定量PCR检测第68-69页
 4 讨论第69-71页
第四章 环介导等温扩增技术鉴定鲑科鱼类种类的研究第71-82页
 1 材料与仪器第72-73页
   ·实验材料第72页
   ·主要仪器设备第72页
   ·试剂第72-73页
 2 实验方法第73-74页
   ·三文鱼样品基因组DNA提取第73页
   ·LAMP特异性引物设计与合成第73页
   ·LAMP反应体系第73-74页
     ·初始反应过程第73-74页
     ·反应体系的优化第74页
     ·LAMP检测特异性第74页
 3 结果与分析第74-79页
   ·LAMP检测方法的建立第74-75页
   ·LAMP反应体系的优化第75-78页
     ·单因子试验第75-77页
       ·Mg2+浓度的优化第75页
       ·dNTP Mix浓度的优化第75-76页
       ·Betaine浓度的优化第76-77页
     ·LAMP反应体系优化正交试验第77-78页
   ·LAMP检测的特异性第78-79页
 4 讨论第79-81页
   ·LAMP方法对三文鱼种类鉴定方面的可行性探讨第79页
   ·存在的问题和技术改进第79-81页
     ·重复性分析第79-80页
     ·引物设计过程及扩增产物的判别第80页
     ·假阳性问题分析第80-81页
 5 小结第81-82页
总结第82-83页
参考文献第83-88页
致谢第88-90页
攻读硕士研究生期间的研究成果第90页

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