| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 缩略语 | 第8-14页 |
| 第一章 绪论 | 第14-20页 |
| 1 杆状病毒与核脓病的防治 | 第14-15页 |
| ·杆状病毒简介 | 第14页 |
| ·家蚕血液型脓病及其防治 | 第14-15页 |
| 2 昆虫胸腺素（THY）超家族蛋白研究进展 | 第15-19页 |
| ·THY超家族蛋白概述 | 第15页 |
| ·昆虫THY超家族蛋白的同源性分析 | 第15-16页 |
| ·昆虫THY超家族蛋白的进化分析 | 第16-17页 |
| ·不同昆虫THY超家族蛋白的研究进展 | 第17-19页 |
| ·台湾乳白蚁 | 第17-18页 |
| ·棉铃虫 | 第18页 |
| ·果蝇 | 第18-19页 |
| ·家蚕 | 第19页 |
| 3 展望 | 第19-20页 |
| 第二章 实验方案设计 | 第20-22页 |
| 1 研究目的和意义 | 第20页 |
| 2 研究内容 | 第20-21页 |
| 3 实验流程 | 第21-22页 |
| 第三章 家蚕胸腺素的生物信息学分析 | 第22-27页 |
| 1 分析工具 | 第22页 |
| 2 分析方法 | 第22页 |
| 3 分析结果 | 第22-26页 |
| ·家蚕胸腺素基因序列的理化参数 | 第22页 |
| ·家蚕胸腺素蛋白二级结构 | 第22-23页 |
| ·家蚕胸腺素氨基酸三级结构 | 第23页 |
| ·家蚕胸腺素蛋白跨膜区结构域预测 | 第23-24页 |
| ·家蚕胸腺素蛋白疏水性分析 | 第24-25页 |
| ·家蚕胸腺素蛋白信号肽分析 | 第25页 |
| ·家蚕胸腺素蛋白糖基化位点预测 | 第25-26页 |
| ·家蚕胸腺素蛋白磷酸化位点分析 | 第26页 |
| 4 讨论 | 第26-27页 |
| 第四章 感染BmNPV对BmN细胞内BmTHY转录及表达的影响 | 第27-35页 |
| 1 材料与试剂 | 第27-29页 |
| ·材料 | 第27页 |
| ·试剂 | 第27页 |
| ·实验试剂配制 | 第27-29页 |
| ·Western blotting所用试剂 | 第27-28页 |
| ·SDS-PAGE电泳试剂 | 第28-29页 |
| 2 方法 | 第29-32页 |
| ·细胞培养及病毒感染 | 第29-30页 |
| ·家蚕卵巢细胞的复苏 | 第29页 |
| ·家蚕卵巢细胞的传代培养 | 第29页 |
| ·BmN细胞感染BmNPV病毒 | 第29-30页 |
| ·BmN细胞感染BmNPV后BmTHY转录量检测 | 第30-32页 |
| ·BmN细胞总RNA提取 | 第30页 |
| ·总RNA逆转录 | 第30-31页 |
| ·荧光定量PCR | 第31-32页 |
| ·荧光定量PCR扩增引物 | 第31页 |
| ·荧光定量PCR反应体系 | 第31页 |
| ·荧光定量PCR反应程序 | 第31页 |
| ·荧光定量PCR数据分析 | 第31-32页 |
| ·BmN细胞感染BmNPV后BmTHY表达量检测 | 第32页 |
| ·BmN细胞总蛋白提取 | 第32页 |
| ·蛋白浓度测定及样品制备 | 第32页 |
| ·Western blotting检测BmTHY蛋白的表达量 | 第32页 |
| 3 结果 | 第32-34页 |
| ·BmN细胞感染BmNPV后BmTHY转录量变化 | 第32-33页 |
| ·BmN细胞感染BmNPV后BmTHY表达量变化 | 第33-34页 |
| 4 讨论 | 第34-35页 |
| 第五章 接种BmNPV对家蚕五龄幼虫体内BmTHY转录及表达的影响 | 第35-39页 |
| 1 材料与试剂 | 第35页 |
| ·材料 | 第35页 |
| ·试剂 | 第35页 |
| 2 方法 | 第35-36页 |
| ·家蚕饲养及病毒接种 | 第35页 |
| ·家蚕五龄幼虫接种病毒后BmTHY转录量检测 | 第35-36页 |
| ·家蚕五龄幼虫总RNA提取 | 第35-36页 |
| ·总RNA逆转录 | 第36页 |
| ·荧光定量PCR | 第36页 |
| ·家蚕五龄幼虫接种病毒后BmTHY表达量检测 | 第36页 |
| ·家蚕五龄幼虫总蛋白提取 | 第36页 |
| ·蛋白定量及制样 | 第36页 |
| 3 结果 | 第36-38页 |
| ·家蚕五龄幼虫接种病毒后BmTHY转录量变化 | 第36-37页 |
| ·家蚕五龄幼虫接种病毒后BmTHY表达量变化 | 第37-38页 |
| 4 讨论 | 第38-39页 |
| 第六章 接种BmNPV对家蚕五龄幼虫各组织BmTHY转录影响 | 第39-46页 |
| 1 材料与试剂 | 第39页 |
| ·材料 | 第39页 |
| ·试剂 | 第39页 |
| 2 方法 | 第39-40页 |
| ·家蚕饲养及病毒接种 | 第39页 |
| ·家蚕解剖 | 第39页 |
| ·家蚕组织保存 | 第39页 |
| ·家蚕五龄幼虫接种病毒后各组织中BmTHY转录量检测 | 第39-40页 |
| ·家蚕各组织总RNA提取 | 第39-40页 |
| ·总RNA的逆转录 | 第40页 |
| ·荧光定量PCR | 第40页 |
| 3 结果 | 第40-45页 |
| ·家蚕五龄幼虫接种病毒后马氏管BmTHY转录量变化 | 第40-41页 |
| ·家蚕五龄幼虫接种病毒后气管BmTHY转录量变化 | 第41页 |
| ·家蚕五龄幼虫接种病毒后丝腺BmTHY转录量变化 | 第41-42页 |
| ·家蚕五龄幼虫接种病毒后血淋巴BmTHY转录量变化 | 第42-43页 |
| ·家蚕五龄幼虫接种病毒后脂肪体BmTHY转录量变化 | 第43-44页 |
| ·家蚕五龄幼虫接种病毒后中肠BmTHY转录量变化 | 第44-45页 |
| 4 讨论 | 第45-46页 |
| 第七章 重组蛋白rBmTHY的制备与纯化 | 第46-55页 |
| 1 材料与试剂 | 第46-47页 |
| ·材料 | 第46页 |
| ·试剂与仪器 | 第46页 |
| ·实验试剂配制 | 第46-47页 |
| ·镍柱亲和层析纯化用溶液 | 第46-47页 |
| 2 方法 | 第47-51页 |
| ·菌液重组质粒提取 | 第47页 |
| ·表达载体的转化 | 第47-48页 |
| ·固体培养基挑单菌落 | 第48页 |
| ·重组质粒PCR鉴定 | 第48页 |
| ·重组质粒双酶切鉴定 | 第48-49页 |
| ·重组质粒测序 | 第49页 |
| ·大肠杆菌中表达载体表达 | 第49页 |
| ·SDS-PAGE电泳分析表达蛋白 | 第49-50页 |
| ·重组蛋白的镍柱亲和层析 | 第50页 |
| ·纯化后重组蛋白内毒素去除 | 第50-51页 |
| ·内毒素水平检测 | 第51页 |
| 3 结果 | 第51-54页 |
| ·重组质粒PCR电泳图 | 第51页 |
| ·重组质粒双酶切鉴定 | 第51-52页 |
| ·重组蛋白诱导表达及纯化SDS-PAGE电泳图 | 第52-54页 |
| ·内毒素含量 | 第54页 |
| 4 讨论 | 第54-55页 |
| 第八章 家蚕胸腺素对抗BmNPV感染的作用研究 | 第55-64页 |
| 1 材料与试剂 | 第55页 |
| ·材料与设备 | 第55页 |
| ·试剂 | 第55页 |
| ·实验试剂配制 | 第55页 |
| 2 方法 | 第55-57页 |
| ·rBmTHY对BmN细胞抗BmNPV病毒感染试验 | 第55-57页 |
| ·rBmTHY对病毒感染BmN后的细胞存活率的影响 | 第56页 |
| ·rBmTHY的抗病毒活性研究 | 第56-57页 |
| ·rBmTHY对病毒感染BmN后的细胞形态学影响 | 第57页 |
| ·rBmTHY对家蚕五龄幼虫抗BmNPV病毒感染试验 | 第57页 |
| ·家蚕幼虫病毒舔食实验 | 第57页 |
| ·家蚕幼虫皮下接种病毒实验 | 第57页 |
| 3 结果 | 第57-63页 |
| ·rBmTHY对BmN细胞抗BmNPV病毒感染作用 | 第57-60页 |
| ·rBmTHY对BmN细胞感染BmNPV病毒后的细胞存活率的影响 | 第57-58页 |
| ·rBmTHY抗病毒活性 | 第58-59页 |
| ·rBmTHY对BmN细胞感染BmNPV病毒后细胞形态的影响 | 第59-60页 |
| ·rBmTHY对家蚕五龄幼虫抗BmNPV病毒感染作用 | 第60-63页 |
| ·rBmTHY对家蚕幼虫舔食BmNPV病毒后存活、上蔟结茧及死笼数的影响 | 第60-61页 |
| ·皮下接种病毒实验结果 | 第61-62页 |
| ·rBmTHY对家蚕五龄幼虫皮下接种BmNPV病毒后不同时间段幼虫死亡的影响 | 第62-63页 |
| 4 讨论 | 第63-64页 |
| 结论 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-69页 |
| 致谢 | 第69页 |
